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11.
为获得针对鲤春病毒血症病毒(SVCV)特异性的单克隆抗体(MAb),以纯化的SVCV为抗原,免疫BALB/c小鼠.将免疫鼠的脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,采用间接ELISA法筛选获得4个能稳定分泌抗SVCV MAb的杂交瘤细胞株;4个杂交瘤细胞制备腹水的MAb效价为1:160 000~1:640 000.亚型鉴定结果表明,这些MAb分属2个亚型(1F1、3E1,IgG2a;3F5、4F9,IgGl),轻链均为K链.Western blot分析显示,MAb1F1、3F5、4F9能特异性地识别SVCV的N蛋白(47 ku),3E1能特异性地识别SVCV的G蛋白(69 ku).采用相加ELISA法对抗原表位分析结果显示,1F1、3F5、4F9可能识别相同的表位,3E1则识别不同的表位.间接免疫荧光试验结果显示4株MAb均能对染毒病灶产生特异性的荧光染色.这些MAb的制备为SVCV免疫学检测方法的建立奠定了基础. 相似文献
12.
13.
试验鱼按投喂饲料的不同分为5组,其中对照组(RM0)以豆粕和鱼粉为基础蛋白源,试验组分别以双低菜籽粕(DLRM)和普通菜籽粕(CRM)等氮替代对照组中50%(DLRM50,CRM50)和100%(DLRM100,CRM100)的豆粕蛋白。分别在投喂菜籽粕后的当天与第14、28、42、56天取样,测定异育银鲫血液白细胞和头肾吞噬细胞的吞噬活性、血清溶菌酶活性、血清补体(C3、C4)含量等免疫指标的变化。结果表明:在投喂菜籽粕后28d内,各项免疫指标变化不明显(P>0.05);在第42天,DLRM100组、CRM100组的血液白细胞和头肾吞噬细胞的PP、PI,CRM100组的血清溶菌酶活性,DLRM100组的C4含量,CRM100组的C3、C4含量均显著低于对照组(P<0.05);在第56天,DLRM100、CRM100组的各项免疫指标都显著低于对照组;在整个试验过程中,DLRM50、CRM50组的各项免疫指标和对照组都没有显著的差别。 相似文献
14.
红螯螯虾对高锰酸钾,敌百虫和漂白粉耐受性的研究 总被引:10,自引:2,他引:8
研究了红螯螯虾虾苗对主锰酸钾。,敌百虫,漂白粉的耐受性和幼虾对高锰酸钾,敌百虫的耐受性。结果表明,在水温23-24℃时,虾苗对高锰酸钾,敌百虫,漂白粉在48h的LC50分别为2.38,g/L,0.11mg/L,106.41mg/L,安全浓度分别为1.79mg/L,0.016mg/L,28.39mg/L;幼虾对高锰酸钾,敌百虫在48h的LC50分别为15.77mg/L和0.12mg/L,安全浓度分别 相似文献
15.
红螯螯虾虾苗对四种重金属离子的耐受性 总被引:12,自引:1,他引:11
重金属对各种虾类影响的研究约始于70年代初,Chinnayya(1971)报道了铅、锌、铜、汞可降低淡水虾(Caridinarajadhari)的耗氧速度[1];Mandelli(1971)指出铜对桃红对虾(Penaeusduorarum)和褐对虾(P.aztecus)的各期幼体阶段的致死浓度为0.05mg/L,并会影响对虾的渗透能力[2];Nimmo(1977)、Couch(1977)报道了镉对桃红对虾的影响,指出其半致死浓度为0.0065mg/L[3,4]。吴彰宪等(1988)报道了23种有… 相似文献
16.
本研究建立了定量检测鲤疱疹病毒2型(Cyprinid herpesvirus 2,CyHV-2)的微滴式数字PCR(Droplet digital PCR,ddPCR)检测方法,并与实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qPCR)检测方法的灵敏性、重复性、特异性和临床样品检测做了比较分析.结果表明,与qPCR相比,ddPCR具有相同的特异性,其灵敏性比qPCR低20倍.在定量CyHV-2 DNA时,ddPCR (R2=0.994)和qPCR (R2=0.994)均表现出良好的线性关系,且2种检测方法间的定量值呈正相关(R2=0.989).在定量检测相同稀释度的CyHV-2 DNA时,qPCR的定量值始终比ddPCR高10倍.ddPCR的组内和组间重复变异系数(CV)分别为0.59%-11.26%和6.55%-23.21%,而qPCR为16.57%-27.56%和22.31%-56.73%,说明ddPCR具有更好的稳定性.在临床样品定量检测时,ddPCR的检出率稍高于qPCR.本研究建立的ddPCR能够准确定量检测CyHV-2,将为CyHV-2相关研究提供有益参考. 相似文献
17.
通过建立靶向于鲤疱疹病毒Ⅱ(Cyprinid herpesvirus 2,Cy HV-2)胸苷激酶基因(TK基因)的荧光定量PCR法,分别检测了自然感染Cy HV-2的金鱼、鲫样品,并结合人工感染试验,分析了脾和肾组织内Cy HV-2的载量及其引发的组织病理变化。结果表明,自然感染Cy HV-2的金鱼和鲫的病毒拷贝数范围为102~105,人工感染Cy HV-2的异育银鲫在感染后第五天脾和肾组织内病毒的拷贝数高达1010。人工感染条件下鱼体呈现系统性病理损伤,自然感染状态下鱼体脾和肾的病理变化分别表现为细胞嗜性的转变和炎症。 相似文献
18.
摘要采用已构建的原核重组质粒pET30a-Om pK为模板,通过PCR扩增Om pK成熟肽基因片段,引入酶切位点后克隆至分泌表达载体pPIC9K,经Sal I线性化后,氯化锂法转化至毕赤酵母GS115中,并经G418遗传霉素筛选高拷贝酵母转化子,最后进行甲醇诱导表达,表达上清经SDS-PAGE电泳检测及Western-... 相似文献
19.
为提高樱桃谷鸭孵化效果,试验对不同品质(蛋重、蛋形指数、比重)和不同季节的樱桃谷鸭种蛋进行不同孵化方案对比研究。结果表明:蛋重80~90g、蛋形指数1.34~1.37、比重1.090~1.095种蛋出苗率最高;广东寒冷季节(每年10月至次年3月)最佳的孵化方案:温度:0~3胚龄38.1℃,4~7胚龄37.8℃,8~12胚龄37.9℃,13~16胚龄37.6℃,17~20胚龄37.3℃,21~24胚龄37.0℃,25~28胚龄36.7℃;相对湿度:0~3胚龄70%,4~7胚龄65%,8~12胚龄60%,13~20胚龄55%,21~25胚龄65%,26~27胚龄75%,28胚龄85%;喷水凉蛋:5~13胚龄1d1次,15~25胚龄1d2次;风门:1~7胚龄为1;8~25胚龄为3;26~28胚龄为5。广东炎热季节(每年4月至9月)最佳孵化方案:温度:0胚龄37.9℃,1~7胚龄37.6℃,8~12胚龄37.7℃,13~16胚龄37.4℃,17~20胚龄37.1℃,21~24胚龄36.9℃,25~28胚龄36.5℃;相对湿度:0~3胚龄63%,4~14胚龄55%,15~20胚龄53%,21~25胚龄58%,26胚龄68%,27胚龄75%,28胚龄85%;喷水凉蛋:5~6胚龄、8~13胚龄1d1次,15~25胚龄1d2次;风门:0胚龄为1;2~7胚龄为2;8~16胚龄为4;17~28胚龄为6。 相似文献
20.
一株基因Ⅵ型鸭新城疫病毒F基因的克隆及序列分析 总被引:2,自引:2,他引:0
以一株鸭新城疫病毒NDV-SS分离株基因组RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增其F基因,并进行克隆和序列测定。通过序列分析软件将该毒株F基因氨基酸推导序列与GenBank上已发表的新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)F基因相关代表序列进行同源性及遗传进化关系分析。测序结果表明,NDV-SS株F基因全长1662bp,编码553个氨基酸,其蛋白裂解位点氨基酸序列为112R-R-Q-K-R-F117,符合NDV强毒株特有的序列结构特征。同源性及遗传进化关系分析结果表明,NDV-SS株为基因Ⅵ型毒株,与鸽源新城疫IT-227、Italy-2736分离株具有较高同源性和较近的亲缘关系,推测其可能是由鸽源新城疫病毒变异所产生的。 相似文献