H9亚型禽流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与应用     

王楷宬  王素春  樊擎莹  孙亚伟  康京丽  汪洋  刘华雷  黄保续 《中国动物检疫》2019,36(12):52-57

为建立一种快速准确检测H9亚型禽流感病毒基因的检测方法,根据GenBank中H9亚型禽流感病毒血凝素编码基因进行荧光检测引物和探针设计,建立了一种针对H9亚型禽流感病毒的荧光RT-PCR检测方法。利用该方法进行灵敏度和特异性检测,并用本方法和国家标准中的荧光RT-PCR检测方法,同时对临床样本进行检测。结果显示,仅H9亚型禽流感病毒出现了正常荧光检测曲线,而其他病毒及阴性对照均未出现;检测灵敏度为RNA终浓度10~(-4) ng/μL(1.30×10~4 copies/μL);临床样本检测结果与国标方法一致,符合率为100%。结果表明,该方法特异性强、灵敏度高,可用于H9亚型禽流感病毒检测。  相似文献   

猪源奇异变形杆菌的分离鉴定与耐药性分析     

董萌萌  徐彦召  杭柏林  杨磊  孙亚伟  王青  胡建和 《中国兽医杂志》2018,(5)

为了对河南省某猪场疑似细菌感染病例进行确诊,本试验采集了病猪肠道中的样品从中分离到1株革兰阴性短杆菌,进行了培养特性观察、生化试验、药敏试验以及16S rRNA基因序列分析。结果显示,分离菌的生化特性、培养特性基本符合奇异变形杆菌的特征,16S rRNA基因序列与奇异变形杆菌的同源性在98%以上,将该分离菌株命名为ZB17;序列分析表明,该分离菌株与猪源奇异变形杆菌(HQ259935.1和KR133627.1)的同源性最高,与大肠杆菌、沙门菌,克雷伯菌的同源性相对较低;分离株具有较强的致病性和多重耐药性,对复达欣、庆大霉素、奈替米星、阿米卡星敏感;但对氨苄西林、美洛西林、先锋霉素IV、先锋霉素V、先锋霉素VI、卡那霉素、新霉素、四环素、强力霉素耐药。本试验为猪源奇异变形杆菌的分离、鉴定及治疗提供了参考。  相似文献   

1例鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定与耐药性分析     

董萌萌  王晓斐  徐彦召  王青  孙亚伟  杭柏林  胡建和 《中国畜牧兽医》2018,(9)

为查明河南省新乡市某规模化蛋鸡场疑似沙门氏菌感染病例的病原,进而制定合理的治疗方案,本研究无菌采集疑似病雏鸡肠管样品,用革兰氏染色、培养特性观察、生化试验、PCR方法对其进行确诊,并进行病原回归试验,采用药敏纸片琼脂扩散法(K-B法)分析分离菌对19种常见抗生素的耐药性。结果显示,本试验成功分离了一株革兰氏阴性短杆菌,该分离菌符合鸡白痢沙门氏菌的培养特性和生化特性;PCR成功扩出invA基因,通过与GenBank数据库比对分析确定该细菌为鸡白痢沙门氏菌;用分离细菌株感染SPF鸡能复制出与自然感染一致的病例,说明鸡白痢沙门氏菌是造成本养鸡场雏鸡发病的主要病原;分离株具有较强的致病性和多重耐药性,对阿米卡星、苯唑青霉素、青霉素耐药,对复达欣、氨苄青霉素、头孢曲松等药物敏感,将敏感抗生素用于临床治疗效果明显。结合以上结果,本研究提出该病的具体防治措施,并取得了较好的效果,为鸡白痢沙门氏菌的分离鉴定及防治提供了参考,对鸡白痢沙门氏菌病病原的早期诊断和治疗具有重要临床意义。  相似文献   

徐淮地区种植密度对短季棉产量及品质的影响     

冯营  胡新燕  孙亚伟  赵明明  李卫华 《安徽农业科学》2018,46(31)

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新疆褐牛瘦素基因第2外显子多态性与肉品质性状的相关性     

孙亚伟  加依娜古丽·吐尔逊拜  张永鹏  闫向民  李宏波  王金泉  姚刚  张杨 《西北农业学报》2021,30(2):174-182

探索Leptin基因多态性与新疆褐牛肉品质的相关性,旨在寻找与新疆褐牛肉品质性状相关分子标记,为新疆褐牛的选育提供分子遗传学理论依据。利用PCR-RFLP方法检测新疆褐牛Leptin基因第2外显子多态性,并分析其与肉质性状的相关性。结果表明,Leptin基因第2外显子E2JW位点存在AA、AT和TT 3种基因型,处于中度多态,E2FB位点有CT和TT2种基因型,处于低度多态,均为Hardy-Weinberg非平衡状态。相关分析表明:Leptin基因第2外显子E2JW位点与肌纤维直径呈正相关,且相关关系极显著(r=0.435),与胱氨酸含量正相关,且相关关系显著(r=0.410),与蛋氨酸含量呈弱负相关趋势(r=-0.308)。E2FB位点与硬脂酸含量呈正相关趋势(r=0.425)。结果提示E2JW位点有可能成为影响新疆褐牛肉品质性状的分子遗传标记位点。  相似文献   

运输对伊犁马肌肉损伤和氧化应激的影响     

柳荦  胡燕  王子豪  卢亚宾  孙亚伟  王金泉 《中国畜牧兽医》2021,48(6):1995-2001

试验旨在研究运输对伊犁马肌肉损伤和氧化应激的影响。选取体重相近的5匹24月龄的伊犁母马,环境适应7 d后开展运输试验,其运输过程中禁食禁水,运输总路程约为400 km,运输时间为8 h。分别于运输0（T1）、4（T2）、8（T3）和卸车后12 h （T4）采集马颈静脉血,分离血清,进行相关生理生化指标的测定。结果显示,与T1相比,肌肉损伤生化标志物肌红蛋白（MYO）和肌钙蛋白（cTnT）在T2时刻显著上升（P<0.05）,T3和T4时刻极显著上升（P<0.01）;乳酸脱氢酶（LDH）在T3时刻显著上升（P<0.05）;炎症反应生化标志物C反应蛋白（CRP）和白细胞介素-6（IL-6）在T2、T3和T4时刻极显著上升（P<0.01）;皮质醇（COR）在T2和T3时刻极显著上升（P<0.01）,在T4时刻显著上升（P<0.05）;总抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）和超氧化物歧化酶（SOD）在T2、T3和T4时刻极显著下降（P<0.01）;过氧化氢酶（CAT）在T3和T4时刻显著下降（P<0.05）;活性氧（ROS）在T2和T4时刻显著上升（P<0.05）,在T3时刻极显著上升（P<0.01）;丙二醛（MDA）在T3和T4时刻极显著上升（P<0.01）。因此,运输8 h导致了伊犁马肌肉损伤和氧化应激反应的发生,其不良影响在卸车后12 h内不能消除。  相似文献   

鸡传染性支气管炎病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与初步应用     

王楷宬  王素春  樊擎莹  孙亚伟  康京丽  汪洋  刘华雷  龚振华  黄保续 《中国动物检疫》2020,37(2):81-86

为建立一种快速准确检测鸡传染性支气管炎病毒的方法,根据鸡传染性支气管炎病毒的核衣壳蛋白基因进行引物和探针设计,建立了一种能够检测鸡传染性支气管炎病毒的实时荧光RT-PCR方法,并对该方法进行特异性和灵敏度检测,同时与国家标准检测方法进行对比。结果显示,本检测方法特异性好,不与其他相关病毒发生交叉反应,灵敏度可达到10-4 ng/μL,与国标检测方法的符合率达100%。结果表明,本研究建立的检测方法可以准确鉴定鸡传染性支气管炎病毒,具有良好的应用前景。  相似文献   

鸡传染性喉气管炎病毒实时荧光PCR检测方法的建立与应用     

王楷宬  王素春  孙亚伟  樊擎莹  康京丽  汪洋  刘华雷  黄保续 《中国动物检疫》2020,37(3):98-102

为探索适合临床高通量鸡传染性喉气管炎检测的方法,针对鸡传染性喉气管炎病毒gB基因序列保守区域,筛选1对特异性引物和1条特异性探针,建立了实时荧光PCR检测方法,并对该方法进行特异性、敏感性评估和临床应用检测。结果显示:筛选出的引物和探针与其他禽类常见病毒无交叉反应,检测下限达到100拷贝/反应;对来自13个场的480份临床样本进行检测,检测出17个阳性样品,与常规PCR检测结果符合率为100%。结果表明,此方法特异性强,灵敏度高、耗时少,可用于鸡传染性喉气管炎的快速检测。  相似文献   

池塘培育大规格蟹种技术总结     

孙亚伟  吕军 《河南水产》2003,(3):15-15,10

2003年平顶山市水产技术推广站为配套大水面围栏养蟹,推广蟹种池塘培育技术,在叶县孤石滩水库开展池塘培育大规格蟹种试验,试验面积1.3亩,投放规格14万只/公斤的蟹苗3万只,自5月25日投放至10月31日捕捞,共生产蟹种49公斤,平均规格11.11克/只,达到了池塘培育大规格蟹种配套大水面围栏养殖的目的。1池塘条件试验地点选在叶县孤石滩水库渔场,池塘面积1.3亩,池塘水深1.5米,沙壤底,微漏水,水质偏瘦,池塘内无水草,水源充沛,为水库自流水,水质清新无污染。2池塘的前期准备2.1防逃设施的建设首先在池塘四周铺设防逃塑料薄膜,高0.30m,下部埋入土中0.2…  相似文献   

青虾池塘养殖试验     

孙亚伟 《内陆水产》2004,29(8):13-14

青虾又名河虾，学名日本沼虾．主要分布在我国和日本，无论在南方还是北方都能很好地生长和繁殖，青虾是经济价值较高又普遍受市场欢迎的名特优水产品，不仅肉味鲜美无腥无刺，而且营养丰富。青虾的养殖在我国具有悠久的历史，但多以粗放粗养为主．产量低、效益差，2003年我们在平项山市新华区西治渔场进了池塘主养青虾试验，取得了良好的效果。  相似文献