纽胞松弛素B(CB)对水牛卵母细胞玻璃化冷冻保存的影响     

卞桂华  陈自洪  杨娟  陆凤花  石德顺 《黑龙江畜牧兽医》2008,(7)

研究主要探讨冷冻前细胞松弛素B(CB)预处理水牛M Ⅱ期卵母细胞对其冷冻效果的影响.以水牛M Ⅱ期的卵母细胞为材料,通过玻璃毛细管(GMP)和玻璃化冷冻液EDS33(16.5%EG 16.5%DMSO Sucrose)对水牛M Ⅱ期的卵母细胞进行两步法玻璃化冷冻保存,即卵母细胞首先放入预平衡液(7.5%EG 7.5%DMSO Sucrose)中平衡3 min,然后再移入玻璃化冷冻液中30 s后装管直接投入液氮.冷冻前卵母细胞随机分为2组,一组用7.5μg/mL CB预处理30 min,另一组未用CB预处理作对照组,然后都冷冻保存.解冻是在蔗糖浓度逐渐降低的解冻液中进行的.解冻后存活的卵母细胞进行孤雌激活,以分裂率和囊胚发育率作为评定卵母细胞冷冻效果的指标.结果发现,GMP组和GMP CB组卵母细胞解冻后的存活率(88.89%、94.20%)和培养后发育到囊胚的比率(8.82%、14.55%)差异均不显著(P＞0.05),但GMP组和GMP CB组存活卵母细胞激活后的分裂率差异显著(32.69%、55.56%,P＜0.05),所以细胞松弛素B预处理可以提高GMP冷冻卵母细胞的发育能力.  相似文献   

NGF对牛体外受精和孤雌激活早期胚胎发育的影响   总被引：1，自引：0，他引：1  

易康乐  周虚  石德顺 《中国兽医学报》2008,28(5):588-591

在牛胚胎培养液中分别添加5、10、15、20μg/L神经生长因子（Nerve growth factor,NGF）,观察其对牛体外受精和孤雌激活胚胎体外发育的影响。结果显示：培养液中添加10μg/L NGF,可显著提高牛卵母细胞体外受精囊胚率（35.0%vs 50.0%,0.010.05）。结果表明,10μg/L NGF可促进牛体外受精和孤雌激活早期的胚胎发育。  相似文献   

水牛体细胞连续核移植的效果     

杨素芳  陈自洪  谢英  成俊萍  陆凤花  石德顺 《中国兽医学报》2008,28(11)

为探讨水牛体细胞连续核移植的效果,以水牛胎儿成纤维细胞为核供体,进行了水牛体细胞连续核移植。结果显示,连续核移植的融合率显著高于原代核移植(87.9%vs76.2%,P<0.05),但两者之间的分裂率和囊胚率没有显著差异(P>0.05);这说明水牛体细胞核移植胚胎可被再次克隆而不降低其发育能力,水牛体细胞连续核移植是可行的。  相似文献   

葡萄糖在牛体外受精及胚胎发育中的影响   总被引：4，自引：2，他引：2  

彭礼繁  罗光彬  李东全  陈自洪  石德顺 《中国草食动物》2008,28(5)

在牛精子获能液中添加不同浓度的葡萄糖,应用体外培养技术对牛精子体外获能及早期胚胎发育进行研究,通过观察顶体反应、超激活、活率和早期胚胎发育率,筛选出获能液中最适葡萄糖浓度及其有利于牛早期胚胎发育的最佳浓度.结果表明:葡萄糖是精子获能和维持超激活运动的主要能源物质,其代谢过程中产生的活性氧在牛精子体外获能、受精过程中起重要作用,高浓度(超过9.15 mM)葡萄糖有利于获能的完成;但是对早期胚胎发育不利,对早期胚胎发育来说其最适添加量为6.10 mM,此时的囊胚率最高.  相似文献   

兔精液冷冻保存的研究     

陈玉  石德顺  崔奎青  邹知明  潘红平  杨素芳 《黑龙江动物繁殖》2007,15(3):1-3

本试验采用不同的稀释液对兔精液进行冷冻保存,并比较了在稀释液中添加不同防冻剂以及平衡时间对兔精液冷冻保存效果的影响.结果表明:稀释液Ⅱ稀释的精液,解冻后,精子活率明显高于稀释液Ⅰ稀释的(P＜0.01),其复苏率显著高于后者(P＜0.05).以稀释液Ⅱ为基础液,添加不同浓度(27.3%,15%,12%,9%)的DMSO对兔精液冷冻保存,结果解冻后精子活率以15%及12%两组较好,其中添加15%的优于12%的,但差异不显著(P＞0.05).选择不同种类的防冻剂(7%甘油与15%DMSO)比较时,发现7%甘油组解冻后精子活率明显低于15%DMSO组,二者差异极显著(P＜0.01),其复苏率显著低于后者(P＜0.05).以15%DMSO作为防冻剂,采用不同的平衡时间在5 ℃平衡,结果发现平衡30 min和60 min的解冻后精子活率较好,但差异不显著(P＞0.05),而90 min和120 min的冷冻效果较差.  相似文献   

供体细胞低温冷藏处理对水牛体细胞核移植效果的影响     

陈自洪  杨素芳  罗婵  成俊萍  石德顺 《黑龙江畜牧兽医》2007,(1):38-39

自1997年《自然》杂志报道克隆羊“多莉”以来,多种哺乳动物的体细胞核移植相继取得了成功。然而,体细胞核移植的技术环节繁多,各种各样的因素影响着核移植的效果,核移植的效率仍然很低(牛,<5%)[1]。核移植效率的提高有赖于各个技术环节的完善,供体细胞的准备与处理是核移植中的一个关键环节,它直接影响到核移植的效果。低温冷藏供体细胞可以减少染色体变异的可能性,亦有利于重构胚的发育。研究探讨了水牛胎儿成纤维细胞经低温冷藏处理后对核移植效果的影响。1材料与方法1.1试剂及培养液的配制研究所用的试剂除TCM-199购自G ibco公司外,其…  相似文献   

水牛转录因子 c-Myc 克隆和表达研究     

邓彦飞  石德顺  刘庆友  邓海莹  罗婵  杨素芳 《中国畜牧杂志》2014,(7):14-18

  相似文献   

供体细胞种类及性别对猪体细胞核移植效果的影响     

黄雅琼  石德顺  陈旭健  李家洲  曾诗媛  詹萍  阮桂文  赵仕花 《中国畜牧杂志》2011,47(11)

本研究通过比较胎儿成纤维细胞、颗粒细胞、卵丘细胞和不同性别猪胎儿成纤维细胞的核移植效果,探讨供体细胞的种类及性别对猪体细胞核移植重构胚胎发育潜力的影响。结果表明:胎儿成纤维细胞的融合率(64.74%)高于颗粒细胞的融合率(51.05%)和卵丘细胞的融合率(56.89%),但3种细胞的卵裂率及囊胚率差异不显著(P>0.05);胎儿成纤维细胞、颗粒细胞和卵丘细胞均可作为供体细胞用于构建猪体细胞核移植的重构胚。雄性胎儿成纤维细胞核移植重构胚的融合率和分裂率与雌性胎儿成纤维细胞重构胚的融合率和分裂率相比差异不显著(P>0.05),但雄性胎儿成纤维细胞核移植重构胚的囊胚率显著低于雌性胎儿成纤维细胞核移植重构胚的囊胚率(P<0.05)。  相似文献   

广西三黄鸡胸腺、法氏囊中肥大细胞的异质性     

王晓丽  李波  黎江  周石琼  魏晓瑞  潘红平  石德顺 《江苏农业科学》2011,39(5)

应用常规甲苯胺蓝(RTB)、改良甲苯胺蓝(MTB)、醛品红-阿利新蓝(AF- AB)、阿利新蓝-高碘酸雪夫氏反应(AB - PAS)等组化染色法证实,在广西三黄鸡胸腺、腔上囊的实质中存在大量的肥大细胞,不同器官中的肥大细胞各有其分布特点,并且在形态大小、异染性、颗粒的黏多糖成分、染色特性等方面具有异质性,表明鸡胸腺和法氏囊中的肥大细胞可能存在不同的亚型.  相似文献   

不同保存方法对牛卵母细胞总RNA和cDNA品质的影响     

易康乐  李纯锦  陈露  孙燕玲  燕海峰  刘莹莹  石德顺  周虚 《家畜生态学报》2011,32(3):18-21

实时荧光定量RT-PCR是检测低丰度mRNA的敏感方法,也是精确定量RNA拷贝数的有效方法,它的出现使得在少量细胞中定量基因的表达量,在小量基因组中分析基因突变和等位基因缺失成为可能.为了使这种检测技术更加稳定可靠,就必须在检测步骤的每一环节做到精确无误,而总mRNA的提取质量就显得十分重要.研究选择了牛MⅡ期的卵母细...  相似文献