禽腺联病毒的分离及其基因组鉴定   总被引：3，自引：1，他引：3  

王建业  孙怀昌  朱国强 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》2005,26(2):7-10

为了获得用于重组载体构建的禽腺联病毒(AAAV),用无菌处理后的鸡粪便样品与鸡胚致死孤儿病毒同时接种SPF鸡胚,根据已发表的AAAV基因序列设计引物,用PCR对致死鸡胚的尿囊液进行检测,结果从1份样品接种的鸡胚尿囊液中扩增到预期大小的AAAV Rep和Cap基因片段;对纯化后的PCR产物进行序列测定,将所获序列与已发表的AAAV Rep和Cap基因进行比较,其核苷酸序列同源性分别为97．1％和94．6％;将PCR检测阳性的尿囊液进行鸡胚传代,用PCR对不同时间死亡鸡胚的尿囊液进行再次检测,结果均扩增到预期大小的基因片段;提取病毒核酸,电泳观察到约4．7kb的AAAV基因组。说明已成功地从鸡粪便样品中分离到1株AAAV,为重组AAAV载体的构建打下了基础。  相似文献   

动物细胞培养及微载体技术研究进展   总被引：3，自引：0，他引：3  

刘轶  朱国强 《吉林农业大学学报》2007,29(2):203-206

动物细胞培养作为生化工程学科领域中迅速发展起来的生物技术与化学工程结合的新型学科,无论在基础研究和应用研究方面都越来越受到生物技术界的重视,现已成为生化工程学科主要前沿学科之一。文中介绍了动物细胞培养技术,并就微载体细胞培养进行了详细的论述。  相似文献   

禽腺联病毒全基因组的克隆及感染性病毒的拯救     

王建业  孙怀昌  朱国强 《中国预防兽医学报》2007,29(11):825-829

为了克隆禽腺联病毒(Avian adeno-associated virus,AAAV)全基因组用于构建基因转移载体研究,以鸡胚致死孤儿病毒(CELO)作为辅助病毒与AAAV共接种SPF鸡胚进行AAAV的增殖,将AAAV约4.7kb双链基因组DNA与pCR2.1载体连接,构建了含AAAV全基因组的重组质粒pAAAV并进行了测序。序列分析表明,AAAV YZ-1株的基因组为4684bp,两端具有141bp的末端倒置重复序列和Rep蛋白结合位点特征序列,与GenBank中收录的AAAV DA-1株和VR-865株的核苷酸序列同源性分别为95.0%和92.2%。将pAAAV质粒转染CELO病毒感染的鸡胚肝细胞系,获得了感染性AAAV病毒粒子,结果证明克隆的AAAV基因组中存在与病毒复制和包装相关的正确关键序列,可用于重组AAAV载体的构建。  相似文献   

苏太仔猪FUT1基因M307位点多态性与F18大肠杆菌抗病相关性的体外鉴定   总被引：2，自引：0，他引：2  

吴圣龙  原志伟  鞠慧萍  黄雪根  华金弟  沈家林  周冠月  王建业  谢恺舟  陈国宏  朱国强 《中国预防兽医学报》2007,29(10):783-787

采用PCR-RFLP方法检测了江苏苏太断奶仔猪FUT1基因M307位点等位基因多态性分布,在所检的49头仔猪中,GG基因型个体16头,AG基因型19头,AA基因型14头。在此基础上,制备上述不同基因型个体仔猪小肠上皮细胞,分别与表达F18ab菌毛的野生型大肠杆菌、表达F18ac菌毛含fed操纵子全基因的重组大肠杆菌和V型系统表面分泌表达F18abFedF亚单位的重组大肠杆菌进行体外黏附试验和黏附抑制试验。研究结果表明:FUT1基因M307位点中GG型和AG型仔猪小肠上皮细胞均能黏附上述3种大肠杆菌,而AA型个体小肠上皮细胞则不能黏附。将上述3种大肠杆菌分别与抗F18ab菌毛高免血清、F18ac菌毛高免血清及抗F18abFedF亚单位单因子血清作用后,则失去黏附仔猪肠上皮细胞能力。上述结果对苏太猪从体外试验上证明了FUT1基因M307位点多态性与断奶仔猪腹泻和水肿病存在着直接的相关性。  相似文献   

部分引进猪种α1-岩藻糖转移酶基因多态性研究   总被引：2，自引：1，他引：2  

吴圣龙  鞠慧萍  孙鹏翔  包文斌  朱国强  李碧春  谢恺舟  陈国宏 《中国畜牧兽医》2007,34(6):52-54

本研究采用PCR RFLP技术对4个引进猪种杜洛克、约克夏、长白猪和皮特兰共计122头猪的FUT1基因进行了多态性分析。结果表明：4个猪种在该FUT1基因座位存在多态性，但抗性基因型AA仅在杜洛克和皮特兰猪中分布。卡方检验结果表明，长白猪与皮特兰间FUT1基因基因型分布差异极显著，长白猪与杜洛克猪之间差异显著，约克夏与皮特兰间差异也显著。  相似文献   

德国1992～1996年禽副粘病毒Ⅰ型分离株的特性研究     

郁斌  朱国强 《预防兽医学进展》2000,2(2):42-45

  相似文献   

防治鸡大肠杆菌病方剂统计分析   总被引：2，自引：0，他引：2  

贺常亮  付本懂  韦旭斌  朱国强 《中兽医医药杂志》2008,27(3):74-76

鸡大肠杆菌病是由鸡致病性大肠杆菌引起的局部或全身性感染的疾病，临床表现为多种病型，包括大肠杆菌性败血症、气囊炎、肉芽肿、蜂窝织炎、输卵管炎等^[1,2]。采用疫苗进行免疫接种、使用抗菌药物治疗常因致病菌株血清型的多样性以及致病机理的复杂性而使免疫接种失败和抗菌药物疗效不佳，抗菌药物的耐药性及其残留，给禽产品安全和公共卫生带来诸多潜在危胁。  相似文献   

鸡传染性眼炎流行特点及诊治     

庄国宏  田惠芳  周继宏  朱国强  严维巍  王永坤  王兆广  杨加祥  王金鹏  王正平 《中国禽业导刊》1998,(D4)

近几年来，江苏省盐城、徐州、扬州、睢宁、姜堰、海安等市县和安徽省天长市及山东省的一些市、县的养鸡户，尤其是饲养管理条件较差的鸡群，每年流行一种以眼睑肿胀、眼结膜内和鼻窦内许多灰白脓性物或灰白色干酪物，眼结膜和鼻窦粘膜充血、溃疡等为主要特征的眼炎。本病病程较长，常造成较大经济损失，影响了养鸡业的健康发展。本文作者通过调查，走访养鸡场和养鸡户，同时对临床病例进行现场剖检及实验室检查与防治措施等方面工作，结合收集到的18个地区的27个鸡场（计3万余只）的发病资料，进行剖析，现报告如下：一．流行情况本病主要…  相似文献   

蜂胶液抑制霉菌试验   总被引：2，自引：0，他引：2  

陈洪涛  朱国强 《中国兽医杂志》1997,23(11):16-17

蜂胶液抑制霉菌试验＊陈洪涛朱国强田慧芳成大荣孙镇平（扬州大学农学院动物医学系，江苏２２５００９）蜂胶是蜜蜂从植物的芽苞、树皮或茎干伤口上采集来的树脂和部分蜂蜡、花粉的混合物。蜂胶含有许多生物活性物质，有广泛的医疗作用。我们已于１９９３年使用蜂胶乳剂试...  相似文献   

大肠杆菌Nissle 1917鞭毛蛋白部分高变区功能初步研究     

杨颖  朱军  朱国强 《中国兽医寄生虫病》2014,(1):37-43

初步研究大肠杆菌Nissle 1917（E. coli Nissle 1917,EcN）鞭毛蛋白（Flagellin, FliC）高变区的功能,为探讨其作为表面展示系统的可行性打下基础。以EcN无质粒克隆（EcN was cured of its 2 cryptic plasmids pMUT1 and pMUT2 resulting in EcNc）为实验菌株,分别构建2个鞭毛蛋白基因（fliC）高变区859-888位、829-858位的缺失突变株和回补菌株。分析突变区域对EcNc的生长性能、生化特性、运动性及抗原性等方面的影响。结果显示：EcNc、两个缺失株和回补株的生长特性无明显差异,且三者生化试验结果一致。缺失突变株在半固体培养基上不能运动,而回补株均恢复了原运动性;缺失突变株均不与H1单因子血清发生凝集,而互补菌株均能产生与EcNc一致的凝集反应。表明高变区的这两个区域尽管不影响菌株的生长性能和生化特性,但与EcN的运动性及抗原性密切相关。这为进一步探索EcN鞭毛展示技术的研究提供了一定的数据。  相似文献