吕氏泰勒虫主要表面蛋白P32基因的克隆与序列分析     

刘爱红  关贵全  刘军龙  李有全  马米玲  牛庆丽  任巧云  殷宏  罗建勋 《动物医学进展》2010,31(2):7-10

从吕氏泰勒虫宁县株中提取RNA,用RT-PCR方法扩增主要表面蛋白P32基因的cDNA片段,克隆后测定其核苷酸序列,并推导了相应的氨基酸序列。结果表明,扩增的P32基因长度为875个核苷酸,共编码284个氨基酸。核苷酸序列与已发表的牛的4种泰勒虫的主要表面蛋白基因相比较,其与瑟氏泰勒虫俄罗斯株、日本株、中国辽阳株的核苷酸和氨基酸序列相似性均在98.9%以上。其推导的氨基酸序列中有3个糖基化位点。  相似文献   

羊尤氏泰勒虫一个新生多肽复合物α多肽基因的cDNA文库筛选和测序（英文）     

党志胜  刘志杰  罗建勋  关贵全  马米玲  刘爱红  李有全  高金亮  任巧云  白启  杉本千寻  殷宏 《中国兽医寄生虫病》2010,18(4):60-65

为筛选羊尤氏泰勒虫裂殖子功能基因,用羊尤氏泰勒虫裂殖子提取物免疫BALB/c小鼠,将小鼠脾脏细胞与鼠骨髓瘤SP2/0-Ag14细胞融合,融合细胞培养上清用酶联免疫吸附法和免疫印记法检测。提取羊尤氏泰勒虫裂殖子mRNA后,进行cDNA合成与文库构建。文库在免疫学噬斑筛选后,将阳性克隆进行测序和序列BLAST搜索。筛选结果显示有两个阳性克隆。所得序列BLAST搜索结果显示,它与12类寄生虫新生多态相关复合物α多肽基因的同源性在39%到78%之间。结果提示,所筛选的序列为羊尤氏泰勒虫裂殖子新生多态相关复合物α多肽基因不完全序列。该研究为今后使用单克隆抗体筛选羊泰勒虫功能性基因提供了参考。  相似文献   

牛泰勒虫的分离鉴定及进化分析     

刘娟  刘军龙  刘爱红  赵洪喜  杨聪山  赵帅阳  刘光远  殷宏  关贵全  罗建勋 《中国畜牧兽医》2016,43(4):1050-1057

牛泰勒虫病是严重危害养牛业可持续发展的血液原虫病,本试验采用血涂片镜检和特异性PCR检测技术,对中国某种牛场的18份血样进行了泰勒虫检测,然后分别用ITS基因通用引物和4种MPSP等位基因特异性引物自阳性样品中扩增出对应的基因,克隆测序后,进行序列比对和进化分析,确定泰勒虫基因型。结果显示,自18份牛血样中检出3份阳性样品,且全为瑟氏泰勒虫感染;3个阳性样品的瑟氏泰勒虫MPSP等位基因扩增结果显示,1个阳性样品为I (Ikeda) 和C (Chitose)型的混合感染,另2个样品为I型单一感染,而均无B (Buffeli)和Thai型;用扩增的MPSP基因测序,构建进化树,确认其感染的瑟氏泰勒虫存在MPSP 1型和2型。这些结果表明,该种牛场存在瑟氏泰勒虫感染,且同时存在2种MPSP等位基因型;MPSP等位基因的复杂性可能使该病的免疫防控更加困难。本试验结果为深入研究瑟氏泰勒虫感染情况及免疫防控提供了数据支持,并为养防一体做好监控。  相似文献   

鸡γ-干扰素基因的克隆及原核表达     

史耀旭  关贵全  高金亮  党志胜  刘志杰  刘爱红  马米玲  任巧云  罗建勋  殷宏  曾巧英 《中国兽药杂志》2006,40(7):12-16

参照Digby发表的鸡γ-干扰素的核苷酸序列，设计一对引物，应用RT—PCR技术，从ConA诱导过的鸡脾淋巴细胞中特异性地扩增出大小约为500bp的基因片段。将该扩增基因进行克隆测序，结果表明其序列与Digby报道的CHIFN-γ基因序列的同源性达100％。将该基因插入原核表达载体pGEX-4T-γ中构建成重组表达载体pGEX—CHIFN-γ，并将其导入大肠杆菌BL21中，诱导表达的重组蛋白经SDS—PAGE分析，分子量约为43ku，表明所克隆的CHIFN-γ基因在原核细胞中得到了表达。  相似文献   

特有品种鸡皮糙山药的高产种植模式     

刘明  刘卫东  刘爱红  马晓燕 《中国果菜》2007,(4):9-9

山药是营养价值很高的食物和药物。山药味甘，性平．人脾，肺、肾三经。有健脾、补肺．固肾，益精之效。由于能振奋脾阳，增强机体的消化与吸收功能，故可达到补养身体、延年益寿之目的。山药不仅能扶正滋身健体，而且还具健美之功效，因而近年来在国内外市场上非常畅销，价格也不断攀升。[第一段]  相似文献   

猪伪狂犬病毒间接ELISA抗体检测方法的建立     

刘旻翾  丁光明  付钰广  刘爱红  陈佳宁  李宝玉  曾巧英  刘光亮 《中国预防兽医学报》2019,(5):484-488

为了满足我国现阶段猪伪狂犬病病毒(PRV)高频突变引发新疫情诊断的需求,本实验通过生物信息学分析比较,设计合成了针对PRV g B糖蛋白高度保守的抗原优势表位区肽段,命名为g B872。以此肽段为包被抗原,经条件优化建立了新型的PRV-g B间接ELISA抗体检测方法。该ELISA方法检测结果显示,其仅对PRV血清检测为阳性,而与猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、口蹄疫病毒(O型)、猪细小病毒、猪圆环病毒2型等主要猪源病毒阳性血清均无交叉反应,表明该方法具有较强的特异性;最低检测下限血清稀释度为1∶128,高于IDEXX PRV/ADV g B抗体检测试剂盒检测下限稀释度(1∶4),表明该方法敏感性高;批内、批间重复性试验结果显示,变异系数均低于10%,重复性良好。利用该方法与Bio Chek PRV-g B抗体检测试剂盒检测90份临床血清样品,对比结果分析显示,两者阳性符合率为100%,阴性符合率为97.67%,总体符合率为97.78%;同时,采用该方法与IDEXX-g I(gE)和IDEXX-g B试剂盒分别对野毒感染血清和疫苗免疫血清同时检测,该方法可以准确识别野毒阳性血清和疫苗免疫阳性血清,与IDEXX两种试剂盒的结果一致。本研究建立的间接ELISA检测方法对PRV疫苗免疫效果评价、流行病学调查及防控提供了可靠的方法。  相似文献   

灌溉量对紫花苜蓿水分利用效率和耗水系数的影响   总被引：6，自引：0，他引：6  

孙洪仁  马令法  何淑玲  李品红  刘爱红 《草地学报》2008,16(6):636

采用大型非称重式蒸渗仪法,在河北省坝上地区研究灌溉量对紫花苜蓿(Medicago sativa L.)水分利用效率和耗水系数的影响。结果表明:随着灌溉量由0增至400 mm,紫花苜蓿耗水量由335.5增至712.8 mm,干物质产量由3304.7增至7423.3 kg/hm²,二者差异显著(P<0.05);第1茬生物产量和经济产量水分利用效率分别由10.5和12.2降至6.8和7.9 kg/(mm·hm²),第2茬则相反,分别由9.5和11.1增至19.0和22.1 kg/(mm·hm²),但第1~2茬差异不显著;第1茬耗水系数分别由956和822升至1480和1273,第2茬则相反,分别由1053和906降至527和453,但1~2茬差异不显著;不同茬次间水分利用效率及耗水系数差异显著(P<0.05)。  相似文献   

微小牛蜱Bm86基因的克隆与原核表达     

樊瑞泉  罗建勋  杨孝朴  殷宏  高金亮  关贵全  刘志杰  党志胜  马米玲  任巧云  刘爱红 《甘肃农业大学学报》2007,42(1):15-19

根据已发表的Bm86基因序列,设计表达型引物,利用RT-PCR技术,从微小牛蜱饥饿幼蜱的研磨物中扩增Bm86基因,将PCR产物连入pGEM-T Easy载体,构建重组克隆载体pGEM-T easy-Bm86.测序分析表明:克隆的微小牛蜱Bm86基因序列与GenBank上登录的Bm86基因的核苷酸和氨基酸序列的同源性分别为97%和95.6%.然后对重组克隆载体pGEM-T easy-Bm86进行双酶切,获得带有粘性末端的Bm86基因片段,并将此片段定向亚克隆入原核表达载体pGEX-4T-1,构建重组原核表达载体pGEX-4T-1-Bm86,将其转化到BL21宿主菌中,用IPTG进行诱导表达.SDS-PAGE检测表明表达产物为分子量为88 Ku的融合蛋白,目的蛋白约占蛋白总量的39%,表达量约为1.08 mg/mL.Western blot分析表明此表达产物能被兔抗微小牛蜱阳性血清所识别.  相似文献   

北京平原区紫花苜蓿最佳秋季刈割时期研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

武瑞鑫  孙洪仁  孙雅源  李品红  谢勇  刘爱红 《草业科学》2009,26(9):113-118

研究了秋季刈割时期对北京平原区中苜1号紫花苜蓿Medicago sativa当茬产草量、牧草含水量、茎叶比、越冬前再生高度、越冬率和越冬后头茬产草量的影响。结果表明：杀霜前随着秋季刈割时期延后当茬产草量呈逐渐升高趋势（P<0.05）,而杀霜后呈降低趋势;初霜前含水量处于恒定状态,初霜后逐渐降低,杀霜后大幅度下降（P<0.05）;杀霜后茎叶比升高明显（P<0.05）;杀霜前随着刈割时期延后越冬前再生高度逐渐降低,杀霜后不再变化;增加1次秋季刈割及秋季不同时期刈割对北京平原区中苜1号紫花苜蓿越冬率没有显著影响;杀霜前随着秋季刈割时期延后越冬后头茬产草量呈逐渐升高趋势（P<0.05）,秋季刈割最早处理组的越冬后头茬产草量显著低于对照组（P<0.05）,其他各杀霜前刈割处理组均与对照差异不显著。初步结论为：北京平原区可以进行紫花苜蓿秋季刈割;北京平原区紫花苜蓿秋季刈割的最敏感时期大致为与前次刈割间隔＜8周、≥5 ℃有效积温＜720 ℃,与杀霜日间隔＞3周,≥5 ℃有效积温＞90 ℃;北京平原区紫花苜蓿秋季刈割的最佳时期大致为与前次刈割间隔8～11周、≥5 ℃有效积温760～800 ℃,与杀霜日间隔0～3周,≥5 ℃有效积温0～40 ℃。  相似文献   

坝上地区紫花苜蓿的需水量、需水强度和作物系数（Ⅱ）   总被引：2，自引：0，他引：2  

李品红  孙洪仁  刘爱红  谢勇  孙雅源 《草业科学》2009,26(9):124-128

采用大型非称重式蒸渗仪法,研究了河北省坝上地区紫花苜蓿Medicago sativa的需水量和需水强度。采用Penman-Monteith公式计算参照作物蒸散量,利用需水量测定值和同期参照作物蒸散量计算了紫花苜蓿的作物系数。结果表明：坝上地区2008年紫花苜蓿第1、2、3茬和全生长季（1-3茬）需水量分别为157.8、192.0、199.5和549.3 mm,第1茬显著低于第2和3茬（P＜0.05）,第2和3茬差异不显著。需水强度分别为2.6、6.2、4.2 和3.9 mm/d,第2茬显著高于第1和3茬（P＜0.05）,第3茬显著高于第1茬（P＜0.05）。作物系数分别为0.61、1.34、1.30和0.99,第2和3茬作物系数明显高于第1茬,超过其2倍。  相似文献