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【目的】拟通过腺病毒介导的超表达及siRNA干扰试验,分析lncFAM200B对牦牛肌内脂肪细胞脂质沉积的影响,为解析lncFAM200B对牦牛肌内脂肪细胞脂质沉积的调控机制奠定基础。【方法】采集牦牛背最长肌组织,采用酶消化法和差速贴壁法分离牦牛肌内前体脂肪细胞;构建包装lncFAM200B超表达腺病毒,设计合成其siRNA干扰序列;通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析lncFAM200B超表达与干扰后脂肪分化标志基因PPARγ、C/EBPα、AP2,lncFAM200B潜在靶基因SIRT1、PTEN的表达水平;采用油红O染色、甘油三酯(TAG)测定、CCK-8检测等方法检测细胞内脂滴沉积情况、甘油三酯含量变化及细胞增殖情况。【结果】从牦牛背最长肌成功分离获得肌内前体脂肪细胞;lncFAM200B超表达后,脂肪分化标志基因C/EBPα、AP2表达量显著升高(P<0.05),随着诱导分化时间的增加,lncFAM200B潜在靶基因SIRT1表达量呈先降低后升高的趋势,PTEN表达量呈现先增高后降低趋势;细胞脂滴沉积显著增加(P<0.05),且胞内形成较大脂滴;超表达4 d后,细胞内甘油三酯含量显著增加(P<0.05)。干扰lncFAM200B可显著降低脂肪分化标志基因PPARγ、C/EBPα、AP2的表达水平(P<0.05),降低细胞脂肪沉积,且诱导分化第6天细胞内甘油三酯含量显著降低(P<0.05);干扰lncFAM200B后其潜在靶基因SIRT1呈现先升高后降低的表达趋势,PTEN则相反。CCK-8增殖实验表明,lncFAM200B超表达72 h后,细胞增殖效率显著降低(P<0.05),而干扰lncFAM200B后72 h后细胞增殖效率显著增强(P<0.05)。【结论】lncFAM200B可能通过影响脂肪分化标志基因C/EBPα和AP2,脂肪合成相关基因SIRT1和PTEN的表达从而影响牦牛肌内脂肪沉积,但其具体机制还需要进一步研究。 相似文献
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文中首先基于条例总体、管理体制机制、湿地保护管理、湿地利用管理、湿地修复与生态补偿5个方面共72项指标构建完备程度指数,进一步结合22项严格程度附加指标建立严格程度指数,据此对我国已出台的省级湿地保护法规文本进行评估。结果表明:1)27部省级法规的完备程度指数和严格程度指数均值分别为0.645和0.614,完备程度指数居前3位的分别为江苏、宁夏、北京,严格程度指数前3位分别为江苏、黑龙江、宁夏;2)在单项指标方面,被各省级法规覆盖程度低于1/3的指标主要包括湿地保护目标责任制、上级政府对下级政府的监督、专家咨询与专家委员会、湿地利用一般性规定的违法法律责任、湿地占用分级规定、占补平衡相关指标、项目环境影响评价、受保护的野生动植物的保护管理、湿地修复技术要求、湿地修复责任主体区分等,这些是进一步完善省级湿地保护法规时需重点补充的内容。研究结果可为各省进一步完善湿地保护法规、健全湿地保护制度体系提供参考。 相似文献
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以盐城国家级珍禽自然保护区人工饲养的丹顶鹤为试验素材 ,以放射免疫测定法 ,对 3对配对成鹤繁殖季节血浆中生殖激素浓度的变化进行初步的测定分析。结果表明 :在产卵的前、中、后期 ,公鹤的促黄体生成素 (LH)、促卵泡素(FSH)、睾酮 (T)和母鹤的LH、FSH、雌二醇 (E2 )均表现出“低高低”的变化趋势 ,而母鹤的促乳素 (PRL)则表现为“低低高” ;在整个繁殖期 ,公鹤血浆中的LH和FSH浓度均高于母鹤。 相似文献
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本研究针对北京郊区汇源与正谷有机蔬菜基地,通过对不同蔬菜生产基地取样分析,研究有机和常规蔬菜生产条件下土壤养分平衡特征,分析有机生产蔬菜和土壤的15N特征。结果表明,(1)有机蔬菜生产与常规生产对比,由于施肥数量不同,汇源有机蔬菜基地土壤N、P及K盈余量(分别为356~472kg·hm-2、298kg·hm-2和200~226kg·hm-2)高于当地常规生产,而正谷有机蔬菜生产土壤N、P及K养分盈余量(分别为-164~190kg·hm-2、107.9~435.5kg·hm-2和-164.5~-136.8kg·hm-2)低于当地常规生产;(2)汇源有机蔬菜生产模式中,土壤N素养分有逐季累积的趋势,有机肥的N、P和K养分存在着不平衡性,这可能是造成0~20cm土层磷素大量累积的重要原因;(3)蔬菜类别不同,δ15N值不同,一般为叶菜类最高(10.49‰),果菜类次之(10.07‰),根菜类δ15N值最低(5.62‰);(4)植物不同部位δ15N值也有差异。针对圆椒的分析表明,圆椒叶δ15N(12.44‰)>圆椒果实δ15N(9.35‰);(5)土壤δ15N与土壤全N之间有一定的相关性,回归方程为δ15N土壤=13... 相似文献
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百合离体培养与植株再生体系的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
以香水百合鳞叶为外植体,探讨不同外源激素水平对其小鳞茎分化、增殖与不定根形成的影响。结果表明:以MS+6-BA 0.5~1.0mg/L+IAA 0.1~0.3mg/L培养基的不定芽分化、增殖效果好,分化率达78.5%以上,增殖系数达5.6以上;1/2MS+6-BA 0.1mg/L+IAA 0.5mg/L或1/2MS+6-BA 0.1mg/L+NAA 0.1~0.3mg/L或1/2MS+6-BA 0.1mg/L+IBA 0.8mg/L的生根效果好,生根率可达96.0%以上;在泥炭∶珍珠岩=1∶1的基质中驯苗,成活率可达96.3%。 相似文献
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