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为了建立快速检测猪胸膜肺炎放线杆菌(Actinobacillus pleuropeumoniae)抗体的间接ELISA方法,将质粒pET-rApxⅡ转化至BL21,IPTG诱导表达毒素rApxⅡ融合蛋白,经亲和层析纯化后的蛋白作为检测抗原.对ELISA各检测条件进行优化,结果显示,抗原最适包被浓度为10 μg/mL,血清最佳稀释度为1:80.用建立的ELISA方法对猪链球菌、多杀性巴氏杆菌、猪副嗜血杆菌、大肠杆菌阳性血清进行检测,均无交叉反应.利用建立的ELISA方法从172份临床血清样本中检测出84份阳性血清样本,而利用Cps-ELISA试剂盒检测到74份阳性样品,本方法检测总符合率达83％. 相似文献
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猪皮肤病是由多种原因导致猪表皮及其附属器官的疾病。在开展技术服务和现场诊断的时候,笔者都会对猪的皮肤情况以及受损情况进行研究,为判断提供依据。主要是注意病猪的皮肤损伤和变化,根据临床的不同表现来进行诊断,一般病猪的皮肤表现比较多,有些是局部的变化,在耳部等处出现,有些是全身性症状变化,如水疱、斑点等,这些多是因为病毒导致的,有的病猪呈一过性变化,有些猪患病后无法进行治疗。所以,对现场的病猪进行诊断,了解病猪皮肤的状况,对其进行准确地评估,为病猪的病史进行调查和研究,以此来制定治疗方案。 相似文献
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为分析RBM4基因在新西兰兔不同组织的表达差异情况,本研究根据GenBank中公布的穴兔RBM4基因序列设计了特异性引物,从兔肾脏中扩增出RBM4基因并进行了生物信息学分析,同时采用实时荧光定量PCR技术研究了RBM4基因在新西兰兔各组织中的表达差异.结果表明,扩增出的新西兰兔RBM4基因长度为1080 bp,编码359个氨基酸.序列比对结果显示,新西兰兔与穴兔、牛、鼠、人、鲑鱼等动物RBM4基因的核苷酸一致性为44.1％～99.8％.进化树分析结果表明,新西兰兔RBM4基因与其他哺乳动物RBM4基因亲缘关系较近.实时荧光定量PCR结果显示,RBM4基因在新西兰兔的心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和脑中均有表达,其中在肾脏中表达量最高,在脑中表达量最低.本研究成功克隆了新西兰兔RBM4基因,并研究了其mRNA在兔各组织中的表达情况,为研究兔RBM4基因的表达及其生物学功能奠定了基础. 相似文献
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利用空间统计分析方法对中国1950年~1999年50年的年平均和季平均气温格点数据进行空间自相关分析,发现中国气温分布存在明显的空间集聚现象。结果表明,中国气温分布在空间上存在两个低温集聚区和一个高温集聚区,分别为东北低温集聚区、青藏高原低温集聚区和东南部近海高温集聚区,其余地区为介于高温集聚和低温集聚区之间的过渡区;而在春夏两季,塔里木盆地也形成一个高温集聚区。最后,本文对形成这种气温空间分布特征的影响因素进行了分析探讨。期望本研究对气候区划研究提供有益参考。 相似文献
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为建立稳定表达层黏连蛋白受体(LamR)RK13细胞系(RK13-LamR),并研究LamR蛋白在兔出血症病毒(RHDV)与宿主细胞结合中的作用,将完整的LamR序列通过同源重组克隆入慢病毒表达载体pLVX-m Cherry,并将该重组质粒pLVX-m Cherry-LamR与慢病毒包装质粒pLP1、pLP2、pLP/VSVG共转染293T细胞,在293T细胞中包装成含目的基因的重组慢病毒。将收获的重组病毒感染RK13细胞,经过嘌呤霉素筛选和细胞有限稀释法,筛选出表达LamR蛋白的RK13细胞。通过间接免疫荧光试验(IFA)和Western blotting证明所获细胞株能够稳定表达LamR蛋白,将细胞株命名为RK13-LamR。以纯化的RHDV接种RK13-LamR细胞,IFA检测结果显示,LamR蛋白能促进RHDV对RK13细胞的吸附。本研究建立了RHDV相对敏感的细胞株,证实在RHDV吸附宿主细胞的过程中,LamR蛋白起到一定的作用。 相似文献