猪肺炎支原体和猪鼻支原体TaqMan双重荧光PCR检测方法的建立及应用     

周颖  赵硕  覃国喜  梁龙华  肖婷  陈忠伟  卢冰霞  秦毅斌  林昌华  张胜斌  段群棚  胡庭俊  何颖 《动物医学进展》2024,(2):11-16

为建立一种可快捷鉴别检测猪肺炎支原体(Mhp)和猪鼻支原体(Mhr)的方法,针对Mhp的183基因和Mhr的p37基因保守片段,分别设计合成引物及TaqMan探针,优化反应条件,建立一种可同时检测Mhp和Mhr的TaqMan双重荧光PCR方法,并评价其特异性、敏感性和重复性。结果表明,该方法特异性强,检测其他常见猪呼吸系统病原不发生交叉反应;对标准品pMD18-T-Mhp-183、pMD18-T-Mhr-P37的最低检测限分别达45.2 copies/μL和29.7 copies/μL,比普通PCR检测灵敏度提高10³～10⁴倍;该方法检测结果的批内与批间变异系数均小于2%。用该方法检测145份广西自治区内临床样品,从中检出82份Mhp和9份Mhr阳性样品。该方法可用于临床样品快速检测及实验室Mhp和Mhr的鉴定,可为Mhp和Mhr在猪群中的早期监测提供技术支持。  相似文献   

NS复合乳酸菌对断奶仔猪生产性能、血液生化指标和腹泻率的影响     

何颖  孙志勇  张恒博  梁保忠  梁家幸  秦毅斌  胡庭俊  胡旭  蓝炳顺  赖胜基  赵武  金锋  陈忠伟  韦明宇 《华北农学报》2011,(z1):248-252

选择二元杂交(杜/长)的(28)日龄断奶仔猪90头,平均断奶体重(8.99±1.60) kg,按体重和性别分成3个处理组,每处理3个重复.A组为对照组,饲喂玉米、豆粕基础日粮；B组为添加0.2％ (m/m)NS复合乳酸菌制剂到基础日粮中；C组为添加0.2％(m/m)金霉素、0.025％ (m/m)阿莫西林和0.012 ...  相似文献   

猪繁殖障碍性疾病的主要发生原因与防治对策     

李莹莹  赵武  何颖  秦毅斌  何国青  陆芹章 《养猪》2014,(2):124-125

猪繁殖障碍性疾病是指繁殖期内公、母猪由于疾病因素引起的,以妊娠母猪流产,产死胎、木乃伊胎、弱仔、畸形仔,少仔和公母猪不育症为主要特征的繁殖异常的一类疾病总称[1]。猪群中发生此病常常是两种以上的病原体共同作用或继发感染造成的,增加疾病诊断与防控的难度,进而引起猪只的高感染率和高死亡率,造成巨大的经济损失[2]。近年来,猪的繁殖障碍性疾病问题十分突出,给养猪业造成的经济损失很大,严重影响养猪业的健康发展。  相似文献   

2016—2019年广西玉林市部分猪场主要病毒性疫病监测     

陈忠伟  何文娜  何颖  段振华  卢冰霞  段群棚  甘甲忠  赵武  甘一波  全琛宇  黄宇 《中国动物检疫》2021,38(4):20-28

为了解近年来广西玉林市规模猪场主要病毒性疫病的流行动态和免疫保护水平,分析疫情流行趋势和暴发风险,对2016—2019年采集自玉林市规模猪场284个场次的6954份血清样本,以及113个场次的1539份临床健康猪组织样本、249个场次自主送检的536份病死猪组织样本,进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)抗体和抗原检测,并对结果进行时间和区间分析。结果显示:2016—2019年,规模化猪场CSFV、PCV2、PRV-gB场群平均抗体阳性率以及个体平均抗体阳性率均在70%以上;PRRSV抗体阳性率总体偏低,但2019年抗体阳性率超过90%。北流市CSFV场群及个体抗体阳性率最低,与其他地区有差异(P<0.05);北流市、福绵区、玉州区的PRRSV场群抗体阳性率未超过70%,低于其他地区(P<0.05);各地区间PCV2抗体阳性率无统计学差异(P>0.05);福绵区PRV-gB抗体阳性率(<70%)与其他地区相比最低(P<0.05);在健康屠宰猪群及病死猪群组织样品中均检出上述4种病原,其中PRRSV、PCV2病原阳性检出率较高。结果表明,玉林市规模化猪场上述4种疫病的免疫抗体保护水平总体较高,但部分地区抗体水平偏低,且均存在猪群带毒现象,尤其是PRRSV、PCV2,存在疫病暴发风险。结果提示,各县(市、区)要根据本地养殖及疫病监测情况,制定科学合理的免疫计划,加强综合防控与监测,防止上述猪群疫病的发生与流行。本研究调查了广西玉林市猪群主要病毒性疫病的免疫保护水平及其病原流行特点,为该地区此类疫病防控提供了数据支持。  相似文献   

广西玉林市规模猪场生物安全风险调查与评估     

段振华  何颖  黄宇  甘一波  刘香林  何宏勇  甘甲忠  李苗  梁清  蒋家霞  冯建远  丁伟  张宁 《中国动物检疫》2021,38(12):22-25

猪场生物安全防控是生猪健康养殖的最重要环节。为掌握广西玉林市规模猪场生物安全现状及主要风险因子,通过问卷调查方式,对玉林市83家规模猪场的生物安全状况进行了风险调查与评估。结果显示：广西玉林市规模猪场生物安全高、中、低风险占比分别为12%、42%、46%,主要风险因子为“围墙外未建立绿化隔离带”“隔离区在生产区上风向”“与其他畜禽养殖场、主干道或居民区的距离在500 m以下”“猪场未实行自繁自养”“猪场无围墙或防疫沟”“场内运输车辆未执行专用且不出场外”“猪场猪繁殖与呼吸综合征病原学PCR检测阳性”。结果表明,广西玉林市规模猪场应重点从猪场选址、场内布局、设施设备、饲养管理及卫生防疫、免疫等方面进一步提高猪场生物安全水平。  相似文献   

广西猪圆环病毒3型流行病学调查与分析     

段群棚  赵硕  秦毅斌  卢冰霞  何颖  陈忠伟  刘磊  周英宁  李斌  蒋冬福  梁家幸  赵武 《中国畜牧兽医》2020,47(4):1183-1190

本研究旨在了解新发猪圆环病毒3 型（porcine circovirus 3,PCV3）在广西猪群的感染情况及流行特点,为有效防控PCV3提供科学依据。试验采用PCR检测方法对2017年9月至2019年3月广西482个规模猪场送检的917份病猪样品进行PCV3检测,并分析PCV3阳性率在广西不同地区、年份、季节和年龄段猪群之间的差异。对145份PCV3阳性病料进行猪瘟病毒（CSFV）、猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪圆环病毒2型（PCV2）、猪伪狂犬病病毒（PRV）和猪流行性腹泻病毒（PEDV）检测。结果显示,PCV3除在百色、防城港未检出,在广西其他12个地市均存在不同程度的感染;2017~2019年广西PCV3样品阳性率和PCV3猪场阳性率均呈逐渐上升趋势;夏季PCV3阳性率最低,且明显低于其他3个季节;育肥猪PCV3阳性率最高,为21.70%,其次是流产母猪、保育猪、流产胎儿,阳性率分别为20.00%、19.05%和11.02%,哺乳仔猪PCV3阳性率最低,为8.21%;PCV3单一感染率较高,为30.34%,与其他病原混合感染情况也较为常见,甚至出现四重感染。调查结果表明,PCV3感染在广西普遍存在,且近年来感染呈增加趋势,可能有一定的季节性,对各生长阶段猪群均有一定程度的危害,以育肥猪最为严重,对母猪和保育猪危害也较大;PCV3单一阳性率较高,但仍以混合感染为主,尤其是与PRRSV和PCV2的混合阳性率较高,提示这3种病原在感染致病过程中可能存在协同作用。  相似文献   

猪流行性腹泻病毒CH/GX/2015/750A株S2蛋白的原核表达及抗原性分析     

刘磊  秦毅斌  卢冰霞  蒋冬福  陈忠伟  何颖  赵硕  周英宁  李斌  段群棚  梁家幸  赵武 《中国畜牧兽医》2020,47(6):1668-1676

本研究旨在了解猪流行性腹泻病毒（PEDV）S2蛋白的抗原性,为下一步诊断试剂盒及亚单位疫苗的研究奠定基础。试验通过反转录PCR的方法扩增PEDV CH/GX/2015/750A株S2基因部分片段（S2A）,将其克隆后插入原核表达载体pET-32a（+）中,构建原核表达质粒pET32a-S2A。将原核表达质粒转化入大肠杆菌BL21感受态细胞中,IPTG诱导表达重组蛋白,Ni柱亲和层析法纯化重组蛋白,Western blotting检测重组蛋白S2A的反应原性。纯化复性的重组蛋白S2A免疫昆明小鼠制备多克隆抗体,用间接ELISA法检测获得的多克隆抗体效价,间接免疫荧光法验证制备的多克隆抗体的特异性。结果显示,重组S2A蛋白在IPTG终浓度为0.2 mmol/L时,37 ℃诱导表达3 h可获得最高表达量,该重组蛋白主要以包涵体的形式存在;Western blotting结果显示,纯化复性后的重组蛋白S2A能够与PEDV阳性血清发生特异性结合,具有良好的反应原性。制备的多克隆抗体效价可达1：32 000,间接免疫荧光结果表明,制备的多克隆抗体能够特异性识别和结合PEDV。结果表明,PEDV S2A蛋白具有良好的抗原性,可作为诊断试剂盒或亚单位疫苗的候选抗原。  相似文献   

一起乙型脑炎致猪繁殖障碍病例的确诊     

秦毅斌  赵武  梁家幸  卢冰霞  李斌  何颖  闭炳芬  苏乾莲  李常挺  梁保忠  黄伟坚 《广西畜牧兽医》2011,27(6):326-328

2010年8月,广西某规模养猪场出现群发性初产母猪繁殖障碍病例,经PCR／RT-PCR检测,结果在一份木乃伊胎儿中检测到乙脑病毒核酸,而猪细小病毒为阴性。疫苗免疫回顾性调查发现,该批初产母猪漏免了猪乙脑疫苗,从而认为乙脑病毒是引起这起繁殖障碍的病原。  相似文献   

加快政府转型塑公共服务型政府   总被引：3，自引：0，他引：3  

何颖 《技术与市场》2005,(3):40-41

在市场经济条件下,政府不仅要全面审视社会中的各种经济问题,还应当高瞻远瞩,注意把短期利益与长远利益相结合,在抓好经济建设的同时,努力实现以公共利益的和谐为宗旨的价值取向,强化政府的社会管理、公共服务职能,促进社会全面发展。而我国政府从经济建设主导型政府向社会服务主导型政府的转变,正是适应了这一发展要求。  相似文献   

仔猪雷极氏普罗菲登斯菌的分离鉴定及系统进化分析     

秦毅斌  何颖  赵武  卢冰霞  李斌  李莹莹  梁家幸  陈忠伟  梁保忠  苏乾莲  周英宁  蒋冬福  黎珂钰  卢敬专 《动物医学进展》2015,(2)

为了解猪雷极氏普罗菲登斯菌（P ．rettgeri）的生物学特性、致病性及16 S rRNA基因系统进化关系,本研究从发生严重腹泻、血便的哺乳仔猪群的内脏器官中分离到1株病原菌,根据形态特征、培养特性、生化特性、16 S rRNA基因序列分析鉴定为 P ．rettgeri。小鼠攻毒试验证实该分离菌株对试验小鼠有较强致病力,哺乳仔猪回归试验可复制出与临床上相似的典型症状,并从发病死亡小鼠及哺乳仔猪中分离到攻毒菌株。系统进化分析表明,分离菌株与雷极氏普罗菲登斯菌系统进化关系最为密切,其16 S rRNA 基因序列与雷极氏普罗菲登斯菌代表菌株的同源性在97．3％～99．6％之间。药敏试验结果表明,分离菌株对头孢哌酮钠、头孢噻肟钠、头孢曲松钠、头孢唑啉、头孢呋肟、头孢吡肟、阿莫西林、链霉素、氨曲南、诺氟沙星、左氟沙星、恩诺沙星、卡那霉素、氨苄青霉素、阿米卡星、链霉素和阿米卡星等多数药物敏感。本研究首次报道了雷极氏普罗菲登斯菌可以引起哺乳仔猪严重腹泻,提示在仔猪腹泻中应注意该菌感染的诊断、监测和防控。  相似文献