四川牦牛UCP1基因遗传多态性及其与肉品质性状的关联分析     

陆惠娴  于海滨  谢涛  阮梦茹  Ambreen Iqal  姜平  赵志辉 《中国兽医学报》2023,(2):411-417

四川牦牛(Bos grunniens,yak)主要分布于我国海拔3 000～5 000 m的高原地区，以肉质细嫩、味美可口、低脂肪、高蛋白而受到国内外消费者的欢迎。牦牛全身都是宝，藏族人民的衣食住行都离不开它。解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)是棕色和米色脂肪细胞特异性表达的一种产热线粒体蛋白，通过线粒体中的电子传递链参与底物氧化和ATP分解进程，从而产生热量并为机体供能。本课题组前期通过组学分析发现：UCP1基因可能对脂质代谢具有重要调控作用。因此，本试验拟以四川牦牛为研究对象，探讨UCP1基因在四川牦牛群体中的遗传多态性，分析四川牦牛肉品质性状相关的潜在遗传标记位点。结果显示，UCP1基因的内含子4和外显子5中共发现4个SNPs位点，其中I4-769 G>A位点的AA型的背最长肌红度显著高于GG型；在I4-836 C>T位点中CC型的背最长肌红度和黄度显著高于CT型；E5-26 C>G位点的CC型的背最长肌亮度显著低于CG型，而CC型背最长肌红度和黄度显著高于CG型；E5-59 A>G位点的GA型的背最长肌24 h时的pH值显...  相似文献   

HEK-293T细胞敲除TRIM25基因促进脑心肌炎病毒复制的研究     

刘文文  吕林  朱慧欣  延君芳  姜平  白娟 《畜牧与兽医》2022,(6):78-84

为了探究三方基序蛋白25(TRIM25)对脑心肌炎病毒(encephalomyocarditis virus,EMCV)增殖的影响，在HEK-293T细胞上使用簇状规则间隔的短回文重复序列(CRISPR/Cas9)基因编辑技术敲除TRIM25基因，并通过PCR测序和Western blot确认敲除效果，然后观察敲除细胞形态并利用试剂盒测定TRIM25缺失后细胞增殖速度的变化，确认敲除细胞与野生细胞无明显差异，用EMCV感染敲除细胞后，采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、病毒滴定测定和Western blot等方法测定病毒基因转录水平、蛋白表达情况。结果显示：感染EMCV后，敲除细胞与野生细胞相比，显著促进了病毒的转录水平、病毒蛋白的翻译水平和子代病毒的毒力(P<0.05)。综上，在HEK-293T细胞上，成功构建TRIM25缺失细胞系，且试验表明TRIM25的缺失有助于EMCV的复制。研究结果为后续TRIM25抗病毒机制研究提供了理论依据。  相似文献   

鸡滑液囊支原体致病模型建立与灭活疫苗免疫效果评价     

尹丽萍  王建  李昌明  王莉  张凯云  姜平  秦爱建  刘岳龙 《中国兽医杂志》2023,(8):67-71

为科学评价鸡滑液囊支原体(MS)灭活疫苗的免疫效果，本试验选用3株田间流行的MS菌株(LHMS07、LHMS105和LHMS106),通过爪垫、静脉、气囊注射3种途径和不同攻毒剂量摸索建立SPF鸡攻毒致病模型的方法，并以建立的模型为基础，于攻毒后21 d根据临床病变评分和爪垫肿胀鸡只比例综合评价A和B两种商品化灭活疫苗的免疫效果。结果显示，本试验所建立的攻毒模型为SPF鸡爪垫注射0.2×10⁵CCU的LHMS106菌株，该模型可致试验鸡爪垫肿胀率达100%;疫苗效果评价试验中，攻毒对照鸡只临床病变评分均值为3.4分，爪垫肿胀鸡只比例高达100%;A疫苗和B疫苗免疫后，鸡只临床病变评分均值分别降低至0.5分和1.0分，爪垫肿胀鸡只比例分别降低至12.5%和37.5%。结果表明，养殖场需要科学选择MS灭活疫苗，尤其需要以流行的强菌株建立相对稳定可靠的攻毒模型进行免疫保护效果评价。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒M蛋白单克隆抗体制备及抗原表位鉴定     

王梦婕  张杰  孙杨杨  白娟  刘星  姜平 《畜牧与兽医》2022,(6):91-96

为制备猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)M蛋白单克隆抗体，将PRRSV类NADC30毒株FJ1402的M蛋白胞外区基因与TAT穿膜肽基因融合，密码子按大肠杆菌偏嗜性优化，构建了大肠杆菌表达质粒，制备获得重组M蛋白。取6周龄雌性BALB/c小鼠免疫重组蛋白，将脾脏淋巴细胞和SP2/0细胞融合，用间接ELISA方法筛选阳性杂交瘤细胞株，获得4株分泌M蛋白抗体的杂交瘤细胞株。其中1E7、2F7、3A12的细胞上清液抗体效价为1∶3 200,3G7的细胞上清液抗体效价为1∶800,传至第15代均能稳定分泌抗体。单抗经亚型鉴定可知1E7、2F7、3A12的重链类型为Ig2a, 3G7的重链类型为IgG1,轻链类型都为κ型。经间接免疫荧光试验(IFA)和Western blot鉴定，4株单克隆抗体均可与PRRSV产生特异性反应，鉴定出2个抗原表位，为PRRSV诊断和疫苗研制奠定了基础。  相似文献   

雷州黑鸭TGF-β1基因遗传多态性及其与产蛋性能的相关性分析     

李靖  陆惠娴  于海滨  柯锦锋  苏瑛  赵志辉  姜平 《中国兽医学报》2023,(3):603-609

转化生长因子β1(transforming growth factor beta1,TGF-β1)基因是本课题组前期在高产和低产雷州黑鸭群体中通过转录组学测序分析筛选出的可能对雷州黑鸭繁殖性能有重要调控作用的候选基因。为进一步探究TGF-β1基因的遗传多态性，分析其产蛋性能的相关的遗传分子标记，本试验采用PCR扩增技术和直接测序法，检测100只雷州黑鸭群体中的TGF-β1基因的SNP位点，使用SPSS 26.0软件分析TGF-β1基因的遗传多态性位点基因型与雷州黑鸭产蛋性能的相关性。结果显示，在TGF-β1基因的第6个内含子中发现3个SNPs位点与雷州黑鸭的开产蛋重显著相关，分别为I6-2188 C>T、I6-2220 T>C和I6-2235 A>C;I6-2188 C>T位点与开产日龄显著相关；使用Haploview软件对SNPs位点进行连锁分析发现，H1H1单倍型的开产蛋重显著高于H2H2单倍型。综上所述，TGF-β1基因的3个SNPs位点可作为雷州黑鸭繁殖性能的遗传标记。  相似文献