鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白FliC的原核表达及纯化     

王鹤  梁宏儒  胡旭  赵达  姜东君  尹辉  高佳滨  陈为宏  崔玉东  朱战波 《黑龙江八一农垦大学学报》2012,(5):50-54

对鼠伤寒沙门氏菌的鞭毛蛋白FliC的基因进行克隆、鉴定和原核表达,为鞭毛蛋白佐剂作用的研究奠定基础。以鼠伤寒沙门氏菌8014菌株基因组DNA为模板,PCR扩增Flic基因,产物与T载体连接,经测序鉴定正确后与表达载体pQE30(+)连接构建重组表达质粒Flic-pQE30,将此重组质粒转化入表达宿主E.coli XL1-Blue菌株内抽提质粒,酶切鉴定正确后对转化菌株以IPTG进行诱导后,表达产物经镍离子亲和层析柱纯化后,进行SDS-PAGE和Western blot分析。测序结果显示,FliC为完整的编码区基因1 485 bp,编码495个氨基酸残基,蛋白相对分子质量约为56 kDa。经SDS-PAGE分析表明,以37℃、1 mM的IPTG诱导5 h,表达效果最好,诱导产物是与理论值相符的56 kDa的融合蛋白。经western-blotting检测,表达的重组蛋白FliC可与小鼠抗鼠伤寒沙门氏菌全菌体多抗血清反应得到清晰的目的条带,表明表达的重组蛋白具有良好的反应原性。成功进行了鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白Flic基因的克隆表达,为进一步研究其免疫佐剂作用奠定了基础。  相似文献   

鹌鹑大肠杆菌病的诊断及防治     

朱战波  时国辉 《兽药与饲料添加剂》2000,5(6):31-32

鹌鹑大肠杆菌是由大肠杆菌引起的一种细菌性疾病。此病广泛存在，严重影响了鹌鹑养殖业的发展，给鹌鹑养殖业带来巨大的经济损失。因此，对鹌鹑大肠杆菌病的正确诊断与治疗有很大的经济意义。 2000年 3月鸡西某个体鹌鹑养殖场发生了以腹泻、出血性肠炎为主要特征的疾病，经综合诊断，确诊为大肠杆菌病，报告如下。 1发病情况 　　该场饲养鹌鹑已有 8年，采用笼养，每月进雏一批。现有大小鹌鹑 8000余只，雏鹑与成鹑在同一舍内饲养，不进行分舍饲养。每批成年鹌鹑淘汰后，不经过空舍即进新雏。整个饲养过程不进行任何免疫接种，平时选用痢特…  相似文献   

猪瘟病毒垂直感染的检测   总被引：2，自引：0，他引：2  

刘建柱  余丽芸  侯喜林  崔玉东  朱战波  朴范泽 《中国兽医杂志》2005,41(4):23-24

猪瘟是一种急性、高度接触性传染的一种重要传染病。近年来猪瘟流行的方式发生了改变，典型猪瘟逐渐减少，非典型猪瘟逐渐增多，表现怀孕母猪流产，产死胎、木乃伊和病弱的仔猪等，尤其是新生仔猪猪瘟，临床症状不十分明显，但发病率、病死率较高，严重危害养猪业的发展。关于新生仔猪猪瘟的发生，多认为是母猪怀孕期间感染猪瘟病毒而通过垂直传播的方式引起仔猪感染，但到目前为止未见有关新生仔猪垂直感染猪瘟病毒的直接证据。  相似文献   

RT-PCR与兔体交叉试验检测猪瘟病毒感染的相关性研究   总被引：7，自引：0，他引：7  

刘建柱崔玉东  邢华伟朱战波 朴范泽 《中国兽医科技》2003,33(11):16-21

对猪瘟RT-PCR诊断方法与兔体交叉试验诊断方法的相关性进行了研究。通过计算机软件设计了猪瘟病毒E2基因保守区的1对引物，建立了猪瘟病毒RT-PCR检测方法，同时应用兔体交叉试验进行对比，对7份临床送检病例进行了检测。结果表明，二者的符合率为100％，但RT-PCR可大大降低检测所用的时间，更便于猪瘟的快速诊断。  相似文献   

牛大肠杆菌灭活疫苗(K99、F41兼型)的研制与免疫研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

崔玉东  朱战波  侯喜林  余丽芸  杨玉英  朴范泽 《黑龙江八一农垦大学学报》2002,14(1):55-60

应用分离鉴定的兼有K99、F41菌毛抗原的产ST肠毒素的O142血清型大肠杆菌作菌种,制备出菌毛、全菌体和菌毛与菌体混合等3种灭活疫苗。疫苗物理性状良好,接种怀孕母牛产生良好的免疫反应,接种疫苗14 d后,抗体效价K99 为4.7～6log2, F41 为2.1～5.5 log2;28 d后K99 为6.5～8log2,F41 为2.6～6.5 log2。产犊后8～10 h,对犊牛口服攻毒800亿菌/mL O142大肠杆菌,结果3种疫苗均能使犊牛获得一定保护,保护率分别为89.1%、55.6%和94.6%,对照组为16.3%。菌毛苗和混合苗免疫效果均优于全菌体苗,K99免疫效果优于F41,两次免疫效果优于一次免疫。现地试验取得了良好的免疫效果,证明制备的油乳剂灭活疫苗安全, 免疫原性良好。  相似文献   

牛肠毒素性产气荚膜梭菌的分离及鉴定     

邵红  王铁林  王久星  王玉海  李冬野  杨秋峰  王术德  朱战波 《黑龙江八一农垦大学学报》2005,17(3):66-69

对黑龙江省3个地区牛场疫牛进行临床诊断，剖检结果为小肠出血性肠炎和心内外膜严重出血等症状，进行了细菌的分离培养、涂片镜检、生化试验和动物感染试验。结果表明：分离菌株均为革兰氏阳性粗短杆菌，严格厌氧，在血平板上具有双溶血环，能发酵葡萄糖、麦芽糖、蔗糖和暴酵牛乳，肠毒素检测试验阳性，厌气肉肝汤培养物0．2mL小白鼠尾静脉注射，2～10h可使其致死。试验结果表明3个分离株均为产气荚膜梭菌。  相似文献   

复合活菌制剂对断奶仔猪生长性能及血清溶菌酶含量的影响     

刘宇  朱战波  车车  谭磊  崔莉  张军  袭莹  李冬野  杨焕民  孙秀军  王玉海 《饲料与畜牧》2011,(7)

选择长白二元杂交断奶仔猪90头进行试验,断奶日龄为35d。共分为五个组,每组设3个重复,每个重复随机选取健康仔猪6头。试验1组:饲喂基础日粮+0.1%复合制剂(纳豆杆菌、双歧杆菌、罗伊氏乳杆菌);试验2组:饲喂基础日粮+0.1%复合制剂(纳豆杆菌、双歧杆菌、干酪乳杆菌);试验3组:饲喂基础日粮+0.1%复合制剂(纳豆杆菌、双歧杆菌、嗜酸乳杆菌);试验4组:饲喂基础日粮+0.1%复合制剂(纳豆杆菌、双歧杆菌、罗伊氏乳杆菌、干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌)。对照组饲喂基础日粮。其中复合制剂中益生菌活菌数为l09cfu/g。饲养30d后观察复合活菌制剂对断奶仔猪生长性能及血清溶菌酶含量的影响。结果:在日增重、饲料效率及血清溶菌酶方面,试验1组和2组显著高于对照组(P<0.05);在腹泻率方面,试验组均显著低于对照组(P<0.05)。研究表明,在仔猪日粮中添加复合活菌制剂可提高每头断奶仔猪平均日增重及饲料效率,降低腹泻的发病率,且增高了仔猪血清溶菌酶含量,提高了仔猪的免疫机能,从而提高了经济效益。  相似文献   

奶牛乳房炎4种主要病原菌PCR检测鉴定方法研究   总被引：2，自引：0，他引：2  

朱战波  孙冰  崔玉东  朴范泽  刘振华 《中国兽医杂志》2007,43(11):24-27

奶牛乳房炎是危害奶牛业的一种重要疾病,它不仅影响奶牛的产奶量,而且降低牛奶的品质,影响人体健康以及延长奶牛产后发情和妊娠时间。奶牛乳房炎的发生较复杂,物理性刺激、化学性刺激及饲养管理不善等均可作为诱发因素,使乳房感染致病性或条件致病性微生物,进而发生乳房炎[1]。据有关报道[2~5]和我们调查,引起奶牛乳房炎的主要病原菌有金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、停乳链球菌、大肠杆菌、乳房链球菌以及其他细菌、真菌、病毒、霉形体等百余种微生物,其中以金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、停乳链球菌和大肠杆菌最为常见。在临床上,由于奶牛乳…  相似文献   

猪瘟与链球菌混合感染的诊疗   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘建柱  杨忠福  侯喜林  朱战波  崔玉东  朴范泽 《四川畜牧兽医》2002,29(4):48-48

当前猪病混合感染或继发感染问题十分严重。由于它具有普遍性、复杂性、多因性和艰巨性等特点，因此给猪病的正确诊断和采取合理有效的防治措施带来了一定困难。猪瘟是一种热性、高度接触性传染病，仍是危害我国养猪业最重要的疫病之一。猪瘟的发生往往继发或混合感染一种或几种某些细菌性、病毒性和寄生虫性疾病，这种混合感染或继发感染的诊断和防治十分困难。笔者对某个体养猪户送检的两头病死猪进行了检查，根据临诊情况和实验室检查结果，确诊为猪瘟与链球菌混合感染。现报告如下：１流行病学及临床症状２００１年１１月１３日，收到密…  相似文献   

牛白细胞粘附缺陷病携带牛CD18的部分基因序列分析     

马金柱  崔玉东  王北艳  王龙祥  王凤强  田立志  朱战波  余丽芸 《中国兽医杂志》2006,42(9):13-14

牛白细胞粘附缺陷病（bovine leukocyte adhesion deficiency ,BLAD）是一种常染色体单基因隐性遗传疾病。目前虽已确定BLAD病因与人的白细胞粘附缺陷病（leukocyte adhesion deficiency, LAD），为白细胞表面的一种称为整合素CD18亚单位表达缺陷所致，但至今关于CD18基因突变情况研究较少。为了深入研究和探讨BLAD发病机制，本研究将在我国黑龙江省东部地区调查发现的6头BLAD携带牛CD18部分基因进行了克隆和序列比较分析。  相似文献