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2003年,我县土鸡年饲养量达356万多只,主要以养假三黄(麻鸡与三黄鸡杂交)、岭南黄(土鸡与三黄鸡杂交)、三黄鸡、麻鸡为主。为更详细了解各种品种鸡的生产性能和品种特性,更好地指导养户选择鸡种,今年6月至9月,我们分别在东方镇养鸡户丁桂秀和新碧镇养鸡户应云富处分两次进行不同品种土鸡饲养效果观察。1饲养试验1.1饲养数量、时间、地点将2003年6月6日孵出假三黄鸡苗及本月19日孵出岭南黄鸡苗中的草鸡各2000只放于东方镇养鸡户丁桂秀处饲养。新碧镇应云富分别于6月2日、6月8日、6月12日各进假三黄鸡5100只、麻鸡3200只、大三黄鸡5100只。1.2… 相似文献
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采用PCR法从绍兴鸭的肝组织基因组DNA中扩增出α-干扰素基因,插入pUC18载体,进行序列测定及分析;将成熟α-干扰素基因亚克隆到表达载体pET-28α( )中,并转化入大肠杆菌BL21进行表达;表达产物经复性后,进行抗病毒活性的测定.测序结果表明,该基因(sxDuIFN-α)由576个核苷酸组成,共编码191个氨基酸.该基因与GenBank公布的鸭α-干扰素基因(X84764,AB128861)的核苷酸序列同源性分别为99.3%和99.1%,氨基酸序列同源性均为97.9%.表达载体经IPTG诱导表达出相对分子量为20.7 kD的DuIFN-α.该产物经细胞病变抑制法测定,显示出具有明显的抗猪水泡性口炎病毒(VSV)及鸭瘟弱毒疫苗毒的活性. 相似文献
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鸭瘟病毒囊膜糖蛋白gH的原核表达和免疫印迹 总被引:1,自引:0,他引:1
根据鸭瘟病毒包膜糖蛋白H(gH)基因序列设计3对引物,PCR扩增的基因片段分别定向插入到原核表达载体pET28,构建了3种原核表达质粒pET-gH、pET-gH1347和pET-gH1707,并转化宿主菌BL21(DE3)。结果显示,去除了gH跨膜区和信号肽的gH基因片段(pET-gH1347和pET-gH1707)获得了表达,而全基因片段(pET-gH)未获得表达。Western-blot表明2种表达产物均能与鸭瘟病毒阳性血清发生特异性反应。鸭瘟病毒gH蛋白的成功表达,将有助于开展该基因功能的研究和血清学检测方法的建立。 相似文献
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鸡传染性腺胃炎病原分离和初步鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
从1997年在浙江省建德市发生的一种新的以腺胃肿大为特症的鸡传染病病例中收集的腺胃组织(ZJ971)为鸡胚接种材料,感染鸡胚第1代可达33.3%的死亡率,第3代达75%的死亡率并出现规律性死亡,自第6代开始死亡率达100%.鸡胚尿囊液经1%胰酶处理后可凝集鸡和鼠的红细胞,电镜观察可见直径90~190nm的带囊膜和突起的冠状病毒粒子,中和试验结果显示低滴度的ZJ971可被IBV-H52和T株血清中和,ZJ971对酸、碱、热、乙醚和氯仿敏感,对反复冻融不敏感.这表明,从腺胃病变型鸡群中分离的ZJ971毒株是冠状病毒科的一个成员. 相似文献
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浙江地区传染性法氏囊病毒变异株分离及鉴定 总被引:5,自引:0,他引:5
7株鸡传染性法氏囊病的法氏囊组织直接在鸡胚成纤维细胞盲传2-15代后,均能不同程度产生细胞病变效应,并通过病毒血清中和试验,动物回归试验,电镜观察,琼脂免疫扩散试验,理化特性测定等试验证实七株病原为传染性法氏囊病病毒。在此基础上将7个浙江地芡的IBDV野毒株,1个四川地区的IBDV野毒株和2个疫苗毒株经病毒-血清交叉中和试验获得了抗原性不同的五个亚型毒株或变异株。 相似文献
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鸭呼肠孤病毒基因Ⅰ型与Ⅱ型鉴别诊断RT-PCR方法的建立与应用 总被引:1,自引:0,他引:1
临床发病鸭(Anas platyrhynchos domestica)群中存在两种基因型鸭呼肠孤病毒(Duck reovirus,DRV)的感染.为建立一种能鉴别诊断DRV Ⅰ型(classical DRV,C-DRV)与Ⅱ型(novel DRV,N-DRV)的一步法RT-PCR检测方法,本研究通过对GenBank已公布的现有C-DRV和N-DRV S1和S4基因片段序列进行比对分析,设计合成两对特异性引物,并对引物浓度、退火温度和循环次数等扩增条件进行优化,建立一种能鉴别诊断C-DRV和N-DRV的一步法RT-PCR检测方法.结果表明,一步法RT-PCR最佳的反应体系为:PrimeScript 1 Step Enzyme Mix 1μL,2×1 Step Buffer 12.5μL,RNA模板1.5μμL,上下游引物(20μmol/L)各1μL,RNase Free dH2O补足25 μL;最佳反应条件:50℃反转录30 min;94℃预变性2 min;94℃变性30 s,55℃退火30 s,72℃延伸30 s,共30个循环.该方法可从C-DRV和N-DRV基因组中扩增出大小分别为249和505 bp单一特异性片段,从两种病毒基因组混合物中可同时扩增出两条特异性片段,而对鸭源常见病毒及正常细胞基因组在同等条件下检测均为阴性;该方法具有较高的敏感性,其最低病毒检出量分别为0.47和0.62个半数组织培养感染剂量(50% tissue culture infective dose,TCID50);对不同代次、不同时间提取的病毒RNA样品重复检验3次,结果均一致.对浙江省2011~2015年采集的239份疑似临床病料进行检测,C-DRV与N-DRV的阳性率分别为2.5%(6/239)和31.4%(75/239);通过对阳性病料P10和P18扩增序列的测序也证实检测结果的准确性.本研究建立的双重一步法RT-PCR可以有效区分两种基因型DRV,且临床样品检测表明N-DRV是浙江省流行的优势基因型.本研究为鉴别诊断C-DRV与N-DRV提供了一个快速、灵敏性高及低成本的实验室诊断方法,该方法的建立可为DRV的分子流行病毒学调查提供有效的技术支持. 相似文献
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随着畜牧业的发展,养殖业从分散饲养到规模生产方式的转变,带来的最严重问题就是养殖场排放物导致的环境污染.据最近国家环保局对23个省、市规模化畜禽养殖业污染情况的调查,80%的规模化养殖场建在人口密集区域;90%的畜禽养殖场未通过环境影响评估;80%左右的规模化畜禽场缺乏必要的污染治理投资.在此,笔者从畜禽污染来源、原因等探讨养殖业中的环保意识与污染治理问题. 相似文献