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鸭疫里默氏杆菌原生质体制备与再生的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
以耐药标记的鸭疫里默氏杆菌TXRAl(CAd ,Elf)为亲本菌株,在DNase I始终存在的条件下,采用Lysozyme-EDTA法制备原生质体,然后在高渗琼脂平板上再生。系统地优化了影响原生质体制备及再生的各种条件,摸索出鸭疫里默氏杆菌TXRA1以Lysozyme 0.1 g/L作用20 min后补加EDTA至终浓度为0.01 mol/L继续作用45 min为最佳试验条件,并成功获得了92%的原生质体制备率和38.77%的再生率。 相似文献
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为建立一种能够区分猪瘟病毒(CSFV)强毒与弱毒疫苗C株的SYBR Green Ⅰ荧光定量RT-PCR结合熔解曲线分析方法,本研究对GenBank中登录的25株CSFV强毒株和兔化弱毒疫苗C株全基因组序列进行比较分析,设计一对共用下游引物以及分别针对CSFV强毒株与弱毒疫苗的特异性上游引物,其Tm值分别为84.5±0.5℃和88.5±0.5℃,熔解曲线分析显示为单特异峰.检测结果显示本实验建立的鉴别CSFV强毒感染与弱毒疫苗的荧光定量RT-PCR结合熔解曲线分析方法特异性强,对其他相关病毒无特异性扩增;敏感性高,最低检出量为5×RID50的细胞疫苗基因组拷贝;重复性好;并且扩增效率高、线性范围广、检测时间短,可对免疫猪群中CSFV强毒感染做出快速准确的鉴别检测,为有效防制猪瘟提供依据. 相似文献
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为建立特异性和敏感性高的检测鸭坦布苏病毒感染的方法,采用原核表达系统对鸭坦布苏病毒(DTMUV)E基因进行了克隆与表达,SDS-PAGE电泳结果显示融合蛋白大小为54.3 ku.Western blot结果表明,经亲和层析法纯化后的重组蛋白能与DTMUV阳性血清发生特异性反应.以纯化的重组E蛋白作为包被抗原,初步建立了检测E蛋白抗体的间接ELISA方法.对ELISA各种反应条件进行了优化,确定了最适工作条件.优化后确定的抗原最适包被浓度为7 μg/mL,血清的最佳稀释度为1;320,酶标抗体最适稀释度为1:1 000.在优化条件下,阴性和阳性临界值判定标准为0.324 4.本研究建立的快速检测DT-MUV抗体的间接ELISA方法为该病的检测和流行病学调查提供了技术手段. 相似文献
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应用RT-PCR方法扩增到了山东省2006-2007年分离的10株肾型IBV核蛋白(N)基因片段,并将其进行了克隆、序列测定及分析.结果发现,10株肾型IBV分离株核蛋白基因均含有1个长1 230 bp的ORF,编码由409个氨基酸残基组成的多肽,未发现碱基的插入和缺失.与GenBank中的20个IBV参考毒株核蛋白基因序列进行比较和分析,发现10株肾型IBV分离株主要分布于2个群中.第Ⅰ群与弱毒疫苗株H120和参考毒株D41、D1466的亲缘关系较近,第Ⅱ群与参考毒株LX4、GDS14的亲缘关系较近.对核蛋白基因及其局部功能区序列比较发现,山东分离株与H120疫苗株核蛋白相比存在广泛的氨基酸变异,以点突变为主,突变位点无明显规律性. 相似文献
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对取自山东省泰安、莱芜、聊城等三市地集贸市场39个批次340头份屠牛胴体的背最长肌进行了含水量测定。其结果;样品中的含水量分别为77.00%,76.89%和76.64%,与正常牛肉牛中的标准含水量(70.70%)间均有极显著差异(P〈0.01)。说明目前集贸市场上出售的牛肉掺水状况相当普遍且十分严重。 相似文献
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山东省牛“猝死病”病原学研究 总被引:9,自引:0,他引:9
采用流行病学调查、毒物检测及微生物学检验等方法,对山东省牛“猝死病”发病原因进行了系统研究。结果证明,本病是由凝结芽胞杆菌和克雷伯氏杆菌肺炎亚种协同感染所致,并通过研制成的二联灭活菌苗,有效地控制了牛“猝死病”的发生。 相似文献
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英国自1996年6月暴发牛海绵状脑病(BSE,又称疯牛病)以来,引起世界各国、尤其是欧共体各国的恐牛症,各成员国"谈牛色变",疯牛病给兽医界又带来一重大难题.1985年4月在英国首先发现该病,于1986年11月定为BSE,BSE的流行给养牛业、饲料加工业、牛肉及其产品、活牛、牛精液和胚胎的贸易都造成了严重损害,同时也严重威胁着人类的生命和健康.我国加入世贸组织后,畜产品进出口会大大增加,因此兽医监督部门应严把检验关,以杜绝疯牛病的传入. 相似文献
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动物防疫与检疫是当今世界普遍关注的问题,随着全球经济的一体化,动物疫病预防和控制越来越受到世界各国的普遍重视. 相似文献
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山东省肉牛主要疫病的检测 总被引:1,自引:0,他引:1
对山东省肉牛饲养比较集中的8个县(市)部分马牛场及其周边区域肉“牛群的疫现部分老的疫病已不存在,但占疫病的种类数量仍在逐渐增多,且复杂多样。提醒人们在肉牛规模化养殖中防制疫病的任务还相当艰巨。 相似文献