环丙沙星完全抗原的制备和间接竞争ELISA检测方法的初步研究     

刘庆堂  张改平  柴书军  藤蔓  赵银丽 《黑龙江畜牧兽医》2011,(2):11-13

为了研究检测环丙沙星(CIP)残留的间接竞争ELISA方法,试验采用1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳化二亚胺盐酸盐(EDC)一步法将环丙沙星分别与牛血清白蛋白(BSA)和鸡卵清白蛋白(OVA)偶联制备免疫原(CIP-BSA)和包被原(CIP-OVA),用免疫原免疫Balb/c小鼠制备血清多克隆抗体(CIP pAb...  相似文献   

乏情期青年绵羊的诱导发情试验     

林文忠  刘庆堂 《畜牧兽医杂志》1990,(2):11-13

  相似文献   

磺胺间甲氧嘧啶全抗原的制备研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

张改平  职爱民  瞿明仁  王自良  王选年  李青梅  邢广旭  杨继飞  柴书军  刘庆堂  石团员  宋志超 《河南农业科学》2006,(3):96-100

采用重氮化法，将半抗原磺胺间甲氧嘧啶（SMM）与载体牛血清白蛋白（BSA）和卵清白蛋白（OVA）偶联，制得磺胺间甲氧嘧啶全抗原SMM—BSA和SMM—OVA。通过其紫外扫描光谱、SDS—PAGE凝胶电泳试验，表明半抗原和载体成功偶联，免疫动物以后可以产生满意效价。这另进一步制备抗SMM抗体提供了良好的免疫原。  相似文献   

青山羊选育简报     

刘庆堂 《畜牧与兽医》1983,(1)

<正> 青山羊是经劳动人民长期选育而成的一个优良羔皮羊种,具有耐粗饲、抗病力强、性温顺、成熟早、繁殖力高等优点,尤其所产青猾皮,具有天然美观的波浪形花纹而著称于世。现将我选育青山羊的情况报告如下: 一、选育方法1.选择喂养种公羊户:在调查了解全社养羊情况的  相似文献   

抗恩诺沙星单克隆抗体杂交瘤细胞株的筛选及竞争ELISA试剂盒的研制   总被引：1，自引：1，他引：0  

赵银丽  王建华  王自良  滕蔓  刘庆堂  邓瑞广  范国英  张改平 《核农学报》2008,22(6):898-903

利用合成的完全抗原(BSA-ENR)免疫小鼠,通过细胞融合技术和间接竞争ELISA筛选出了能分泌恩诺沙星单克隆抗体的杂交瘤细胞株,以此为基础研制恩诺沙星残留检测的竞争ELISA试剂盒(competitive ELISA ENR-Kit),并测定其性能。结果表明:筛选出的2株杂交瘤细胞,单抗亚类均为IgG1型,其中4G1-B3株的ENR mAb间接ELISA效价为1:1.024×106,亲和常数(Ka)为9×1010L/mol;竞争ELISA试剂盒的线性检测范围为0.05~101.6μg/L、灵敏度0.05μg/L、半数抑制浓度(IC50)1.1μg/L,与其他化合物的交叉反应率(CR%)均小于0.01%,鸡肉样、鸡肝样、鱼肉样和牛奶样的平均添加回收率分别为81.5%8、7.6%、84.3%和95%,不同基质添加恩诺沙星标准品做竞争ELISA对ENR-Kit检测结果影响小,试剂盒保存期6个月以上。结果说明该竞争ELISA试剂盒具有快速、敏感、特异、简便等特点,适用于ENR残留的快速检测。  相似文献   

二氟沙星残留检测直接竞争ELISA试剂盒的研制及其性能测定   总被引：1，自引：0，他引：1  

李彬彬  邓瑞广  侯玉泽  张改平  赵东  刘庆堂  柴书军  王自良 《农业生物技术学报》2009,17(3):403-408

应用抗二氟沙星单克隆抗体（DIFmAb）杂交瘤细胞株建立直接竞争ELISA分析方法,研制出DIF残留快速检测试剂盒（DIF-Kit）并对其性能进行了测定。特异性试验结果表明与达氟沙星的交叉反应率为0.32％,与其它氟喹诺酮类药物和磺胺类药物无交叉反应,该方法对DIF的检测限可达到0.1µg/L,半数抑制浓度IC50为2.2µg/L,线性范围0.1～128µg/L, 平均批内和批间变异系数小于<15%。对牛奶、鸡肉分别添加0.4、2.0、10.0、50.0µg/LDIF标准品,平均回收率分别为89.3%和83.9%。DIF-Kit性能稳定,在4℃可保存6个月。DIF-Kit准确度高、重复性好、特异性强,适用于DIF残留快速检测的推广应用。  相似文献   

三聚氰胺的毒害作用及其残留检测     

职爱民  邓瑞广  刘庆堂  张改平 《中国饲料》2009,(2)

三聚氰胺是塑料工业中一种重要的有机化工中间产品,本文就三聚氰胺的理化特性、代谢机理、毒害作用以及残留检测方法等进行简要阐述.  相似文献   

兽药残留的免疫学快速检测技术概述   总被引：2，自引：1，他引：1  

张改平  职爱民  邓瑞广  杨艳艳  邢光旭  杨继飞  刘庆堂 《河南农业科学》2009,(9)

简要阐释了免疫学快速检测技术在兽药残留检测中的应用,并对此领域中的研究进展进行了简单介绍。  相似文献   

真菌毒素(mycotoxin)ELISA检测方法新进展   总被引：4，自引：0，他引：4  

胡骁飞  职爱民  刘庆堂  王磊  孙亚宁  邓瑞广  张改平 《中国农学通报》2010,26(8):100-103

真菌毒素对人类及动物危害严重。人们建立了各种毒素检测方法,酶联免疫吸附试验(ELISA)其中的一种。本文对ELISA结合胶体金标技术检测霉菌毒素,以及与应用噬菌体展示技术产生的毒素模拟表位肽结合检测毒素的优点进行了综述。  相似文献   

特布他林杂交瘤细胞株的建立及其单克隆抗体制备与鉴定     

杨艳艳  职爱民  刘庆堂  李靓  李青梅  柴书军  胡骁飞  邓瑞广  张改平 《核农学报》2012,26(2):335-339

分别通过1,4丁二醚法和EDC法将特布他林偶联于载体蛋白BSA和OVA上,用BSA-TBL免疫BALB/c小鼠,经过3次免疫后,OVA-TBL包被后用间接ELISA和阻断ELISA选择细胞融合备用鼠,选择高效价、高敏感性和高特异性的小鼠进行抗原进行冲击免疫;无菌手术取其脾细胞与骨髓瘤细胞融合建立分泌TBL单克隆抗体的杂交瘤细胞株;采用体内诱生腹水法制备TBL mAb,并对TBL mAb的效价、敏感性和特异性等免疫学特性进行鉴定。结果显示,免疫的6只小鼠血清抗体效价均达到10-4;融合后筛选出4C08-G5和3H3-A02共2株敏感特异的杂交瘤细胞,其细胞培养上清液效价分别为1∶800和1∶1600,腹水效价分别为1∶2.56×105和1∶1.02×106;4C08-G5株分泌的抗体对TBL的IC50为5.25ng/ml,与瘦肉精、莱克多巴胺等其他β2激动剂交叉反应性小于3%。本试验获得了抗TBL mAb,为TBL残留免疫检测方法的建立奠定了坚实的基础。  相似文献