沙拉沙星单克隆抗体制备及鉴定     

刘儒彪  胡骁飞  张改平  王慧  王方雨  刘璐  刘玺  邓瑞广  宋照军 《华北农学报》2016,(2):87-91

为制备敏感性好、亲和力高、特异性强的抗沙拉沙星(Sarafloxacin,SARA)单克隆抗体,采用碳二亚胺法合成SARA人工抗原,通过免疫BALB/c小鼠,选择血清效价高且敏感性好的小鼠,采用杂交瘤细胞技术进行细胞融合,筛选分泌抗SARA单克隆抗体(Monoclonal antibody,mAb)的杂交瘤细胞株;采用体内诱生腹水法制备SARA mAb,通过间接ELISA和间接竞争ELISA对SARA mAb的免疫学特性进行鉴定。结果表明:小鼠经免疫原免疫后,小鼠多抗血清效价均达到1∶128 000。选择敏感性较好的2号小鼠进行细胞融合,经多次亚克隆后,筛选出1G3、3H3两株杂交瘤细胞株,其中1G3所产SARA mAb效价较高,为1∶512 000,IC_(50)为6.34 ng/mL,亲和常数为8.55×10~8L/mol,与诺氟沙星的交叉反应率为1.06%,与其他药物交叉反应率均低于0.50%。  相似文献   

二氟沙星残留检测直接竞争ELISA试剂盒的研制及其性能测定   总被引：1，自引：0，他引：1  

李彬彬  邓瑞广  侯玉泽  张改平  赵东  刘庆堂  柴书军  王自良 《农业生物技术学报》2009,17(3):403-408

应用抗二氟沙星单克隆抗体（DIFmAb）杂交瘤细胞株建立直接竞争ELISA分析方法,研制出DIF残留快速检测试剂盒（DIF-Kit）并对其性能进行了测定。特异性试验结果表明与达氟沙星的交叉反应率为0.32％,与其它氟喹诺酮类药物和磺胺类药物无交叉反应,该方法对DIF的检测限可达到0.1µg/L,半数抑制浓度IC50为2.2µg/L,线性范围0.1～128µg/L, 平均批内和批间变异系数小于<15%。对牛奶、鸡肉分别添加0.4、2.0、10.0、50.0µg/LDIF标准品,平均回收率分别为89.3%和83.9%。DIF-Kit性能稳定,在4℃可保存6个月。DIF-Kit准确度高、重复性好、特异性强,适用于DIF残留快速检测的推广应用。  相似文献   

三聚氰胺的毒害作用及其残留检测     

职爱民  邓瑞广  刘庆堂  张改平 《中国饲料》2009,(2)

三聚氰胺是塑料工业中一种重要的有机化工中间产品,本文就三聚氰胺的理化特性、代谢机理、毒害作用以及残留检测方法等进行简要阐述.  相似文献   

三棵针提取物在畜禽生产中的应用     

胡骁飞  邓瑞广  张改平  魏凤仙 《中国饲料》2009,(12)

本文对三棵针提取物改善畜禽生长性能、提高机体免疫力、提高抗氧化能力、改善脂类代谢等作用进行综述.  相似文献   

兽药残留的免疫学快速检测技术概述   总被引：2，自引：1，他引：1  

张改平  职爱民  邓瑞广  杨艳艳  邢光旭  杨继飞  刘庆堂 《河南农业科学》2009,(9)

简要阐释了免疫学快速检测技术在兽药残留检测中的应用,并对此领域中的研究进展进行了简单介绍。  相似文献   

动物疫病免疫试纸快速检测技术概述   总被引：4，自引：2，他引：2  

张改平  郭军庆  李青梅  邓瑞广  杨艳艳 《河南农业科学》2009,(9)

概述了免疫试纸检测技术的原理,并分别从抗原和抗体2个方面简述免疫试纸检测技术的应用及在此方面取得的成就。  相似文献   

基于免疫层析试纸的猪O型FMDV抗体水平监测     

卢清侠  杨继飞  金前跃  杨苏珍  柴书军  万博  郝慧芳  张改平 《河南农业大学学报》2011,45(5)

为了应用免疫层析试纸评价猪口蹄疫O型合成肽疫苗的免疫效果,对50头试验仔猪进行免疫注射,并在首次免疫后28 d及2次免疫后20 d采血,通过试纸定量测定结果来监测试验猪抗体水平变化,同时对比猪口蹄疫病毒VP1结构蛋白抗体酶联免疫吸附试验诊断试剂盒的检测结果.结果表明,猪口蹄疫O型合成肽疫苗能快速诱导产生高水平的抗体,首次免疫抗体阳性率达88%,2次免疫抗体阳性率高达100%.试纸定量测定结果表明,2次免疫后猪群免疫抗体水平整体显著提升,并保持在较高水平.与ELISA试剂盒比较二者具有相同的敏感性和特异性,符合率为100%.  相似文献   

呋喃它酮代谢物AMOZ单克隆抗体的制备与免疫学特性鉴定   总被引：2，自引：1，他引：1  

范国英  张海棠  杨艳艳  邓瑞广  张改平 《西北农业学报》2011,20(6):38-42

用碳二亚胺(DCC)一步法将对醛基苯甲酸衍生物CPAMOZ偶联于牛血清白蛋白、卵清蛋白上,合成免疫原CNPAMOZ-BSA、包被原CNPAMOZ-OVA。用紫外线扫描、SDS-PAGE进行人工抗原合成的鉴定;免疫Balb/c小鼠,用杂交瘤技术建立分泌NPAMOZ mAb的细胞株;对NPAMOZ mAb的效价、敏感性和特异性进行鉴定。结果表明,CPAMOZ-BSA人工抗原分子结合比为15∶1;筛选出分泌NPAMOZ mAb的敏感特异的杂交瘤细胞1株2D11-B4,间接ELISA测定细胞培养上清,效价达到1∶(6.4×102),腹水效价为1∶(1.2×106),对NPAMOZ IC50为7.58μg/L,与其他抗生素交叉反应率低。本试验获得了抗NPAMOZ高价、敏感、特异的mAb,可用于呋喃它酮代谢物AMOZ的残留检测。  相似文献   

moFcγRⅢ、γ链真核表达载体的构建及其共转染稳定细胞系的建立     

席俊  唐志鹏  张利娜  宋爱宾  王少兵  张改平 《河南农业科学》2011,40(8):190-193

将moFeγRⅢ、γ链编码区eDNA分别亚克隆到真核表达栽体pcDNA3的巨细胞病毒启动子下游,构建了重组表达质粒pe3moRⅢ、pe3moγ;用PvuⅠ线性化重组质粒,以线性化重组质粒其转染COS -7细胞,用玫瑰花环试验检测moFeγRⅢ在转染细胞表面的表达,通过G418抗性筛选和单细胞克隆,在转染细胞表面稳定表达...  相似文献   

草甘膦人工抗原合成及鼠源多抗血清制备   总被引：3，自引：0，他引：3  

王晶  王耀  王方雨  胡骁飞  姚静静  邓瑞广  侯玉泽  张改平 《核农学报》2017,31(1)

为检测小分子农药草甘膦(PMG)的残留,本研究合成草甘膦[N-(Phosphonomethyl)glycine PMG]人工抗原,通过免疫制备高敏感性、特异性的鼠源PMG多克隆抗血清;采用EDC法将PMG分别与载体蛋白BSA和OVA偶联,合成免疫原PMG-BSA和包被原PMG-OVA;经紫外扫描、SDS-PAGE电泳、质谱鉴定后,免疫BALB/c小鼠,制备多抗血清;利用间接ELISA法测定多抗血清效价,竞争ELISA测定多抗血清的敏感性和特异性。结果表明,所合成的免疫抗原效果较好,免疫的4只小鼠效价均达1∶104以上,4号小鼠的多抗血清敏感性最高,半数抑制浓度IC50为31.4μg·m L-1,与其他有机磷类农药无交叉反应,具备良好的特异性。本试验成功合成了PMG人工抗原,并制得了敏感性高、特异性好的鼠源多抗血清,为PMG单克隆抗体制备及其免疫学快速检测方法的建立奠定了基础。  相似文献