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141.
实时定量PCR技术在弓形虫研究中的应用 总被引：1，自引：1，他引：0
实时定量PCR技术（real-time polymerase chain reaction/quantitative real time polymerase chain reaction,real-time PCR/qPCR）是在PCR反应体系中加入荧光基团,利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法;该技术具有特异性强、灵敏度高、定量准确和快速等优点,在生物医学领域中得到广泛的应用。笔者对实时定量PCR技术的原理和近几年新兴的荧光探针的原理和类型进行了论述,并对实时定量PCR技术在弓形虫基础生物学、诊断及检测、药物和疫苗研究中的应用进行了综述。 相似文献
142.
首次在猪体系统地研究了旋毛虫成虫可溶性抗原免疫猪、预防猪旋毛虫病的效果。将纯净成虫经超声粉碎后，10000r/min离心30min，取上清液即为成虫可溶性抗原。将抗原按不同剂量与等体积弗氏完全佐剂乳化后按不同程序经腹腔免疫猪，免疫后不同时间攻击感染不同数量的肌幼虫。结果表明，成虫可溶性抗原可诱导猪产生坚强的免疫力，0.5mg组最高减虫率达98.21%，接近全保护。免疫力高低与免疫剂量大小、免疫程序及攻击感染的肌幼虫数量多少有关。免疫可使次代肌幼虫的感染性降低，免疫血清在体外可杀伤肌幼虫。 相似文献
143.
针对编码猪蛔虫雌虫卵巢蛋白基因的EST序列设计了1对特异引物及连接T7启动子的引物，经PCR扩增，获得5’端连有T7启动子的双链DNA，在RNA聚合酶的作用下，转录合成dsRNA。通过浸泡的方式将dsRNA导入秀丽新杆线虫中，在浸泡后的5个不同的时间点，采用RT—PCR检测虫体浸泡后靶基因被干扰的效果。试验结果表明，在浸泡后的8～29h能检测到同源靶标的存在；而在浸泡后的43～57h不能检测到靶标RNA。另外，试验组没有观测到虫体明显的表型变化，而对照组在浸泡28h后，发现部分线虫体内有发育成形的虫卵。初步认为导入虫体的dsRNA发生了干扰效应。 相似文献
144.
145.
<正>食道口线虫病(Oesophagostomiasis)是由属于圆形目(Strongyloidea)的食道口属(Oesophagostomum)的多种线虫寄生于动物肠道所引起,因有些种的幼虫在肠壁内形成结节状病变,故有"结节虫"之称。食道口线虫通常只在反刍动物、猪和猴子中发现,但也有感染人的报道, 相似文献
146.
147.
弓形虫病是由刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)引起的一种呈世界性分布且严重危害人类健康的人兽共患寄生虫病.弓形虫是一种专性细胞内寄生原虫,能够感染包括几乎所有哺乳动物和一些鸟类.据不完全统计,全世界约有三分之一成年人感染弓形虫.绝大多数弓形虫感染呈隐性感染,不表现临床症状,但对于器官移植、恶性肿瘤及艾滋病等免疫抑制及免疫功能缺陷者,弓形虫是重要的致命因子之一.孕妇感染弓形虫、不仅容易导致流产、早产、死胎和胎儿畸形,而且可以通过垂直传播,导致胎儿或婴儿发育畸形、智力障碍、脑膜炎甚至死亡等临床症状,弓形虫感染被认为是导致畸官内感染综合症的首要病因[1]. 相似文献
148.
为鉴定猪蛔虫与感染相关的差异表达基因,本实验由猪蛔虫感染期幼虫差异消减cDNA文库中挑选EST序列(28A02)为研究对象,首先,经半定量RT-PCR方法分析该基因在各期虫体的表达情况。结果显示:该基因在猪蛔虫感染期幼虫和肺三期幼虫中均有表达,并且在感染期幼虫表达丰度最高,在其它各期虫体包括雌虫、雄虫、虫卵和第四期幼虫均未检测出该基因的表达。其次,以已知的EST序列为模板,采用RACE技术获得了864 bp的全长cDNA序列,包含一个完整的长约450 bp的开发阅读框。另外,经生物信息学分析显示,该基因编码的氨基酸序列与众多物种的ATP合酶有43%～47%的相似性,推测该基因可能参与编码猪蛔虫的线粒体ATP合酶,这为进一步研究其功能奠定了基础。 相似文献
149.
本研究提取犬源华支睾吸虫总RNA,应用RT-RCR技术扩增28 ku谷胱甘肽S-转移酶(Cs28GST)编码基因,PCR产物经T/A克隆后,亚克隆入pET一30a(+)原核表达载体,构建重组质粒pET-Cs28GST,转化大肠埃希茵BL21(DE3),异丙基-B-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达;表达产物经十二烷基磺酸钠.聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)、蛋白质印迹分析和鉴定,研究结果显示犬源Cs28GST编码区含有639个碱基,编码212个氨基酸残基,表达的蛋白以包涵体形式存在,大小约为30.6 ku,可被自然感染华支睾吸虫病犬的阳性血清识别,证明Cs28GST基因可在原核表达系统中高效表达并具有反应原性. 相似文献
150.
细粒棘球绦虫排泄分泌抗原研究──原头节排泄分泌抗原的反应原性朱兴全，窦兰清，史晓红，孙学勤，王晓华，牛炳亨（中国农业科学院兰州兽医研究所，甘肃７３００４６）笔者的初步研究已阐明，六钩蚴排泄分泌（ＥＳ）抗原具有较好的反应原性，纯化六钩蚴ＥＳ抗原可望能用... 相似文献