外周血中CD4+、CD8+T、CD4+CD25+Treg在绵羊接种布鲁氏菌M5-90弱毒疫苗后的动态变化     

田振中  乔军  孟庆玲  王文敬  陈创夫  黎诚耀 《中国预防兽医学报》2013,35(6)

为研究绵羊接种布鲁氏菌弱毒M5-90株后外周血中CD4+、CD8+T、CD4+CD25+Treg细胞的动态变化规律,本研究选择11只健康绵羊,每10 d免疫一次,共免疫3次,分别在免疫前、免疫后10d、20 d、30 d利用流式细胞术检测外周血中CD4+、CD8+T、CD4+CD25+Treg淋巴细胞亚群.在免疫后的第20 d,CD4+T、CD8+T细胞百分含量达到最高水平(P＜0.05)后均缓慢下降;在第10d,CD4+CD25+Treg细胞缓慢升高,至20 d、30 d均显著升高(p＜0.05);在布鲁氏菌M5-90疫苗免疫应答过程中CD4+CD25+Treg细胞参与了机体的免疫反应调控,对CD4+T、CD8+T淋巴细胞的比例进行调节,并且维持CD4+/CD8+比值稳定,起到平衡Th1/Th2细胞间反应的作用.  相似文献   

腐殖酸?高岭土?铜在多孔介质中的迁移及相互作用   总被引：1，自引：0，他引：1  

姜岩  韦新东  孟庆玲 《安徽农业科学》2016,44(33):63-65

[目的]控制重金属在地下水深处污染。[方法]采用静态吸附试验和动态模拟试验比较了腐殖酸和高岭土对铜的吸附及其在多孔介质中的迁移。[结果]铜的存在抑制了高岭土在多孔介质中的迁移,高岭土胶体在多孔介质中沉积量增大,导致高岭土对铜的迁移促进作用不明显,腐殖酸降低了胶体沉积的同时促进了铜的迁移,在动态迁移过程中腐殖酸和高岭土对铜产生了竞争吸附,同时高岭土占据了腐殖酸在石英砂上的吸附点位,促进了腐殖酸的迁移。[结论]减少地下水中腐殖酸含量可以降低重金属在地下水深处的富集。  相似文献   

杨树伐根萌条更新技术研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

李爱萍  王挺  张雅琪  张玉伟  孟庆玲  周维维 《宁夏农林科技》2008,(4):16-16

经过3年的试验表明,速生杨伐根时间以3～4月初为宜,伐桩高度以5～10cm为宜,并对伐桩进行覆膜处理,可以获得较好的萌芽更新效果。  相似文献   

新疆塔城地区马梨形虫感染的分子生物学诊断及分析          下载免费PDF全文

于伟伟  孟庆玲  乔军  潘多荣  才学鹏  陈创夫 《家畜生态学报》2017,38(8):66-69

采用常规血涂片镜检和PCR技术对新疆塔城地区疑似梨形虫感染的病马进行检测。通过18S rRNA基因通用引物扩增出目的基因,克隆测序后,与GenBank公布的梨形虫18S rDNA参考序列对比分析同源性,并构建系统进化树,确定梨形虫的种属。血涂片鉴定结果显示,红细胞中发现圆环形虫体,具有马梨形虫的主要特征。分子生物学鉴定发现,18S rDNA序列与马泰勒虫美国分离株核苷酸序列同源性为98.3%;遗传进化分析发现,该虫株与已知的泰勒属在同一大枝上,与马泰勒虫美国分离株、马泰勒虫西班牙分离株有较近的亲缘关系。  相似文献   

细粒棘球蚴TP_x蛋白的分子特征与反应原性     

陈英  乔军  孟庆玲  刘田莉  钟文强  贡莎莎  王熙凤  黄运福  才学鹏 《贵州农业科学》2018,(1)

为明确绵羊细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)硫氧还蛋白过氧化物酶(Thioredoxin peroxidase,TP_x)蛋白的反应原性,并进一步利用Eg TP_x重组蛋白作为Eg感染诊断中的候选标识分子奠定基础,根据GenBank中Eg TP_x基因的cDNA序列设计特异性引物,以Eg头节为总RNA模板,进行RTPCR扩增,将PCR产物克隆到pMD19-T载体,经测序验证后亚克隆至表达载体pET-32a中,将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG进行诱导表达,并对表达的重组蛋白进行纯化及反应原性分析。结果表明:Eg TP_x cDNA全长为582个核苷酸,编码193个氨基酸。该多肽含有1个N端糖基化位点,1个N端酰基化位点,5个酪蛋白激酶Ⅱ(CKⅡ)磷酸化位点,4个蛋白激酶C(PKC)磷酸化位点;抗原表位区集中在58~94位和160~188位。重组菌可表达分子量为37ku的重组蛋白,重组蛋白Eg TP_x抗原能与Eg阳性血清发生特异性反应,具有良好的反应原性。  相似文献   

细粒棘球蚴Eg HSP20蛋白基因的分子特征、表达及其反应原性研究     

陈英  乔军  孟庆玲  钟文强  刘田莉  贡莎莎  王熙凤  黄运福  才学鹏 《西南农业学报》2018,(7)

【目的】本文构建细粒棘球蚴(Echinococcus granulosus,Eg)HSP20基因的重组表达载体并表达、纯化重组蛋白,研究其反应原性。【方法】根据Gen Bank中Eg HSP20蛋白基因c DNA序列设计特异性引物,以细粒棘球蚴Eg头节总RNA为模板,进行RTPCR扩增,将PCR产物克隆至p MD19-T载体,测序验证后,将Eg HSP20抗原基因亚克隆至表达载体p ET-32a中,再将其转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞内,用IPTG进行诱导表达,并对表达的蛋白进行纯化及反应原性分析。【结果】Eg HSP20 c DNA全长945个核苷酸,编码314个氨基酸。该多肽含有1个N端糖基化位点,1个CAMP磷酸化位点,5个PKC磷酸化位点,10个CKⅡ磷酸化位点;抗原表位区集中在39~53位和120~168位。SDS-PAGE检测显示,重组菌可表达分子量为51 k Da的重组蛋白;Western blot结果显示,表达的重组蛋白Eg HSP20抗原能与Eg阳性血清发生特异性反应。【结论】证实Eg HSP20蛋白具有较强的反应原性,为进一步利用Eg HSP20重组蛋白作为Eg感染诊断中候选标识分子奠定了前期基础。  相似文献   

非洲猪瘟病毒p30-54融合蛋白基因的构建、表达及其多克隆抗体制备     

李杰  张星星  郭晶  孟庆玲  乔军  张国武  王晓婷  李妍  才学鹏 《河南农业科学》2018,(9)

为了制备反应原性良好的非洲猪瘟病毒(ASFV)血清学诊断抗原,根据ASFV p30和p54基因序列,通过大肠杆菌密码子优化后分别体外合成全长的p30和p54基因,利用重叠延伸PCR(SOE-PCR)将2个基因片段串联,构建p30-54融合基因。将构建的融合基因片段克隆入p ET-28a(+)表达载体中,构建原核表达载体p ET-p30-54,转化至E. coli BL21(DE3)感受态细胞中,用IPTG诱导表达,检测融合蛋白的反应原性,并制备抗该融合蛋白的多克隆抗体。SDS-PAGE检测结果显示,表达的p30-54融合蛋白分子质量为47. 1 ku; Western blot分析显示,该融合蛋白可被ASFV阳性血清特异性识别,表明其具有良好的反应原性。将p30-54融合蛋白用Ni-NTA亲和层析柱纯化后免疫小鼠,成功制备了抗ASFV p30-54融合蛋白多克隆抗体。  相似文献   

少孢节丛孢菌XJ-A1几丁质酶AO-483基因的克隆及生物学活性     

贡莎莎  孟庆玲  乔军  钟文强  黄运福  张国武  陈英  才学鹏 《浙江农业学报》2019,31(2):222

为弄清少孢节丛孢菌几丁质酶的生物学功能,对少孢节丛孢菌XJ-A1几丁质酶AO-483基因进行克隆及分子特征分析,并在大肠埃希菌中进行诱导表达;采用DNS还原糖法检测经镍柱纯化的重组几丁质酶活性,将其作用于秀丽隐杆线虫幼虫,分析其生物活性。结果显示,AO-483基因编码309个氨基酸,与少孢节丛孢菌标准株(ATCC 24927)的几丁质酶AO-483基因序列的同源性为96.88%,氨基酸序列同源性为97.73%;AO-483含有1个Glyco-hydro-18结构域,位于20~297位氨基酸,属于糖苷水解酶18家族,还含有特征序列GMLGG和LDGLDLDVE;三级结构为典型的三磷酸异构酶桶形结构。SDS-PAGE分析结果表明,重组蛋白AO-483分子质量约为52 ku,与预测大小一致;Western blot分析证实,该重组蛋白能与小鼠抗少孢节丛孢菌多克隆血清抗体发生特异性反应。经DNS还原糖法检测,该重组几丁质酶活性为223.31 U·mL^-1;重组几丁质酶对秀丽隐杆线虫Ⅰ期和Ⅳ期幼虫有较强的降解活性。  相似文献   

宁夏中卫地区速生杨腐烂病的发生及防治研究     

周维维  孟庆玲  朱全明  张雅琪  张玉伟  孙小华  李爱萍 《农业科学研究》2008,29(4)

对宁夏中卫地区速生杨腐烂病的发生与防治进行调查和研究.结果表明:速生杨腐烂病发病高峰期在5—6月,发病率为47.1%,病情指数为28.4%;40%护树宝80倍液对腐烂病的防治效果最好,其防效高达75%以上;其次是死腐康(14%硫酸四氨络合铜水剂)原液、40%福美胂50倍液;物理措施以刮皮法和纵割法效果明显;药剂防治结合卫生伐、修剪病枝、清理林地防治效果更佳.  相似文献   

仔猪副伤寒的诊治     

陶大勇  孟庆玲 《塔里木大学学报》1999,(3)

仔猪副伤寒又叫沙门氏杆菌病,本病是由G-的猪霍乱沙门氏菌和猪伤寒沙门氏菌引起的以下痢为主要症状的传染病,多发生于6月龄以内的断奶小猪。当外界环境不良,饲养管理不当,断奶过早、寒冷潮湿、气候突变等,使猪的抵抗力降低,平时存在于健康猪体内的沙门氏杆菌乘机繁殖、毒力增强而导致小猪自体感染致病。1998年4月,阿拉尔市某猪场爆发了一种以低烧、腹泻为主要特征的传染病,我们根据流行病学、临床特征、病理剖检和实验室检验,诊断为仔猪副伤寒。现报告如下：1流行病学4月份,我区气候变化反常,昼夜温差较大。初期只有少数猪只零…  相似文献