猪瘟病毒E2基因抗原结构域A、B、C、D区在大肠杆菌中的表达   总被引：4，自引：0，他引：4  

张永国  刘湘涛  韩雪清  胡建和  张彦明  谢庆阁 《畜牧兽医学报》2004,35(2):182-185

采用PCR技术扩增出猪瘟病毒E2基因抗原结构域A、B、C、D区并克隆于PGEM-T easy载体上，测序结果表明插入的为猪瘟病毒E2基因抗原结构域，切出目的基因，将目的基因克隆到表达质粒pProEX—HTb中，获得重组质粒经PCR、酶切和序列分析鉴定E2基因抗原结构域插入的位置、大小和读码框均正确，SDS—PAGE检测表明受体菌经IPTG诱导后能表达E2基因抗原结构域蛋白，Westernblot检测表明受体菌诱导表达E2基因抗原结构域蛋白可与猪瘟阳性血清发生特异性反应。  相似文献   

猪瘟病毒及其全长cDNA在猪肾细胞中增殖表达特性的比较研究   总被引：1，自引：2，他引：1  

田宏  张彦明  林彤  刘湘涛  胡建和  吴锦艳  张淼涛  谢庆阁 《畜牧兽医学报》2005,36(10):1038-1042

以猪瘟C-株弱毒疫苗株、经典强毒石门株和C-株全长cDNA为试验材料，以免疫荧光技术为主；结合ELISA和RT-PCR检测技术，对其在培养细胞中的增殖特性和表达规律进行了比较研究。同时筛选猪瘟病毒及其全长cDNA的敏感细胞，探索其增殖表达规律，以便为猪瘟病毒反向遗传操作提供技术方法和可操作的条件。  相似文献   

如何提高鸡场蛋料比     

魏刚才  胡建和  郭东升 《河南畜牧兽医(综合版)》1998,(6)

现在许多蛋鸡场谈起生产情况总是会说产蛋率多高，产蛋量多少。其实产蛋率高、产蛋量多只能说明鸡群生产性能优良，并不能说明其效益就好。有些鸡场在生产中产蛋率也很高，但它的饲料消耗也很多，效益并不好。因此对蛋鸡场来说应把蛋料比做为衡量本场生产情况的重要指标之一，因为蛋料比在某种程度可以反映产蛋鸡营养和管理的每一方面，并且涉及鸡的遗传潜力及新母鸡的培育效果。只有较好的蛋料比。才能创造较高的经济效益。要实现较好的蛋料比，必须得有营养全面的饲料、完善的管理方案、较高的产蛋量，适宜的环境条件、良好的疾病防治方法…  相似文献   

蛋鸡饲料浪费的主要原因及其预防     

杭柏林  刘保国  胡建和  刘丽艳  荆汝顶 《广东饲料》2008,17(5):44-45

饲料费用约占养鸡总成本的75％．然而饲料浪费的数量可以达到饲料总消耗量的5％～10％．因此，减少饲料浪费是降低成本、增加经济效益的主要措施。饲料浪费的主要原因一般可分为直接浪费和间接浪费两种。本文就蛋鸡饲料浪费的原因进行分析并提出预防措施。  相似文献   

鸡新城疫病毒分子生物学特性及检测方法研究进展     

王青  张改平  赵森林  王选年  胡建和  王自良  杨苏珍  鲁晓翠  肖治军 《河南农业科学》2007,(5):114-116

鸡新城疫是由新城疫病毒(NDV)引起的一种急性败血性传染病,是危害养鸡业发展最严重的疫病之一.NDV属于副黏病毒科、副黏病毒亚科、腮腺炎病毒属,是一种有囊膜的负链RNA病毒[1].  相似文献   

中国猪瘟兔化弱毒全基因组cDNA文库的构建和序列分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

胡建和  庄湘珍等 《中国兽医科技》2002,32(12):12-15

根据已发表的猪瘟病毒（CSFV）序列设计并合了26条覆盖全长基因组的套式和半套式PCR引物。应用RT－PCR、Nested PCR和Half-nested PCR技术从试验感染的兔脾中成功地扩增出了各相应的cDNA重叠片段，分别克隆和测序，构建了C株全基因组cDNA文库，采用DNAstar软件对全基因组的核苷酸和氨基酸序列进行了同源性比较分析。CSF C株全基因组cDNA文库的构建为进一步构建全长感染性cDNA奠定了基础。  相似文献   

牛血液白细胞源抗菌肽的纯化及活性鉴定     

尚田田  王青  杭柏林  赵志雨  徐彦召  胡建和 《广东农业科学》2012,39(11):130-132

为了分离纯化牛白细胞中的抗菌肽(Antimicrobial peptides,AMPs)并对其体外抗菌活性进行初步分析,以中国荷斯坦奶牛血液为材料,通过离子交换层析法纯化抗菌肽,用反相高效液相色谱法(RP-HPLC)进一步纯化,用双层琼脂糖弥散法测定其抗菌活性。结果表明,通过离子交换层析获得的阳离子峰有抗菌活性,通过RP-HPLC对阳离子峰纯化后获得了6个峰;6个峰液对大肠杆菌和沙门氏菌均具有抗菌活性,峰液F1、F2和F3对金黄色葡萄球菌具有抗菌活性,仅峰液F1对白色念珠菌具有抗菌活性。  相似文献   

大片吸虫磷酸丙糖异构酶基因的克隆表达和免疫原性分析     

姚文浩  吴兴隆  秦志博  李文豪  朱惠丽  王磊  胡建和  韩艳辉 《畜牧与兽医》2024,(1):39-45

磷酸丙糖异构酶(TPI)是生物体糖酵解的一种关键酶,对大片吸虫获取能量而赖以生存有着十分重要的作用。本试验根据肝片吸虫TPI (GenBank:KC164346.1)的基因序列,设计带有BamHⅠ和XhoⅠ作为酶切位点的引物,以大片吸虫的cDNA为模板,扩增大片吸虫磷酸丙糖异构酶(FgTPI)基因。结果：FgTPI基因开放阅读框为762 bp,编码253个氨基酸,理论等电点pI为8.07;构建的重组表达质粒FgTPI-pET-28a(+)成功在大肠杆菌中表达,重组蛋白的分子量约为32 kDa;重组蛋白免疫BALB/c小鼠,收取多克隆抗体,ELISA检测结果显示,rFgTPI能诱导较高的IgG抗体水平;用感染大片吸虫动物的血清检测重组蛋白的免疫原性,Western blot分析表明,重组蛋白rFgTPI具有良好的免疫原性;生物信息学预测显示,FgTPI主要以α螺旋和β折叠为主,β转角较少,有3个较长的无规则卷曲;通过α-磷酸甘油脱氢酶偶联法测定其活性,发现FgTPI酶促反应最佳pH值为7.5,最适温度为35℃。本试验结果为深入研究FgTPI的生物学功能、评价其作为抗大片吸虫病疫苗候选分子...  相似文献   

鸡内源性抗菌肽LEAP-2的生物信息学分析     

杭柏林  徐军  胡建和 《江苏农业科学》2018,(6)

为了解鸡内源性抗菌肽LEAP-2的基本信息,根据鸡LEAP-2的氨基酸序列,通过软件对鸡LEAP-2的生物信息学进行分析。结果表明,鸡LEAP-2由20种氨基酸构成,等电点为9.86,分子量为8 835.65 u,为不稳定的疏水蛋白,定位于细胞核内,有1个跨膜区和1个信号肽,有2个糖基化位点和8个磷酸化位点,二级结构由α螺旋、延伸链、β折叠和无规则卷曲组成,三级结构和功能结构域类似于人LEAP-2,存在多个抗原表位,根据系统进化树推测,鸡LEAP-2与日本鹌鹑LEAP-2进化关系最近。研究结果为鸡抗菌肽LEAP-2的深入研究提供了信息基础。  相似文献   

抗菌肽BSN-37的抑菌活性及其稳定性分析     

张炜  杭柏林  司素锦  宁春妹  李杰  胡建和 《中国畜牧兽医》2019,46(1):287-295

试验旨在研究抗菌肽BSN-37的抑菌活性和稳定性。采用微量倍比稀释法测定抗菌肽BSN-37的最小抑菌浓度(MIC),菌落计数法分析抗菌肽BSN-37对大肠杆菌CVCC1568的杀菌动力学特征,扩散法测定抗菌肽BSN-37的盐离子稳定性、酸碱稳定性、血清稳定性、胰酶稳定性、热稳定性、反复冻融稳定性、室温保持稳定性、药效保持时间稳定性。结果显示,抗菌肽BSN-37对革兰氏阴性菌(大肠杆菌和沙门氏菌)的MIC为1.5625～25μg/mL,对革兰氏阳性菌(枯草芽孢杆菌和短小芽孢杆菌)的MIC为1.5625～12.5μg/mL,对真菌(白色念珠菌)没有活性;抗菌肽BSN-37可在90min内完全杀灭大肠杆菌CVCC1568;除了Fe2+和胰酶会影响抗菌肽BSN-37的抑菌活性外,在75～100℃的高温、150～250mmol/L高浓度盐离子(Na+、K+、Ca2+和Mg2+)、20%～25%饱和浓度的Cu2+、pH 4～10、20%～25%的血清、10～12次的反复冻融、10～12d室温保存等条件下仍能保持较好的抑菌活性,药效保持时间可达7.5d。本试验结果表明,抗菌肽BSN-37具有替代抗生素成为新抗菌药物的潜力,为抗菌肽BSN-37的临床应用提供了理论依据。  相似文献