敌敌畏和高脂对香猪肝肾及动脉损伤机理分析     

李升  徐霖  牛熙  冉雪琴  王嘉福 《畜牧兽医学报》2011,42(9)

为了探讨亚中毒剂量有机磷杀虫剂长期作用对猪体造成损害的机理,选择香猪作为实验动物,随机分为对照组、敌敌畏处理组和高脂处理组,饲养12个月后,分析香猪的肝、肾、动脉病理切片和相关酶活性变化.经预试验确定敌敌畏的亚中毒剂量为2.5 mg·(kg·2d)-1.以此剂量长期作用12个月后,敌敌畏能导致香猪严重的肝、肾细胞损伤,并使血清胆碱酯酶活性降低,对氧磷酯酶活性及其mRNA水平极显著下降(P＜0.01),但对大动脉组织结构、血脂水平和体质量的影响不明显.高脂处理组中,香猪的体质量明显增加(P＜0.05),同时血清胆碱酯酶活性、血清总胆固醇、高密度脂蛋白、低密度脂蛋白水平均上升(P＜0.05),对氧磷酯酶活性及其基因的表达量下降(P＜0.05).此外,大动脉血管壁内侧形成明显的脂质斑块和血栓;肝细胞受到一定损害,而肾组织受到的影响较小.研究结果提示,敌敌畏和高脂通过不同的途径刺激机体氧化应激反应,抑制对氧磷酯酶的活性;亚毒剂量的敌敌畏长期作用对肝肾造成的严重损害,提示应对猪场环境及饲料中的有机磷农药污染给予高度重视.  相似文献   

贵州竹乡乌骨鸡Ghrelin基因的克隆及原核表达   总被引：1，自引：0，他引：1  

代新兰  冉雪琴  王嘉福 《中国家禽》2008,30(7):25-28

采用特异性引物自贵州黑羽乌骨鸡胃部组织克隆了Ghrelin的基因,基因全长2330bp,含有4个外显子,3个内含子.采用RT-PCR技术,获得了Ghrelin cDNA片段(563 bp),序列分析推测,通过可变剪切可产生两段mKNA,cDNA编码区与基因组中的编码区完全一致.黑羽乌骨鸡Ghrelin基因与已知鸡种比较有13～18个碱基不同,相似性为99.1%～99.3%,但其氨基酸序列完全一样,表明禽类的Ghrelin多肽高度保守.将其中Ghrelin编码区亚克隆到原核表达载体pTYB11中,经序列测定碱基序列正确,获得重组质粒pTYB11/G.在IPTG的诱导下,重组质粒在大肠杆菌ER2566中获得表达.当OD600=0.5,IPTG为浓度1 mmol/L,诱导5小时的表达量最高,融合蛋白占细胞总蛋白的40%.采用几丁质结合的预装柱对表达产物进行纯化,产率约为5 mg/L培养液.  相似文献   

贵州地方猪种UCP3基因多态性与肉质性状的相关性分析   总被引：4，自引：0，他引：4  

胡倩  王嘉福  冉雪琴 《中国畜牧杂志》2008,44(13)

解耦联蛋白3(uncoupling protein 3,UCP3)是调节能量和脂肪代谢的重要因子。以商品猪(杂交猪)为对照,采用SSCP方法对贵州地方猪品种糯谷猪和萝卜猪的UCP3基因进行了多态性分析。结果表明:3个猪群体中,都检测到了3种基因型(AA、BB、AB),χ2独立性检验结果显示,3种基因型在3个群体间的分布不一致,糯谷猪和萝卜猪以AB基因型为主,杂交猪以BB基因型占优势,杂交猪与地方猪种之间的差异显著(P<0.01);对纯合基因型的UCP3基因片段进行克隆测序,证实AA基因型中UCP3基因外显子6编码区第842位碱基发生了单碱基突变(T→C),导致编码的氨基酸从苏氨酸突变为甲硫氨酸。进一步分析3种基因型与胴体和肉质性状之间的相关性,证明AB基因型个体的肉质最优,贵州地方猪种的大理石纹、肌内脂肪含量和嫩度3项指标显著优于商品猪(P<0.01),因此推测UCP3基因与贵州地方猪种的肉质性状具有相关性,可能是贵州地方猪种肉质性状的候选基因。  相似文献   

贵州猪、牛志贺样毒素大肠杆菌的检出与鉴定   总被引：5，自引：0，他引：5  

王嘉福  冉雪琴  吴拥军  翁庆北  叶在荣 《畜牧兽医学报》2000,31(5):448-452

以两对全盛的寡核苷酸引物,通过聚合酶链式反应,检测158份猪和牛腹泻粪便分离物,从8份猪源和3份牛源分离物中扩增出大肠杆菌志贺样毒素基因片段,其生化试验符合大肠杆菌特征,经Vero细胞检测均产生志贺样毒素,血清学试验证实分属不同的血清型,与志贺样毒素大肠杆菌血清型范围相符。  相似文献   

宰后猪肉成熟过程中基因表达变化及其与肉品质的相关性分析     

黄永棚  冉雪琴  牛熙  李升  黄世会  王嘉福 《中国畜牧兽医》2024,(4):1573-1581

【目的】研究宰后成熟对猪肉品质的影响,以及宰后成熟过程中基因表达规律与猪肉品质变化的相关性,以期更好地阐释鲜肉成熟过程中肉品质变化的机理。【方法】以4℃条件下贮藏的大白猪背最长肌为研究对象,测定贮藏0、1、2、4、6、8和10 d时肉品质变化状况;利用实时荧光定量PCR测定宰后猪背最长肌中单磷酸腺苷脱氨酶3(AMPD3)、肌球蛋白结合蛋白C2(MYBPC2)、肌球蛋白轻链3(MYL3)、左旋氨基酸转运体(SLC7A8)和原肌球蛋白3(TPM3)等基因的表达变化,并分析其与肉品质指标的相关性。【结果】大白猪宰后背最长肌pH在2 d时达到极限值6.5,显著低于4、10 d(P<0.05);蒸煮损失和滴水损失均呈现先升高后降低的趋势,而贮藏损失在10 d时达到最高值12.52%,显著高于0.5～6 d(P<0.05);剪切力在宰后成熟1～10 d显著低于0～1 d(P<0.05);硫代巴比妥酸反应物(TBARS)值随成熟时间的延长逐渐升高,且8～10 d显著高于其他时间点(P<0.05)。实时荧光定量PCR结果表明,宰后肌肉组织中基因的转录丰度仍然存在,AMPD3基因...  相似文献   

调控香猪繁殖候选miRNA筛选     

禄欢  牛熙  黄娅丽  李升  冉雪琴  黄世会  王嘉福 《中国畜牧兽医》2021,48(9):3118-3127

研究旨在从香猪卵巢small RNA测序数据中挖掘调控香猪繁殖的microRNA （miRNA）,解析miRNA调控香猪卵巢功能及繁殖性状的分子机制,对于猪的遗传选育具有重要意义。研究选取发情期和间情期的香猪各4头,屠宰后取其卵巢组织,提取总RNA进行small RNA测序,利用生物信息学方法检测miRNA表达谱,筛选差异表达的miRNA,预测差异表达miRNA靶基因,并对靶基因进行GO功能富集和KEGG通路富集分析。结果显示,香猪卵巢组织中miRNA在染色体上呈不均匀分布,主要分布于1号染色体和X染色体上。香猪卵巢中共有627个已知猪miRNAs表达,其中有34个差异表达miRNAs,表达量前五的分别是miR-23、let-7i-5p、miR-103、miR-30e-5p和miR-1271-5p。GO功能分析结果显示,靶基因主要参与的生物学过程是细胞过程（cellular process）,主要分布于细胞（cell）,主要分子功能是结合（binding）;KEGG显著富集通路中,促性腺激素释放激素受体通路（gonadotropin-releasing hormone receptor pathway）、胰岛素样生长因子通路（IGF pathway）和表皮生长因子受体信号通路（EGF receptor signaling pathway）与卵母细胞的发育成熟相关,因此推测miR-23b、let-7i-5p、miR-103、miR-30e-5p和miR-1271-5p可能参与了香猪繁殖调控。本研究初步筛选出5个可能调控香猪繁殖性能的miRNAs,可为从分子水平提高香猪产仔数提供理论基础。  相似文献   

贵州野豌豆属植物的核型研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

冉雪琴  朱晓彤 《草业科学》1997,14(1):5-9

对贵州窄叶野豌豆，广布野豌豆，光叶紫花苕和救荒野豌豆４种野豌豆及其种下不同类元的核型进行了研究，结果表明，广布野豌豆和光叶紫药苕的染色体数目为２ｎ＝１４，属于较为原始的类群，窄叶野豌豆和救荒野豌豆的染色体数目２ｎ＝１２，属于较进化的类群，窄叶野豌豆和救野荒豌豆下类元的核型研究表明，种下类元间的核型差异明显，并对野豌豆属核型的趋势作进行了探讨。  相似文献   

非洲猪瘟病毒P72蛋白合成肽疫苗的构建及其免疫效力评估     

徐娅玲  张霁辉  牛熙  李升  黄世会  冉雪琴  王嘉福 《中国畜牧兽医》2022,49(8):3083-3090

【目的】构建非洲猪瘟病毒CAS19-01/2019株(GenBank登录号:MN172368.1)结构蛋白P72的合成肽疫苗,通过免疫小鼠评估合成肽疫苗的免疫效力。【方法】利用ProtParam、SOPMA等软件分析P72蛋白的理化性质与结构信息,通过ABCpred、SVMtrip、IEDB预测P72蛋白的T细胞与B细胞抗原表位,筛选出显著的表位多肽区域,合成多肽辅以弗氏佐剂腹腔注射免疫小鼠,检测免疫组小鼠产生的特异性抗体、T淋巴细胞亚群、脾脏淋巴细胞增殖、细胞因子白介素4(IL-4)、IL-2、γ干扰素(IFN-γ)、免疫球蛋白(IgG),从体液免疫与细胞免疫角度评估合成肽的免疫效力。【结果】综合分析得出P72蛋白是稳定性亲水蛋白,二级结构中α-螺旋、β-转角、延伸链、无规则卷曲分别占19.35%、5.42%、25.08%和50.15%。筛选出了P72蛋白的8个优势抗原表位,626－634、520－528、298－306、203－211位氨基酸处为T细胞抗原表位,587－606、232－251、110－129、39－58位氨基酸处为B细胞抗原表位。整合优势表位合成2个多肽P72-1与P72-2,首次免疫小鼠14 d时可检测到P72-1与P72-2的特异性抗体,首免后28 d达到最高值,其最高抗体效价分别为1∶25 600与1∶12 800;免疫后小鼠T淋巴细胞亚群CD4^＋/CD8^＋显著上升(P＜0.05);脾脏淋巴细胞增殖试验结果显示,免疫组淋巴细胞数量均极显著升高(P＜0.01);细胞因子IL-4、IL-2、IFN-γ含量均极显著增加(P＜0.01)。【结论】本研究成功研制2种合成肽疫苗,在免疫效力上P72-2高于P72-1,二者都能产生高水平的特异性抗体,刺激脾脏淋巴细胞增殖,诱导产生细胞因子IL-4、IL-2、IFN-γ,本研究为非洲猪瘟合成肽疫苗研制奠定技术基础。  相似文献   

紫花苜蓿对杂交猪育肥性能和相关基因表达量的影响     

王芳  冉雪琴  陈颖  袁恬  王嘉福  张兆强 《畜牧与兽医》2013,45(6)

为了研究紫花苜蓿对猪生长及肉质性能的作用,选用16头长×大外二元育肥猪,在基础饲料中添加4%苜蓿,应用免疫组织化学、酶联免疫吸附试验、实时荧光定量PCR研究脂肪代谢相关因子在mRNA水平和蛋白质水平表达的差异。结果显示:饲料中添加苜蓿后,杂交猪骨骼肌细胞中瘦素(leptin)基因(P<0.05)和蛋白(P>0.05)的表达量下降,与日增重呈轻度负相关(r=-0.314);转录因子C/EBPβ(CCAAT/en-hancer binding proteins,CEBPβ)基因和蛋白的表达量变化不明显;过氧化氢酶体激活增殖受体(peroxisome proliterator actiated receptors,PPARr)基因和蛋白水平高于对照组(P>0.05),与日增重(r=-0.837)、瘦肉率(r=-1.000)、pH1(r=-1.000)呈高度负相关,与脂率(r=1.000)、熟肉率(r=1.000)高度正相关;脂联素(adiponectin)基因(P>0.05)和蛋白(P<0.05)表达量高于对照组,与脂率(r=-1.000)、熟肉率(r=-1.000)、胴体重(r=-0.500)、屠宰率(r=-0.500)、肉色评分(r=-0.500)、pH24(r=-0.500),肌内脂肪含量(r=-0.500)负相关,与日增重(r=0.837)、瘦肉率(r=1.000)、pH1(r=1.000)、眼肌面积(r=0.500)、失水率(r=0.500)正相关;脂肪分化相关蛋白(adiposedifferentiation-related protein,ADFP)基因(P>0.05)和蛋白(P<0.05)表达量上调,但与肉质、体增重等指标相关性不大;脂蛋白脂酶(lipo-protein lipase,LPL)基因和蛋白变化不明显,与各项屠宰指标不相关。这些结果表明一定量的紫花苜蓿下调Leptin、通过CEBPβ上调PPARr、ADFP和Adiponectin 3个基因和蛋白的表达,增加猪的日增重、肌内脂肪,影响肉质性状,对LPL的作用较小。这些研究为紫花苜蓿在养猪业中的开发利用奠定了理论基础。  相似文献   

基于血浆DNA检测妊娠山羊的胚胎性别研究     

杜航  冉雪琴  石洪中  琚四美  王嘉福 《贵州农业科学》2011,39(5)

为快速进行山羊无创伤产前的性别诊断,同时对家畜的遗传缺陷检测和胚胎移植等研究提供科学依据,采用改良酚/氯仿法提取妊娠母羊血浆DNA,通过双重PCR技术扩增雄性性别决定(sex deter-mining region Y,SRY)基因,并以真核生物延伸生长因子-1(elongation factor 1 alpha,EF-1а)基因为内参照进行试验.结果显示,15例孕有雄性胎儿的孕母羊血浆样品中,13例扩增出SRY基因片段,检出率为86.67 9,6(13/15);孕有雌性胎儿的孕母羊血浆中均未检出SRY基因片段,雌性和雄性检测的正确率为92.86 %(26/28).  相似文献