禽呼肠孤病毒C-98、T-98分离株S2基因的克隆及序列分析     

何建文  党娟  关平原  李平安  高魁 《畜牧与饲料科学》2013,34(1):18-23

参考GenBank中禽呼肠孤病毒176株(ARV 176)S2基因设计引物,对禽呼肠孤病毒内蒙古地区分离株C-98和禽呼肠孤病毒天津地区分离株T-98进行总RNA的提取,以其为模板,应用RT-PCR方法扩增病毒S2基因的cDNA片段,将纯化的cDNA片段克隆到pEASY-T1载体后进行序列测定。结果表明,获得的ARV C-98和ARV T-98的S2基因全长为1324bp,包括15bp的5′非编码区和58bp的3′非编码区,阅读框位于5′端第16位核苷酸和第1266位核苷酸之间。ARV C-98和ARV T-98分离株S2基因的核苷酸同源性很高,达到了99.8%,将C-98、T-98株的S2基因核苷酸序列和参考毒株的S2基因序列进行同源性分析,结果表明,ARV C-98和ARV T-98分离株的S2基因与参考毒株ARV 176、ARV 918、ARV 919、ARV 1733、ARV GX2010、ARV S1133和DRV YJLS2基因的核苷酸同源性最高,在99.2%～99.8%之间;与参考毒株ARV 138和ARV AVS-BS2基因的核苷酸同源性在92.1%～94.1%之间;与参考毒株ARV601SI、ARV 916和ARV 1017-1S2基因的核苷酸同源性在87.3%～87.8%之间;与参考毒株DRV 091、DRV S12和DRV S14 S2基因的核苷酸同源性在77.3%～78.2%之间;与参考毒株MRV 3、MRV 3-jin-1和MRV 3-T3D S2基因的核苷酸同源性最低,在2.4%～5.5%之间。遗传进化树分析显示:ARV C-98和ARV T-98分离株与参考毒株共分为4个遗传进化分支。  相似文献   

应用巢式POR方法检测牛支原体肺炎     

李大伟  张彦明  黄灿平  谢建华  熊仲良  冉智光  关平原  范伟兴 《动物检疫》2010,(4):28-29

根据Genbank发表的牛支原体全基因序列,设计2对特异性引物,建立了诊断牛支原体肺炎的巢式PCR方法,第一轮引物P1、P2扩增片段长度为1912bp,第二轮引物P3、P4扩增片段长度为422bp：该方法特异性试验未扩增出丝状支原体丝状亚种小克隆和无乳支原体特异性条带;敏感性试验证明扩增DNA最低含量达到10—7Hg／mL,是单一PCR的10^3倍;用该方法对阳性病料进行检测,均扩增出特异性片段。该体系的成功构建,可以为牛支原体肺炎的活体检测,和流行病学调查提供技术支持。  相似文献   

应用巢式PCR方法检测牛支原体肺炎   总被引：2，自引：1，他引：1  

李大伟  张彦明  黄灿平  谢建华  熊仲良  冉智光  关平原  范伟兴 《中国动物检疫》2010,27(4):28-29

根据Genbank发表的牛支原体全基因序列,设计2对特异性引物,建立了诊断牛支原体肺炎的巢式PCR方法,第一轮引物P1、P2扩增片段长度为1912bp,第二轮引物P3、P4扩增片段长度为422bp:该方法特异性试验未扩增出丝状支原体丝状亚种小克隆和无乳支原体特异性条带;敏感性试验证明扩增DNA最低含量达到10-7μg/mL,是单一PCR的103倍;用该方法对阳性病料进行检测,均扩增出特异性片段。该体系的成功构建,可以为牛支原体肺炎的活体检测,和流行病学调查提供技术支持。  相似文献   

布鲁菌PCR检测方法的建立及其应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

吴太平  云涛  关平原  陈玉惠  申之义  张七斤  李平安  希尼尼根 《内蒙古农业大学学报(自然科学版)》2011,32(4):187-191

本文根据已发表布鲁菌BCSP31基因序列,设计1对引物,以布鲁菌19号苗基因组DNA作为模板,建立诊断牛布鲁菌病的PCR方法,并对方法的特异性、敏感性及适用性进行验证.结果显示,PCR能扩增布鲁菌BCSP31基因特定序列.该方法对布鲁菌的最小检出量为9pg,对葡萄球菌26001株、大肠杆菌O78等7种参照菌株的核酸扩增结果均为阴性.建立的PCR方法具有快速简便、特异性强、敏感性高等特点.  相似文献   

牛传染性鼻气管炎病毒内蒙古分离株gB、gC、gD基因的分子克隆与序列分析     

胡文兵  关平原  郝瑞峰  赵鹏伟  乌日罕 《畜牧兽医学报》2012,43(6):965-971

对牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)内蒙古分离株gB、gC、gD基因进行克隆和序列测定,结果表明IBRV内蒙古分离株gB、gC、gD基因序列分别为2 850、1 723、1 559bp,编码933、508、417个氨基酸组成的完整开放阅读框。序列比较和系统进化树分析结果显示:内蒙古分离株与其他毒株gB、gC、gD基因核苷酸序列的相似性为94.9%～99.9%,其推导的氨基酸相似性在90.3%～99.7%,不同IBRV毒株gB、gC、gD基因在核苷酸和氨基酸水平上高度保守。在系统进化树中内蒙古分离株与瑞典毒株亲缘关系较近,属于同一个分支。  相似文献   

羊传染性脓疱病毒内蒙古分离株(OV/nm-05)GIF基因的克隆及序列分析     

鲁燕  申之义  关平原  希尼尼根 《畜牧与饲料科学》2012,33(4):11-13

参考GenBank中羊传染性脓疱NZ2毒株GIF(GM-CSFinhibitory factor)基因序列,设计合成特异性引物,以羊传染性脓疱病毒内蒙古分离毒株(OV/nm-05)为模板,提取总DNA,用PCR技术特异扩增出该毒株GIF基因片段,将其克隆到pEASY-T1载体,鉴定后测序。应用计算机软件将OV/nm-05基因测序结果与参考毒株OV-NZ2、OV-D1701、OV-IA82、OV-SA00、OV-F07.808R、OV-MUK59/05、OV-F94.848R的GIF基因序列进行比较。结果表明,OV/nm-05与7株参考毒株的同源性分别为95.7%、98.2%、96.7%、95.5%、95.9%、95.5%、95.1%。  相似文献   

动物黏膜免疫研究进展     

关平原 《农村养殖技术》2005,(6):32-35

黏膜免疫系统(Mucosal immune sysyerm，MIS)是指广泛分布于呼吸道、胃肠道、泌尿生殖道等组织黏膜下及一些分泌腺的淋巴组织．它是执行局部特异性免疫功能的主要场所。动物机体内存在着强大的黏膜免疫系统．其所含淋巴组织占机体总淋巴组织的50％以上，淋巴细胞占机体总淋巴细胞的80％以上。黏膜系统中分布有大量的免疫细胞和免疫分子，它们弥散分布在黏膜上皮内及黏膜下或单个或多个淋巴滤泡聚集成淋巴小结．大量的黏膜免疫细胞参与摄取、呈递抗原，诱导发生免疫反应．产生免疫效应因子(主要为SlgA)发挥免疫作用，抵抗病原微生物对动物机体的侵袭，是机体抵抗外来病原微生物的重要屏障。  相似文献   

鸡传染性喉气管炎病毒内蒙古地方毒株的分离与鉴定     

张七斤  刘思伽  红梅  申之义  关平原  李平安 《中国兽医杂志》2004,40(11):16-18

传染性喉气管炎(ILT)是由传染性喉气管炎病毒(ILTV)引起的一种急性呼吸道传染病。近年来，ILT已成为我国养鸡业的主要疫病之一，给养鸡业造成了巨大的经济损失。在内蒙古地区的部分鸡场，也时有ILT的发生。因为ILT恢复鸡及疫苗免疫鸡有长期带毒现象，一旦形成疫区则很难清除。  相似文献   

干扰素的研究进展   总被引：5，自引：0，他引：5  

银晓  关平原 《畜牧与饲料科学》2008,29(2):65-68

干扰素是人和动物细胞受到适宜的刺激产生的一种微量的、具有高度生物学活性的糖蛋白。该文就干扰素的分类、分子结构、作用机理、生物学活性、体外重组技术以及临床应用等方面的研究进展进行了综述。  相似文献   

酸马奶中一株具有高效抑菌活性的乳酸菌的分离与鉴定     

贾燕  宋前进  李新培  关平原  温永俊 《黑龙江畜牧兽医》2018,(19)

乳酸菌作为益生菌对人体健康十分有益,近年来关于益生菌的研究及应用发展较快。为了开发优质乳酸菌资源,试验采用常规的细菌分离鉴定方法,从酸马奶中分离了46株乳酸杆菌和24株乳酸球菌,对抑菌活性较强和生长较快的菌株进行生理生化初步鉴定,并在分子水平上进行保守基因16S rRNA和gyrB基因鉴定。结果表明:分离到的XM-38菌株具有较强的抑菌活性(可抑制大肠杆菌、鼠伤寒沙门菌、单增李斯特菌、枯草芽孢杆菌),XM-48菌株具有生长优势但没有明显的抑菌活性;结合生理生化和分子水平序列聚类分析,发现XM-38为干酪乳杆菌,XM-48为一株新的乳酸菌菌株。  相似文献