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31.
本研究以鸡减蛋综合症(EDS-76)为模型,对常规的免疫斑点(IB)试验做了改进,在对各主要参数进行系统测定的基础上。建立了可用于检测EDS-76的IB诊断法。在该方法中,病鸡血清呈“ ”形染色,健康鸡血清呈“-”形染色,从而使检测结果与判定符号实现了统一。对16种鸡病的标准阳性血清、EDS-79病毒人工感染鸡血清、临床健康鸡血清和SPF鸡血清的检测结果及与现行的EDS-76血凝抑制(HI)试验和琼脂扩散(AD)试验比较表明,IB试验不仅特异、敏感,而且简便、快速。本研究在禽病系列诊断试剂盒的研制方面是一个有益的偿试。  相似文献   
32.
近十几年来,我国经济建设和社会发展取得了举世瞩目的成就,同时,我国兽药GMP事业也取得了长足发展。我们取得的成绩,既得益于农业部党组和部兽医局(包括原畜牧兽医司)的正确领导,也来自于全国各省药政、药检部门的大力支持和配合,更来自于全国各个兽药生产企业的辛勤努力。许多领导和专家对GMP工作给予了积极关注和支持,并提出了许多建设性的意见和建议,  相似文献   
33.
一株鹅源高致病力禽流感病毒分离株血凝素基因的分析   总被引:20,自引:3,他引:17  
禽流感病毒(AIV)的表面结构蛋白血凝素(HA)在决定病毒致病力、受体结合特性、宿主范围等方面起着关键作用。本研究初步鉴定为高致病力毒株的AIV鹅体分离株A/Goose/Guangdong/1/96(H5N1)的HA基因进行了克隆并测序。结果表明,这一在无胰酶条件下可在单层鸡胚成纤维细胞培养物上形成蚀斑的毒株在其HA裂解位点附近有连续6个碱性氨基酸的插入物,从而揭示了其高致病力的分子基础。进一步的序列比较发现这一毒株与1997年香港流感病毒A/Hongkong/156/97(HK/97)的HA基因核苷酸和氨基酸同源率分别高达98.0%和98.2%,且其6个糖基化位点、2个受体结合位点及裂解位点碱性氨基酸插入物的序列均完全一致,提示该毒株与HK/97具有相似的生物学特性。  相似文献   
34.
禽流感油乳剂灭活疫苗的研究   总被引:36,自引:3,他引:33  
将6种不同亚型的禽流感病毒(AIVH2N9、H3N8、H5N1、H5N2、H7N1、H9N2)分别接种鸡胚,收获尿囊液,经甲醛灭活,以矿物油为佐剂制成油乳剂灭活疫苗。疫苗接种4和8周龄SPF鸡,注苗后均无不良反应。每种亚型疫苗免疫后14天和21天攻毒保护率均达90%-100%。分别用H5N1和H9N2亚型灭活疫苗免疫8周龄SPF鸡、25和28周龄健康商品蛋鸡,免疫后7天产生免疫力,14天保护率达100%,21天后抗体达高峰,仔鸡接苗后最高血凝抑制(HI)几何平均滴度(GMT)为7.3-8.0log2,蛋鸡为8.0-10.5log2。免疫后180天,抗体效价不低于6.5log2。免疫后180天分别以AIV攻击,H5亚型疫苗组,用强毒攻击无一发病和死亡,对照鸡全部发病死亡;H9亚型疫苗组,对照鸡在攻毒后72小时停产,免疫鸡无一发病且产蛋正常,对同源攻毒的保护率达100%。  相似文献   
35.
用PCR扩增猪圆环病毒II型广东分离株的衣壳蛋白羧基端基因,将PCR产物连接到重组型质粒pR上,转化DH5α细胞并筛选阳性克隆;重组质粒经PCR鉴定并测序后,转化E2菌,将重组E2菌与缺陷型噬菌体T4-Z1同源重组后,得到重组噬菌体,SDS-PAGE和Westernbloting分析,表明衣壳蛋白基因在噬菌体表面正确展示,表达的融合蛋白的分子量约为25Ku。  相似文献   
36.
<正>一、关于当前饲料工业生产形势总体看,我国饲料生产主要呈现以下几方面特点:1.猪饲料大幅增长为保证畜产品供给,2007年国家连续出台养殖补贴、保险等多项有利政策扶持生猪生产。迅速恢复的生猪养殖有力拉动了饲料需求,预计2008年猪饲料产量达到4400万吨,同比增长10.0%。一举扭转2007年猪饲料产  相似文献   
37.
公猪精液PRRSV变异株检测及NSP2、ORF5基因序列分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
用荧光RT-PCR方法从某猪场精液中检测到猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)变异株(NSP2 1 594~1 680 bp缺失)核酸阳性.提取1份阳性样品病毒核酸测定和分析其NSP2和OBF5全基因序列,结果表明NSP2基因由950个氨基酸组成,与CH-1a、VR-2332等经典PRRSV相比481位缺失1个氨基酸、532~560位连续缺失29个氨基酸,与JXA1、HUN4等毒株具有相同的缺失特性;ORF5基因第13、151位为具有强毒特性的精氨酸(R),存在4个潜在的糖基化位点,分别位于30~32、35~37、44~46和51~53位氨基酸.遗传进化分析表明,测定序列与JX-A1、HUN4等毒株关系最近,与CH-1a、NVSL等同属一个大分支,而与BJ-4、P129、RespPRRS MLV、VR-2332等处于不同分支.研究证实公猪精液可携带PRRSV变异株,因此猪场(群)在人工授精和引进精液时必须强化检疫和生物安全措施.  相似文献   
38.
复方中药对禽流感病毒的防治研究   总被引:1,自引:0,他引:1  
 【目的】探讨自行研制的由贯众、板蓝根、黄芪、柴胡、连翘、黄连、金银花、黄芩及甘草配制的复方中药在体内、体外对禽流感病毒的抑制作用、药物代谢动力学、急性毒性试验及对SPF鸡免疫功能的影响。【方法】在鸡胚、MDCK细胞上进行复方中草药对H5N1和H9N2亚型禽流感病毒的直接灭活作用、治疗作用和预防作用;在体内通过药物累计法研究复方中药在昆明鼠体内的药物代谢动力学;采取口服和腹腔注射两种给药途径研究复方中药对昆明鼠的急性毒性试验;通过免疫器官的指数、在FAC上测量CD3+、CD4+、CD8+及TCR+的含量及采用血凝抑制(HI)方法检测血清中H9亚型禽流感抗体滴度研究复方中草药的对SPF鸡免疫功能的影响;通过体外试验研究其对H5N1禽流感病毒的治疗作用。【结果】该复方药物在鸡胚内对H5N1亚型禽流感病毒的有效灭活浓度、治疗浓度及预防浓度分别是31.25 mg•ml-1、125 mg•ml-1及250 mg•ml-1,对H9N2亚型禽流感病毒的有效灭活浓度、治疗浓度及预防浓度分别是31.25 mg•ml-1、15.625 mg•ml-1及62.5 mg•ml-1;在MDCK上对H5N1亚型禽流感病毒的有效灭活浓度及预防浓度分别是31.25 mg•ml-1、125 mg•ml-1,治疗浓度未测出。对H9N2亚型禽流感病毒的有效灭活浓度、治疗浓度及预防浓度分别是15.625 mg•ml-1、31.25 mg•ml-1及31.25 mg•ml-1;其在小白鼠体内的经时过程为一室模型。其药-时方程式为:C=650.66e-4.9078t ;口服复方中药后对昆明小鼠无毒;腹腔注射复方中药后对昆明小鼠的半数致死量(LD50)为425.6 mg•kg-1;给药后21 d,CD3+、CD4+、CD8+及TCR+的含量分别为64.01%、27.39%、45.05%和32.19%;免疫后半个月,给药-免疫组的禽流感抗体滴度比免疫组高1.6个滴度;同群感染组中,该复方中药预防组的保护率达30%,而治疗组为20%;【结论】体外试验表明,复方中药不仅对禽流感病毒有直接灭活作用,而且对吸附于细胞表面和进入细胞内的禽流感病毒都有抑制作用;其药物代谢动力学特征是吸收快、消除慢;该复方中药不仅安全、而且能增强鸡的体液免疫、细胞免疫功能、增加免疫器官指数。体内试验表明,该复方中药能延长鸡的平均死亡时间,预防效果强于治疗效果。总之,自行研制的复方中药具有预防、安全、延长感染鸡的存活时间、增强机体免疫力的作用。  相似文献   
39.
禽流感病毒HA基因核酸疫苗脂质体制备方法的研究   总被引:4,自引:0,他引:4  
用逆相法、冷冻溶融法、冻干法、脂膜法制得了禽流感病毒血凝素(HA)基因重组质粒pSVH7DNA(核酸疫苗)脂质体;用荧光法测得脂质体的包封率分别为(15.58士1.55)%,(14.7土0.79)%,(11.43士1.76)%,(6.08士0.35)%,当在磷脂成分中加入阳离子脂时,脂质体的包封率分别为(70.41士6.49)%,(57.58士0.88)%,(53.72士9.07)%和(46.56士1.92)%。电镜观察发现四种方法所得的脂质体为单室和多室球形脂体混合物,其粒径大小分别为163nm,189nm,138nm和235nm,结果表明逆相法、冻干法、冷冻溶融法为制备脂质体的有效方法。  相似文献   
40.
禽流感(Avian Influenza)是由 A型流感病毒引起的一种禽类的病毒性传染病,被国际兽疫局确定为Ⅰ类烈性传染性病。该病毒属正粘病毒科,几乎所有的野生与家养禽类均可感染。1878年在意大利的鸡群中首次暴发,其后许多国家和地区都相继报道AIV存在的事实,近几年,我国在不同地区都分离到禽流感病毒,广泛存在的主要是H9亚型病毒,且多为中等以下毒力的毒株。本试验采集病料主要针对河北省养鸡业较为发达的几个县市的七个小型养鸡场,选择未注过流感疫苗,临床症状出现产蛋下降和呼吸道症状严重的鸡只,剖杀,采集病变明显的脏器,如胰、肝、肺、脾、气管、肾、泄殖腔及其干酪样物等,剪碎研磨,加抗生素处理后,接种9-10日龄鸡胚,弃掉24小时内死亡的鸡胚,收集24-72小时死亡鸡胚的尿囊液,盲传三代,并做血凝试验,对于HA阳性的样品,进一步做HI试验,结果有2株禽流感病毒为H9亚型;进一步测定其神经氨酸酶活性,结果为N2。取1: 10稀释的尿液0.2ml肌肉接种8只8周龄SPF鸡测其致病力指数,观察10天内鸡只发病情况,结果第三天鸡群精神稍有沉郁,其中一只出现歪脖的神经症状,采用英国中心兽医实验室静脉致病指数(IVPI)测定计算方法  相似文献   
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