犬2型腺病毒SY株E1区、E3区的克隆与序列分析     

邱薇  夏咸柱  范泉水  扈荣良  王雷  高玉伟  张守峰 《中国预防兽医学报》2004,26(5):339-342

  相似文献   

大肠杆菌不耐热肠毒素对狂犬病病毒减毒疫苗株粘膜免疫效应的增强作用   总被引：4，自引：0，他引：4  

张茂林  刘红丽  余兴龙  涂长春  扈荣良  邹啸环  郭学军  殷震 《中国兽医学报》2004,24(1):39-42

将狂犬病病毒 SRV9减毒疫苗与大肠杆菌不耐热肠毒素 (L T)混合 ,分别经口腔滴入、灌胃、灌肠等途径免疫小鼠。通过检测外周血淋巴细胞特异性转化率、CTL反应、Ig G、Ig A、SIg A等免疫指标 ,并结合攻毒保护 ,探讨了狂犬病病毒经消化道不同途径接种产生的免疫效果以及 L T在粘膜免疫中的作用。结果表明 :肠道接种组的狂犬病病毒特异性免疫应答水平高于口腔和胃接种组的免疫应答水平 ,L T可增强狂犬病病毒减毒疫苗诱导的免疫应答反应  相似文献   

LacZ基因重组伪狂犬病病毒(Bartha株)的构建     

袁子国  张秀香  郝雪  李修明  高胜言  张守峰  刘烨  扈荣良 《黑龙江畜牧兽医》2008,(1):58-59

伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus, PRV)是一种极具开发潜力的疫苗载体.PRV基因背景清楚,遗传稳定性强;含有许多病毒复制的非必需基因,外源基因容量大(30 kb);具有广泛的宿主范围,可以感染猪、犬、牛、羊等多种家畜和野生动物.  相似文献   

重组伪狂犬病病毒rPRV／eGFP／rgp活疫苗免疫幼犬的最小免疫剂量及攻毒保护试验     

袁子国  张秀香  王晓虎  徐慧娟  张守峰  刘云方  扈荣良 《黑龙江畜牧兽医》2008,(8)

目前,研究发现已有多种外源基因在伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)中表达,这些外源基因主要是一些猪的传染病病原的抗原基因(猪瘟病毒的E1、E2和猪细小病毒)和筛选标记基因(β-半乳糖苷酶和绿色荧光蛋白等),而对于异种动物致病性抗原[如狂犬病病毒(RV)等]基因的研究尚未见报道.  相似文献   

1个改进的DNA分子量标准物——pT13/HindMarke     

张守峰  扈荣良  赵君 《中国兽医学报》2000,(6)

在对某些基因进行克隆操作的过程中已经发现 ,重组质粒 p T1和 p T2等量混合 ,经 Hind 酶切后的电泳条带分布均匀 ,比较适合作为质粒DNA酶切鉴定的分子量标准物 (Marker) ,并将其命名为 p T1 2 / Hind Marker[1] 。但是该Marker缺少 2 .0 kb左右、1 .0左右以及 0 .5kb以下的  相似文献   

1个新的DNA分子量标准物     

张守峰  邱薇  扈荣良  殷震 《中国兽医学报》2000,20(3)

在基因重组过程中 ,DNA酶切后各片段分子量大小的鉴定是最普遍的检测步图 1　 p T12 Hind 酶切结果1.λDNA/ Hind Marker;2 .DL150 0 0 Marker;3.p T12 / Hind 骤之一。目前 ,市购的 DNA分子量标准物 ( Marker)各有其优缺点 ,如 λDNA/Hind Marker分子量范围较大 ,但 4 3 61  相似文献   

狂犬病病毒8202株糖蛋白膜外区真核表达载体的构建及其在DK细胞中的表达   总被引：1，自引：1，他引：0  

袁子国  王晓虎  徐慧娟  张守峰  扈荣良  张秀香 《中国畜牧兽医》2011,38(6):60-63

为了研究狂犬病病毒(rabies virus,RV)糖蛋白(rgp)膜外区在以糖蛋白为免疫原的免疫应答中的作用,提取RV的RNA,通过RT-PCR扩增RV糖蛋白膜外区1375 bp的序列,将其克隆入pMD18-T载体中,经测序比对正确后,通过酶切将其亚克隆入pVAX1表达载体的多克隆酶切位点处,将酶切鉴定正确的阳性重组子命名为pVAX-rgp,构建表达狂犬病病毒糖蛋白膜外区的真核表达载体,在质脂体介导下转染DK细胞观察其表达情况。研究结果表明,经免疫荧光和Western blotting鉴定,有特异性荧光和60 ku条带产生,证明pVAX-rgp载体中的rgp可在DK细胞中表达。本研究通过成功构建狂犬病病毒8202株糖蛋白膜外区的真核表达载体,为下一步有关功能基因组的研究和基因疫苗的研制奠定了基础。  相似文献   

小鼠乳清酸蛋白上游调控序列的克隆及其指导下CAT基因在家兔乳腺中的表达     

杜卫华 赵君张守峰  任文陟扈荣良 《兽医大学学报》2003,23(3):268-271

应用PCR技术，从小鼠基因组中克隆了1．6kb乳清酸蛋白(WAP)基因5’上游调控序列，经酶切和测序证实与已知序列基本一致。为了证实此调控序列能否指导外源基因在乳腺中的表达，将此序列与报告基因CAT融合，构建了pWAP—CAT—polyA乳腺定位表达载体，脂质体包裹后，经乳导管将其注入到妊娠中后期家兔乳腺中进行暂时表达。分别于家兔分娩后1—10d采奶，用ELISA检测乳汁中CAT含量。结果表明，所构建的载体在家兔乳腺中能够表达，表达水平在家兔分娩后1—5d较高。  相似文献   

人β-干扰素转基因家兔的建立及特性的初步研究     

扈荣良  刘士英  殷震 《中国兽医学报》1992,(4)

采用显微注射技术,将人β- 干扰素重组基因注射到家兔受精卵雄前核内,共注射受精卵265枚,获仔兔35只.通过打点杂交及Southern杂交检测,2号(?)、6号(?)、9号(?)、11号(?)与~(32)P-α-dATP标记的β-干扰素探针呈现阳性杂交;采用细胞病变抑制法检测血清中的干扰素活性,其中2号兔β-干扰素效价较正常兔高1000U/mL,9号兔较正常高3000U/mL.该结果表明,整合于兔体内的人β干扰素基因于机体水平获得了有效表达.  相似文献   

犬瘟热病毒H、F、N基因试验免疫研究   总被引：6，自引：1，他引：6  

闫芳  夏咸柱  扈荣良  谢之景  赵忠鹏  高玉伟  黄耕 《畜牧兽医学报》2006,37(1):50-55

以构建的真核表达载体pVAXLPH、pVAXLPF和pVAXLPN为基因疫苗,分组进行了免疫小鼠试验,对免疫鼠体内免疫应答水平进行了检测。结果显示:所构建的基因疫苗可以诱导小鼠产生特异性免疫应答反应,pVAXLPH pVAXLPF pVAXLPN 3个基因混合免疫小鼠诱导产生了较强的体液免疫和细胞免疫应答,免疫3次后血清中抗CDV ELISA抗体效价为0.332,而免疫前为0.158;抗CDV中和抗体效价为1∶(4~16);CD4 T/CD8 T比值为2.05±0.38,而对照组为1.99±0.56;免疫小鼠脾细胞对CDVLP及ConA刺激的增殖反应值分别为0.384和0.356。基因疫苗免疫犬试验中,进行了单用基因疫苗免疫和基因疫苗与CDV弱毒疫苗联合免疫效果的比较研究。结果显示,基因疫苗免疫3次后,血清中抗CDV ELISA抗体效价为0.296,抗CDV中和抗体效价为1∶(8~32)。基因疫苗免疫2次,再使用弱毒疫苗加强免疫1次,血清中抗CDV ELISA抗体效价为0.433,抗CDV中和抗体效价为1∶(16~64)。  相似文献