可视化LAMP快速检测猪伪狂犬病毒   总被引：3，自引：1，他引：2  

王树芬  王德国  薛白  李学伍  赵东  张改平 《河南农业科学》2012,41(6):140-143

为快速检测猪伪狂犬病毒(PRV),利用PRV DBP基因上的一段序列设计并合成3对LAMP引物,采用一种新的荧光染料——罗丹明B衍生物作指示剂,该指示剂在反应前加到反应缓冲液里,通过优化反应条件,建立了可视化LAMP快速检测PRV的方法。结果表明,63℃下恒温反应40min可得到肉眼可视结果,颜色变成蓝色判定为阳性,仍然保持紫色判定为阴性,可视化LAMP结果与电泳结果一致。建立的可视化LAMP方法可以快速、直观、准确地检测PRV。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征病毒nsp7蛋白的表达与纯化   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘永晖  张改平  乔松林  刘明阳  蒋志政  王蕊  万博  鲍登克  王爱萍 《河南农业科学》2012,41(5):141-144

为了解nsp7重组蛋白的免疫学活性,采用RT-PCR的方法从猪繁殖与呼吸道综合症病毒(PRRSV)BJ-4毒株中扩增得到nsp7基因,将基因连接到pET-28a载体并转化至大肠杆菌BL21中进行诱导表达,利用Ni-NTA进行亲和纯化,通过SDS-PAGE和Western-blot对重组蛋白进行分析和鉴定,通过间接ELISA方法研究了重组蛋白的免疫学活性。结果表明,成功制备了nsp7重组蛋白,间接ELISA结果表明,重组蛋白具有良好的免疫活性,为建立nsp7特异性抗体的间接ELSIA检测方法及PRRS诊断试剂盒的研制奠定了基础。  相似文献   

盐酸金霉素人工抗原的合成及鼠源多抗血清的制备     

李靓  职爱民  李青梅  刘庆堂  侯玉泽  胡骁飞  邓瑞广  张改平 《河南农业科学》2012,41(7):138-141

采用碳二亚胺法将金霉素(chlortetracyline,CTC)偶联到载体蛋白BSA(牛血清白蛋白)和OVA(鸡卵清蛋白)上,形成免疫原BSA-CTC与包被原OVA-CTC。通过紫外分光光度法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法进行抗原鉴定,用间接ELISA测定多抗血清(pAb)效价,阻断ELISA鉴定其敏感性。结果表明,在UV下出现了明显特征峰,BSA-CTC的峰与BSA、CTC相比均发生改变,表明半抗原与载体成功偶联。共免疫了5只小鼠,pAb效价均达到1×10-3,其中3号小鼠多抗血清抑制效价最低,IC50(半数抑制质量浓度)为71.47ng/mL。由此得出,获得了高效价、强特异的盐酸金霉素多抗血清,为盐酸金霉素单抗的制备奠定了基础。  相似文献   

盐酸克伦特罗单抗快速检测试剂盒的研制   总被引：16，自引：0，他引：16  

王选年  杨艳艳  邢广旭  李青梅  杨继飞  柴书军  赵东  康晓笛  潘耀谦  张改平 《中国兽医学报》2004,24(1):75-78

以竞争性酶免疫分析原理为基础 ,应用特异性克伦特罗 (Clenbuterol,CL )单克隆抗体研制成功了β-肾上腺素受体激动剂克伦特罗的快速检测 EL ISA试剂盒 (CL- Kit)。 CL- Kit线性检测范围为 0 .5～ 12 8μg/ L,各标准品的吸光值变异系数为 2 .3%～ 3.6 %。标准曲线呈典型的 S型 ,相关系数 R2 =0 .996 ,符合 4参数 L ogit曲线拟合。检测结果表明 :CL 单抗对 CL 的半数抑制量 IC50 为 7.94 μg/ L,对沙丁胺醇 (Sb)的 IC50 为 10 0 0 μg/ L,肾上腺素、去甲肾上腺素、异丙肾上腺素和来克多巴胺的 IC50 均≥ 6 4 0 0 μg/ L;CL- Kit与 Sb的交叉反应性为 0 .79% ,与异丙肾上腺素的交叉反应性为 0 .12 % ,与肾上腺素、去甲肾上腺素、来克多巴胺、各类抗生素及多种维生素均无交叉反应性。试剂盒测定回收率在 91%～ 10 5 % ,批内变异系数小于 2 0 % ,批间变异系数小于 10 %。试剂盒在保存期内稳定  相似文献   

庆大霉素人工抗原的合成与鉴定   总被引：3，自引：0，他引：3  

刘宣兵  张改平  侯玉泽  邓瑞广  赵东  李彬彬  柴书军 《黑龙江畜牧兽医》2008,(12)

庆大霉素（gentamicin,GM）属于氨基糖甙类抗生素,抗菌谱较广,对革兰阳性菌和革兰阴性菌都有作用,对革兰阴性菌作用强。在兽医临床和畜禽的养殖生产中,常用于治疗动物的消化道疾病和呼吸道疾病。随着庆大霉素在畜牧业中的应用越来越广泛,其在动物体内的残留问题也日益严重。研究旨在为GM残留免疫学检测方法的建立奠定基础。  相似文献   

豫西地区麦田野燕麦危害加重成因及防除对策   总被引：1，自引：0，他引：1  

常伟良  蔡战伟  张改平  聂义娜 《中国植保导刊》2007,27(11):32-33

野燕麦(Avena fatuaL.)是豫西地区麦田中常发性杂草。近年随着小麦种植面积扩大、轮作倒茬难度增加、中耕除草面积锐减和化学除草药剂不对路,发  相似文献   

磺胺间甲氧嘧啶单克隆抗体的制备     

职爱民  瞿明仁  李青梅  杨艳艳  王选年  王自良  石团员  张改平 《饲料工业》2006,27(8):51-53

磺胺间甲氧嘧啶(Sulfamonomethoxine,SMM)与牛血清白蛋白(BSA)偶联,制备完全抗原(BSA-SMM),并以BSA-SMM免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤技术将免疫鼠脾细胞与NSO细胞融合,建立分泌SMM单克隆抗体的杂交瘤细胞株。通过对杂交瘤细胞培养上清液的检测、鉴定,筛选出12株高亲和力的杂交瘤细胞株,其中4B9、1H10、2E9的腹水ELISA效价为1×10-7、5.1×10-6和1×10-7。该单克隆抗体可用于饲料和动物源性食品中磺胺间甲氧嘧啶残留检测的免疫学快速检测方法的建立。  相似文献   

不同日龄雏鸡消化道内乳杆菌自然分布状况研究   总被引：4，自引：0，他引：4  

王爱萍  张改平  张存信  蒋元生  李伟  刘振伟  李婉平 《中国兽医杂志》2001,37(6):16-17

家禽体内的正常菌群是微生物与宿主在共同历史进化过程中形成的相互依赖、相互制约的微生物生态系 ,它与家禽的营养、免疫、疫病等都有着非常密切的关系[1,2 ,3] ,乳杆菌是鸡机体内正常的重要优势种群之一 ,它对改善肠道内环境 ,维持家禽消化道内正常的微生态平衡 ,抑制病原菌的定居繁殖有着十分重要的意义 ,为了搞清雏鸡体内乳杆菌的自然分布情况 ,进而通过肠道微环境重组技术提高家禽的抗病力 ,我们对不同日龄 (3、7、1 6、2 5、39日龄 )雏鸡消化道的不同部位(嗉囊、十二指肠、小肠中段、盲肠 )的乳杆菌的分布及数量进行了研究 ,现将结果…  相似文献   

鸡传染性囊病的快速检测     

王自振  王亚宾  陈丽颖  徐超  李学伍  张改平 《养禽与禽病防治》2002,(6)

鸡传染性囊病（IBD）是一种严重危害鸡的免疫抑制性、高度接触性传染性疫病。该病的发病特点是发病率高，可达８０％～１００％；病程短，为“一过型”，典型的死亡曲线呈尖峰式；并可诱发或继发新城疫、马立克氏病、传染性支气管炎、禽流感、大肠杆菌病、沙门氏杆菌病、葡萄球菌病等。资料报道，本病也可导致鸡新城疫、马立克氏病等免疫失败。一、材料１．实验动物１日龄雏公鸡（购自河南农大畜牧站）。２．IBD试纸条河南农科院生物室惠赠。３．IBD种毒、高免蛋黄液均由河南农业大学兽医微生物教研室提供。４．病料法氏囊和脾：①人工…  相似文献   

猪旋毛虫病快速检测试纸研制成功     

李学伍  张改平  邓瑞广  肖治军  杨艳艳  李青梅 《养殖技术顾问》2004,(12):46

旋毛虫病是一种人畜共患的寄生虫病，其感染宿主众多，流行范围非常广泛，可感染人和150多种动物。旋毛虫感染猪和犬后几乎不表现任何临床症状，这给旋毛虫病的诊断和控制带来一定的困难。  相似文献