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为表达猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M蛋白主要抗原表位基因序列,参照GenBank中发表的PRRSVSCQ株M蛋白基因设计并合成一对特异性引物,通过PCR方法从重组质粒pMD18-T-M扩增得到缺失N端跨膜区的M蛋白基因片段dM(deletingM),将其与pMD19-Tsimplevector连接,经测序正确后克隆至高效原核表达载体pGEX-4T-1,得到重组表达载体pGEX-4T-1-dM,并将其转化大肠杆菌Rosetta(DE3),经IPTG于37℃诱导,PRRSVM基因获得表达。经SDS-PAGE分析,所表达的融合蛋白分子量约为35kDa。以纯化的重组蛋白作为抗原,经WesternBlot分析结果表明该重组蛋白可被PRRSV阳性血清所识别,可用于PRRSV的检测。 相似文献
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在不同条件下对越橘红色素稳定性的研究结果表明:越橘红色素热稳定性较差、温度对其影响明显,在70℃时,越橘红色素会受到一定影响;45℃以下低温避光条件下,稳定性较好;低pH值稳定性较好,添加异抗坏血酸钠、三聚磷酸钠可提高越橘红色素的稳定性;金属离子Fe2+和Cu2+使越橘红色素的颜色改变或发生明显的沉淀,而Pb2+、Al3+、Zn2+、Mg2+、Mn2+影响较小。 相似文献
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西瓜花叶病毒2号外壳蛋白基因克隆及其在大肠杆菌中的表达 总被引:6,自引:0,他引:6
以郑州地区西瓜花叶病病叶分离物-西瓜花叶病毒2号(2-WMV-2)为毒源,从繁殖寄主西葫芦病叶中分离,鉴定了病毒,以病毒基因组RNA为模板,逆转录合成cDNA,通过多聚酶链式反应(PCR),从cDNA中扩增和克隆了病毒外壳蛋白(CP)基因,其中包括3’端非编码区,完成了全部核苷酸序列分析,CP基因全长1099个核苷酸,其中编码区长903个核苷酸,编码301个氨基酸,3’端非编码区长196个核苷酸。 相似文献
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为初步了解四川省绵阳市规模化养兔场的寄生虫感染情况,以便制定高效的防控策略,2019年5月应用饱和盐水漂浮法和循序水洗沉淀法,选取某大型规模化养兔场,随机采集111份肉兔新鲜粪便样品进行寄生虫检测,并进一步用麦克马斯特法对检测为阳性的粪便进行虫卵计数。寄生虫检测结果显示:111份兔粪便样品中,54份为阳性,平均阳性率为48.65%;共检出球虫和线虫两大类胃肠道寄生虫,其中球虫阳性率为47.75%,线虫为1.80%,混合阳性率为0.9%;小于3月龄兔的寄生虫阳性率(95.45%)高于3~6月龄兔(48.89%)和6月龄以上兔阳性率(25.00%),差异显著(P<0.05);公兔的寄生虫阳性率为44.00%,母兔为33.33%,经卡方检验,得到卡方值为0.956,自由度为1,说明兔场寄生虫阳性率与宿主性别不相关。虫卵计数结果显示:54份阳性粪便样品中,球虫每克粪便卵囊数(OPG)最高为98600,平均值为15760;线虫每克粪便虫卵数(EPG)最高为1000,平均值为800;小于3月龄患兔大多为重度感染,而大于3月龄患兔多数为低强度感染。结果表明,绵阳市兔场球虫感染率较高,以球虫感染为主,且感染与兔月龄密切相关其中幼龄兔感染最为严重,由此建议兔场重视幼龄兔的饲养管理并提前驱虫。 相似文献