猪德尔塔冠状病毒荧光RT-RAA快速检测方法的建立及初步应用     

赵平  秦毅斌  何颖  卢冰霞  刘芳  陈樱  韦祖樟  黄伟坚  赵武  欧阳康 《中国动物检疫》2021,38(8):85-89

近年来,猪德尔塔冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)给养猪业造成了较大经济损失。为快速检测PDCoV,针对病毒N基因设计特异引物,建立了PDCoV重组酶介导核酸等温扩增荧光法(RT-RAA)。通过优化引物浓度、反应温度,确定了最佳反应条件,然后进行了特异性和灵敏性试验,并与普通RT-PCR方法进行了比较。结果显示:该方法特异性较好,与猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪轮状病毒、猪伪狂犬病病毒、猪细小病毒、猪圆环病毒、猪瘟病毒、猪捷申病毒、传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒等猪源病毒无明显交叉反应;反应过程均在39℃恒温条件下完成,用时30 min即可得到扩增结果 ;反应体系可检测的最低扩增拷贝数为10 copies/μL,敏感性较高;该方法检测68份猪源病毒样品的PDCoV阳性检出率为17.6%,高于普通RTPCR(13.2%)。结果表明,本研究建立的RT-RAA快速检测PDCoV方法具有快速、特异、灵敏的优点,可用于PDCoV的快速检测和流行病学监测。  相似文献   

仔猪的胃肠道健康     

何颖 《猪业科学》2020,37(2):27-30

最佳功能状态的胃肠道对于猪生长发育各阶段中的代谢、生理、疾病状态和生长性能具有重要意义。最近,猪胃肠道健康吸引了众多关注,而对胃肠道健康及其病因缺乏明确的定义。从广义上讲,“胃肠道健康”涵盖了大量的生理和功能特性(营养素的消化和吸收、宿主代谢和能量生成、稳定和适当的微生物区系)、防御机制(屏障功能和黏膜免疫机制)以及它们之间的互作。尤其是刚断奶仔猪的胃肠道健康受到了广泛关注,这是因为在断奶后的过渡阶段其胃肠道结构和功能发生了改变。最近,由于世界上许多地区禁止或减少某些抗生素的使用,人们对使用不同饲料添加剂替代日粮中抗生素的兴趣高涨。在仔猪断奶后出现胃肠道疾病的情况下,胃肠道健康的恶化可能影响着猪只整体健康状况。虽然在猪的生长性能、饲料利用率以及胃肠道健康之间人们能感知到一些直接联系,但是这种关系有时比较微妙而不太明显,尤其是在没有明显的胃肠道疾病情况下。影响胃肠道健康的因素和条件是多方面的、复杂的。尽管很明显胃肠道状态的波动会导致机体不平衡,并干扰广义上的内稳态,但目前对这方面的报道很少,有时还存在错误的解释。除了任何胃肠道疾病或者引发胃肠道紊乱的因素,其他因素也会对猪胃肠道健康产生影响,比如仔猪断奶后一段时期内胃肠道发生的应答反应,日粮改变后可能发生的任何变化“胃肠道健康”基本上代表着胃肠道代谢功能,它反映了胃肠道应对和适应损伤和感染的能力。  相似文献   

莽草酸对PEDV感染仔猪生长性能、腹泻指数、血清免疫及抗氧化指标的影响     

赵雯  何颖  韦明宇  蒋家霞  张胜斌  胡庭俊  张宁  赵凌 《饲料研究》2023,(18):12-16

试验旨在研究莽草酸对感染猪流行性腹泻病毒(PEDV)仔猪的生长性能、腹泻指数、血清免疫及抗氧化指标的影响。将120头感染PEDV的7日龄“杜×长×大”仔猪随机分为6组,每组5个重复,每个重复4头猪。处理1组、2组、3组分别每日给感染PEDV仔猪灌服800、400、200 mg/kg莽草酸,处理4组每日给感染PEDV仔猪灌服400 mg/kg绿原酸,处理5组每日给感染PEDV仔猪灌服2万单位庆大霉素,处理6组为阳性对照组,另选选择20头健康仔猪作为空白对照组。试验期为5 d,之后观察3 d。结果显示,与阳性对照组相比,处理1组、2组、3组仔猪平均日增重(ADG)均显著升高(P<0.05)。处理1组和2组仔猪的PEDV感染治愈率均达到85%,处理5组仔猪的PEDV感染治愈率为65%;处理1组、2组、3组仔猪血清中的免疫球蛋白G (IgG)含量均显著升高(P<0.05);处理1组、2组、3组仔猪血清中的总超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、一氧化氮(NO)、髓过氧化物酶(MPO)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及总抗氧化能力(T-AOC)显著升高(P<0...  相似文献   

青果总黄酮的抗炎作用研究     

何颖  杨桂林  胡祥宇  袁叶飞 《安徽农业科学》2012,(5):2632+2650

[目的]研究青果总黄酮的抗炎作用。[方法]采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、蛋清致小鼠足跖肿胀、醋酸致小鼠毛细血管通透性增加3种模型,每种模型分为5组,分别给药,即青果总黄酮80、40、20 mg/kg剂量组、地塞米松组(10 mg/kg)、空白对照组(含浓度5%吐温-80的生理盐水),以抑制率为考察指标,研究青果总黄酮的抗炎作用。[结果]青果总黄酮对二甲苯致小鼠耳廓肿胀、蛋清致小鼠足跖肿胀、醋酸致毛细血管通透性增加等急性炎症模型均有抑制作用。[结论]青果总黄酮具有一定的抗炎作用。  相似文献   

日本脑炎病毒套式RT-PCR方法的建立与初步应用     

李茂宁  赵武  陈云霞  梁家幸  肖爱欢  李斌  刘芳  何颖  梁保忠  甘书钻  黄伟坚 《动物医学进展》2009,30(12):5-8

根据GenBank上登录的日本脑炎病毒(JEV)E基因序列,设计内外2对引物.以JEV疫苗株为模板,建立了检测猪JEV的套式RT-PCR方法.应用该方法对JEV疫苗株RNA进行扩增,获得与预期大小相符,长度为228 bp的目的片段;检出JEV-RNA的灵敏度约为0.3 pg.表明所建立的套式RT-PCR方法对JEV的检测敏感性高、特异性强.  相似文献   

猪细小病毒自然弱毒N株VP2基因的克隆、测序及生物信息学分析     

李斌  梁家幸  赵武  苏乾莲  何颖  梁保忠  秦毅斌  何苹萍 《广西农业生物科学》2010,(5)

本研究对猪细小病毒(porcine parvovirus,PPV)自然弱毒N株(PPV-N)VP2基因进行克隆、测序并利用生物信息学技术分析PPV-NVP2蛋白基因的同源性、遗传进化、密码子偏爱性、糖基化位点、磷酸化位点、B细胞抗原表位及其二、三级结构。结果表明:成功扩增出包含VP2基因完整目的片段(1901bp),构建了VP2基因的克隆重组质粒pMD18-T-VP2,测序获取VP2基因序列(1740bp)并将该序列登录到GenBank(HM355807)。PPVVP2基因属高度保守的基因;PPV-N株与PPV弱毒代表毒株NADL-2株亲缘性近,推测PPV-N株属于弱毒株;PPV-N株VP2基因氨基酸密码子偏爱以A结尾的密码子;PPV-N株VP2蛋白可能存在7个糖基化位点,其丝氨酸、苏氨酸和酪氨酸可能分别有9、7、8个磷酸化位点,可能存在24个B细胞抗原表位;PPV-N株VP2蛋白二级结构预测,α-螺旋占11.74%,β-折叠占22.97%,无规则卷曲占65.28%,而三维结构预测VP2蛋白主要以无规则卷曲为主,存在多个螺旋和折叠区域。本研究结果为进一步阐释PPV-N株自然弱毒的分子机理提供依据,并为PPV分...  相似文献   

普贝生用于足月妊娠促宫颈成熟及引产的临床观察     

何婷  董保芝  徐蓉  何颖 《新农业》2012,26(4)

目的:观察普贝生促宫颈成熟引产的治疗效果、安全性.方法:将240例孕周为38+3～42周无阴道分娩禁忌、单胎头先露位待产的孕妇随机分为两组:试验组120例,采用普贝生1枚放置于阴道后穹隆;对照组120例,用小剂量催产素静脉微量泵泵入.观察对比两组总产程、阴道出血量、新生儿窒息率、剖官产率、副作用等临床指标.结果:试验组用药后12h宫颈评分为(8.9±1.3)分,明显高手对照组(5.3±1.5)分(P＜0.05);24h临产率83.00%(100/120),明显高于对照组60.00%(72/120)(P＜0.05),平产成功率80.00%,明显高于对照组的58.3%(P＜0.05);两组胎心变化、羊水异常、产后出血、新生儿结局无显著性差异(P＞0.05).结论:普贝生是一种安全有效的促宫颈成熟和引产药物,临床使用安全可靠.  相似文献   

家鸡血液生化遗传标记与产蛋相关性状间基因多效／连锁反应浅析     

何颖  吴晓林 《湖南畜牧兽医》1998,(3):8-9

剖析了蛋鸡４个基因座位共１０个遗传标记与产蛋相关性状间基因多效／连锁效应，讨论了检测生化位点（主基因）与经济性相关效应的常用统计方法的效果。  相似文献   

猪细小病毒自然弱毒N株VP1基因的扩增与序列分析     

李斌  赵武  梁家幸  梁保忠  白安斌  姚瑞英  黄安国  何颖  蒋玉雯 《动物医学进展》2008,29(10)

对猪细小病毒自然弱毒N株（PPV—N株）VP1基因扩增及测序,利用生物信息学技术预测VP1蛋白的二级结构与B细胞抗原表位,以及分析该蛋白的氨基酸差异位点及密码子偏爱性。结果表明,PPV—N株VP1基因与弱毒参考毒株NADL-2VP1基因同源性最高,亲缘关系最近。PPV—N株VP1蛋白的二级结构较为复杂,以β-折叠为主,并有较多的转角和无规则卷曲区域,在序列的20～56、61～80、86～130、136～188区域为B细胞抗原表位的优势区域。PPV强、弱毒株VP1蛋白存在5个氨基酸差异位点（T-365-I,G-528-D,Q-533-H,P-586-S,K-715-R）,这些位点处氨基酸残基抗原性与毒力成正相关。PPV—N株VP1蛋白在A、C、E、G、H、I、K、N、Q、R、S、T、V和Y氨基酸于密码子选择上存在一定的偏爱性。  相似文献   

食用菌制种技术(上)     

肖淑媛  何颖 《湖南农业》2007,(8):14-14

随着食用菌产业的蓬勃发展,菌种需要量随之增加,而现有菌种生产单位明显偏少,许多菇农不得不在外地引种.长途购运菌种不仅花费大、成本高,而且菌种因破瓶易引起杂菌污染,从而严重影响栽培食用菌的经济效益.菇农若能掌握菌种生产程序和制种技术,实行自行制种,逐步发展成制种专业户,也是一条很好的致富门路.  相似文献