H9N2亚型猪流感病毒血凝素重组蛋白在LAT诊断方法中的应用     

张瑞华  刘珍  郑雪花  李春红  李寸欣  金梅林  陈焕春 《畜牧与兽医》2011,43(11)

利用原核表达的H9亚型猪流感病毒血凝素蛋白做为抗原,建立了检测H9亚型猪流感病毒抗体的乳胶凝集试验方法。阳性重组质粒pGEX-HA转化大肠杆菌BL21获得了原核表达,表达的血凝素蛋白位于包涵体中,包涵体经变性、复性处理,利用复性产物作为抗原,经碳二亚胺(EDAC)将表达产物和羧基化的乳胶共价偶联,建立了该LAT检测方法。结果表明应用HA重组蛋白作为诊断抗原建立的检测方法具有特异性强、敏感性高、重复性好的特点,可用于H9亚型猪流感抗体水平监测、流行病学调查和现地疫病普查。  相似文献   

鱼类病毒性神经坏死病毒衣壳蛋白在昆虫细胞中的表达及其特性   总被引：1，自引：0，他引：1  

LUO Wei  田飞焱  LIU Hong  陈焕春  LI Hui-fang  刘宗晓  WANG Kan  蔡伊娜  LV Jian-qiang 《水产学报》2008,32(4)

利用RT-PCR技术获得病毒性神经坏死病毒0603株的衣壳蛋白基因,将其插入到杆状病毒Bac-To-Bac表达系统的pFastBacI质粒中,构建了pFastBac-cp质粒.转化DH10Bac大肠杆菌后获得重组穿梭载体Bacmid-cp,脂质体介导将其转染Sf9细胞产生有感染性的重组杆状病毒AcNPV-cp.利用AcNPV-cp感染Sf9细胞后,SDS-PAGE分析可见大小约为37 ku的特异性蛋白带,Western-blotting分析发现,其可以与病毒性神经坏死病毒阳性血清反应出现特异性的杂交带.试验结果表明,AcNPV-cp在Sf9细胞中成功地表达了病毒性神经坏死病毒的衣壳蛋白,其具有良好的免疫学活性.负染电镜观察发现,CP蛋白可自行装配成病毒样颗粒,其大小形态类似于病毒性神经坏死病毒.制备超薄切片后电镜观察发现,CP蛋白自行装配成的病毒样颗粒呈晶格状排列在细胞质中.为研制有效防控鱼类病毒性神经坏死病的新型颗粒性疫苗奠定了基础.  相似文献   

依据多倍体形态特征快速高效发掘柑橘四倍体     

周锐  解凯东  王伟  彭珺  谢善鹏  胡益波  伍小萌  郭文武 《园艺学报》2020,47(12):2451-2458

基于柑橘多胚性品种存在珠心细胞自然加倍的特点，建立了基于种子催芽、生长室实生播种、幼苗“观根辨叶看油胞”形态初选和流式细胞仪倍性鉴定的发掘柑橘四倍体的快速方法。采用该方法，分别从无酸甜橙、红江橙、贡柑、年橘、新会柑、滑皮金柑的432、506、1 356、1 870、2 749和685株实生苗中，发掘出疑似四倍体5、6、5、17、45、7株；通过倍性检测，从上述6个品种分别获得四倍体4、5、5、14、39、5株，形态初选准确率分别为80.0%、83.3%、100.0%、82.4%、86.7%和71.4%。与之前的四倍体发掘方法相比，本方法四倍体初选准确率高，并且从种子播种到获得四倍体植株耗时不超过40 d。SSR分子鉴定表明，所鉴定的四倍体均来自其二倍体品种珠心细胞自然加倍形成的双二倍体，为柑橘三倍体无核育种提供了珍贵的四倍体亲本资源。  相似文献   

高等院校动物医学专业临床实践教学面临的形势与对策     

蔡旭旺  陈焕春  曹胜波  张安定  徐晓娟  周祖涛  吴美洲 《高等农业教育》2019,(6)

临床实践教学是动物医学教育的关键环节,直接决定着动物医学人才的培养质量。随着我国经济的发展、科技的进步和规模化养殖业的兴起,伴侣动物的增多,以及人们对绿色食品和环境的追求,动物医学在畜牧业发展、宠物医疗、食品安全、公共卫生安全等领域发挥越来越重要的作用,对动物医学人才的临床实践技能提出了更高要求。文章在分析当前我国动物医学教育中临床实践教学面临的形势与存在的问题基础上,提出了解决这些问题的主要对策建议。  相似文献   

H9N2亚型猪流感病毒血凝素基因的表达及LAT诊断方法的研究     

张瑞华  李春红  薛拥志  金梅林  陈焕春 《中国兽医学报》2012,32(4):548-551

根据H9N2亚型猪流感病毒血凝素基因序列设计并合成引物,从本室分离保存的H9N2亚型猪流感病毒中扩增出血凝素基因,并将其克隆进pMD18-T载体,限制性酶切及序列测定后,进一步将其信号肽缺失并亚克隆到pGEX-KG中,使其在E.coli BL21（DE3）中与GST融合表达。SDS-PAGE显示表达的融合蛋白的相对分子质量约为90 000。Western印迹表明表达的蛋白质具有免疫学活性。表达产物位于包涵体中,包涵体经变性、复性处理,利用复性产物作为抗原,经碳二亚胺（EDAC）将表达产物和羧基化的乳胶共价偶联,建立了H9亚型猪流感病毒抗体的乳胶凝集试验的检测方法,结果表明,应用HA重组蛋白作为诊断抗原具有特异性强、敏感性高、重复性好的特点,可用于H9亚型猪流感抗体水平监测、流行病学调查和现地疫病普查。  相似文献   

纤维素降解菌复合系产酶条件研究     

周锐 《安徽农学通报》2012,18(19):35-36

通过对纤维素降解菌复合系的一系列性质进行研究,结果表明:该复合系最适碳源为蔗糖+纤维素粉,最适氮源为麸皮+(NH4)2SO4,最适pH为6.5,最适培养温度为40℃。  相似文献   

中稻新组合区试初报     

张运根  周锐  赵福长  朱剑文 《安徽农学通报》2005,11(6):61-61,123

通过对9个品种(组合)的生育期、生育特性及产量性状进行分析,结果表明:丰两优香1号,宜香优2292两个品种试验产量均高于两优培九,应扩大示范;泰优1号、吉优1号、农丰1号、皖稻149略低于两优培九,有必要进一步试验示范.其它组合综合表现不佳,停试.  相似文献   

以辩证的视角看进出境动植检工作的作用     

吴晓丰  周明华  孙洪生  周锐 《植物检疫》2016,(5):17-19

进出境动植检工作在国民经济社会发展中发挥了重要作用,本文分析了影响评价动植检工作作用的四种关系,提出了进一步提升进出境动植检工作作用的建议。  相似文献   

“三环联控”构建具有中国特色的出境木质包装监管体系     

吴晓丰  周锐  纪睿  师振华 《植物检疫》2015,(1):63-66

根据目前出境木质包装检疫监管现状,从木质包装生产企业、标识加施企业、使用企业的角度入手,对影响出境木质包装检疫质量各种风险进行评估,并根据风险评估的结果,提出了以企业监管、物流监管和检疫监管为核心的"三环联控",着力从法律和操作层面破解出境货物木质包装检验检疫监管难题,构建具有中国特色的出境木质包装监管体系。  相似文献   

猪系统性疾病的流行现状与防控措施     

陈焕春 《兽医导刊》2017,(11)

<正>影响我国生猪健康养殖,制约生猪产业发展的主要是三大系统性疾病:一是繁殖障碍类疾病,二是消化道类疾病,三是呼吸道类疾病问题。这三大问题直接表现就是生得少、死得多、长得慢。一、繁殖障碍类疾病繁殖障碍类疾病可以分为病毒性、寄生虫性、细菌性疾病三类。病毒性的疾病病原主要有猪瘟、伪狂犬、蓝耳、乙脑、圆环病毒、细小病毒,弓形虫病是寄生虫性繁殖障碍的主要原因,细菌性繁殖  相似文献