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通过改良神经元细胞体外培养体系,建立一种高效、可行的绵羊下丘脑神经元体外培养方法,为研究绵羊神经内分泌调节体系及季节性发情机理奠定基础。通过Ⅳ型胶原酶将90 d左右的胎羊下丘脑组织消化成单细胞悬液,接种到预先用多聚赖氨酸包被的培养皿中,2 d后更换为无血清培养基进行培养,并采用两种方法对神经元细胞进行鉴定。结果显示:培养2 d的下丘脑神经细胞,胞体较小且单个独立分布。培养4~6 d神经元的突起明显增多增长,神经元胞体变大。培养8 d的神经元细胞更加成熟,突起联系更加紧密,形成密集的神经细胞网络。培养12 d后,下丘脑神经元细胞活性减弱,部分细胞开始凋亡。通过RT-PCR检测发现,培养的下丘脑细胞能够表达神经元特异基因Noggin、TUBA4A,经免疫荧光鉴定下丘脑神经元细胞纯度为95.6%。这些结果表明,通过此细胞培养方法能够获得纯度较高的绵羊下丘脑神经元细胞,为进一步研究绵羊神经内分泌调节体系及季节性发情机理提供目标细胞。 相似文献
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几内亚比绍共和国位于非洲西部,属农业国,是联合国公布的最不发达国家之一。大陆部分北接塞内加尔,东、南邻几内亚,西濒大西洋。国土面积36 125 km2,地势东北高西南低,除东南隅为平缓丘 相似文献
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以报春刺玫(Rosa primula)和单瓣黄刺玫(R.xanthina)储存花粉为材料,设计单因素试验和正交试验,考察了蔗糖、硼酸及Ca(NO3)2.4H2O浓度对两种刺玫花粉萌发率的影响。结果表明,适宜浓度的蔗糖和硼酸能促进花粉萌发,而较高浓度的Ca(NO3)2.4H2O会抑制花粉萌发。正交试验结果表明适合报春刺玫花粉萌发的最佳培养基为20%蔗糖(质量分数,下同)+100 mg/L硼酸;适合单瓣黄刺玫花粉萌发的最佳培养基为10%蔗糖+50 mg/L硼酸。 相似文献
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西藏环状病毒(Tibet orbivirus,TIBOV)为环状病毒属的新成员,病毒于2009年首次从我国西藏墨脱县采集的圆斑按蚊中分离,目前,对该病毒的认识仍十分有限。本研究对1株分离自我国云南省师宗县库蠓的新型TIBOV毒株YNSZ/V290/2019进行了鉴定,结果表明,病毒可在C6/36与BHK-21细胞上引起明显的细胞病变,电镜下观察,病毒粒子呈球形,直径55~75 nm,具有环状病毒属病毒典型形态特征。电泳结果显示,病毒基因组为十节段双链RNA,呈现"3-3-3-1"的电泳带型特征。对环状病毒属病毒高度保守的基因节段及其编码蛋白(Seg-3/T2)的序列分析显示,YNSZ/V290/2019为TIBOV的成员,与其他TIBOV毒株的核酸与氨基酸序列相似度分别为80.90%~81.70%与97.20%~97.30%。对决定环状病毒属病毒血清型的基因节段及其编码蛋白(Seg-2/OC1)的序列分析显示,YNSZ/V290/2019与已知TIBOV毒株的核酸与氨基酸序列相似度分别为26.90%~30.60%与28.50%~33.20%,表明该毒株可能是一种新血清型的TIBOV。对采集于师宗县牧场的40份黄牛与68份山羊血清进行血清中和试验,结果显示,新型TIBOV在牛、羊的阳性率分别为22.50%与4.41%。新型TIOBV在我国的发现,丰富了我国虫媒病毒的研究,为深入研究我国TIBOV的分布、致病性、感染宿主范围与诊断试剂的开发提供了基础。 相似文献
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旨在研究前列腺素(prostaglandins,PGs)D2与F2α对绵羊黄体(corpus luteum,CL)组织形态、生殖激素及其关键基因与受体表达的影响,并解析其在黄体退化中的相互关系及机理,为保证母畜连续性繁育提供新的理论依据。将16只哈萨克绵羊随机分成4组,在发情周期的黄体期分别子宫肌内注射PGD2、PGF2α、PGD2+PGF2α及等量生理盐水(对照组),采用HE染色结合物理拍照对比处理前后黄体组织形态变化,ELISA法检测外周血清中P4、E2、PGD2和PGF2α浓度变化;并利用qRT-PCR和Western blot检测关键合成酶基因HPGDS、PGFS及其受体DP1、CRTH2、FP的mRNA和蛋白表达水平。结果显示,与对照组相比,发现PGD2+PGF2α组中黄体退化效果最明显,随后依次是PGF2α组明显大于PGD2组。ELISA结果显示,随着处理后时间的推移,不同试验处理组中,P4浓度均呈显著下降趋势(P<0.05),其中在PGD2+PGF2α组中该变化趋势最显著(P<0.05);但E2、PGD2和PGF2α浓度均呈现不同差异性变化,其中,PGD2+PGF2α组中PGD2和PGF2α浓度呈显著下降(P<0.05),PGF2α组中E2浓度呈显著升高(P<0.05)、PGD2浓度呈显著下降(P<0.05),PGD2组中E2浓度呈显著下降趋势(P<0.05)、PGD2浓度呈显著升高趋势(P<0.05)。qRT-PCR和Western blot结果显示,与对照组相比,PGD2+PGF2α组中HPGDS mRNA和蛋白表达量显著下调(P<0.05),PGFS、CRTH2及FP mRNA和蛋白表达量显著上调(P<0.05);PGF2α组中HPGDS mRNA和蛋白表达量呈显著下调(P<0.05),其它基因mRNA和蛋白表达量呈显著上调(P<0.05);PGD2组中HPGDS、DP1、PGFS及FP mRNA和蛋白表达量呈显著上调(P<0.05)。同时,在不同受体基因表达量检测时,发现PGD2组中DP1受体表达量显著高于CRTH2受体(P<0.05),而PGF2α组中CRTH2表达量则显著高于DP1(P<0.05)。综上,PGD2无论单独使用还是结合PGF2α使用,均能够促进CL的退化,尤其是二者结合时有明显的协同促溶效应,其作用机制可能与其体内激素水平、关键合成酶及受体类型的表达有关,这为全面认识哺乳动物CL退化的调控机制奠定了基础,也为进一步优化高效繁殖技术(尤其是PGs方案)提供了新的思路。 相似文献