人工感染鸭病毒性肠炎急性病例细胞凋亡的电镜研究     

袁桂萍  程安春  汪铭书  周毅  刘菲  郭宇飞  韩晓英  廖永洪  徐超  周伟光  文明  贾仁勇  陈孝跃 《畜牧兽医学报》2005,36(11):1174-1177

应用透射电镜和超薄切片技术观察鸭病毒性肠炎病毒（Duck Enteritis Virus，DEV）CH强毒株人工感染成年鸭各组织器官的形态学特征。结果表明，脾脏、胸腺、法氏囊、十二指肠固有层中淋巴细胞除了坏死变化外还有很明显的凋亡变化，两者往往同时存在。疾病过程中，淋巴细胞凋亡数量明显增多。凋亡细胞的形态学改变是细胞体积缩小，细胞器结构正常，染色质初期浓集成团，聚集于核膜的周边，随后出现染色质凝聚，核碎裂以及凋亡小体形成等现象。淋巴细胞的坏死和凋亡共同造成了淋巴细胞的大量损耗，淋巴细胞的这种变化可能在鸭病毒性肠炎的发病机制中起着重要的作用。研究结果表明DEV急性感染可诱导成年鸭体内淋巴细胞的凋亡。  相似文献   

猪繁殖与呼吸综合征免疫学研究进展   总被引：10，自引：1，他引：10  

陈希文  尹苗  程安春 《养猪》2005,(1):29-32

猪繁殖与呼吸综合征是由猪繁殖与呼吸综合征病毒引起的高度传染性疾病，自发现首例病例以来，对猪繁殖与呼吸综合征已开展大量研究，现就此病的免疫学作一综述。  相似文献   

基因枪与肌肉注射猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗诱导小鼠体液及细胞免疫的比较研究   总被引：8，自引：2，他引：8  

陈希文  程安春  汪铭书  刘菲  希尼尼根  豆文波  刘伍梅  李雪梅  张平英 《畜牧兽医学报》2005,36(8):812-818

猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因疫苗（pcDNA—PRRSV—ORF5）以不同免疫途径（基因枪和肌肉注射）免疫BALB／c小鼠，以PBS和空载质粒pcDNA3．1（＋）为对照，采用流式细胞仪（FACS）、淋巴细胞增殖试验（MTT法）及间接ELISA试验分别对小鼠外周血中CD4^＋、CD8^＋T淋巴细胞数、T淋巴细胞的转化功能及小鼠血清中特异性PRRSV血清抗体IgG动态变化进行了检测。结果表明，pcDNA—PRRSV-ORF5基因疫苗接种小鼠后外周血对ConA有明显的反应性，试验组与对照组比较差异极显著（P〈0．01）或显著（P〈0．05），CD4^＋T淋巴细胞数在免疫后7d高于对照组（P〈0．01），CD8^＋T淋巴细胞在免疫后28d高于对照组，不同途径基因疫苗接种小鼠后均诱导小鼠产生PRRSV特异性IgG。在诱导细胞免疫方面，基因枪和肌肉注射各组间无明显差异；在诱导体液免疫方面，基因枪法优于肌肉注射。研究表明制备的pcDNA—PRRSV—ORF5基因疫苗免疫小鼠能够诱导其机体产生良好的体液和细胞免疫应答，基因枪法较肌肉注射更能诱导体液免疫应答的产生。  相似文献   

鸭病毒性肠炎病毒CH强毒株感染鸭胚成纤维细胞的超微结构观察   总被引：4，自引：0，他引：4  

郭宇飞  程安春  汪铭书  周伟光  文明  贾仁勇  袁桂萍  徐超  韩晓英  廖永洪 《中国兽医学报》2005,25(6):632-635

通过超薄切片和透射电子显微镜技术对鸭病毒性肠炎病毒（DEV）CH强毒株在鸭胚成纤维细胞（DEF）中的形态结构进行了研究。结果发现，DEVCH强毒株病毒核酸呈圆形颗粒状，直径35～45nm，在胞核内常集中分布；病毒核衣壳呈圆形．直径90～100nm．在胞核和胞浆内都有分布；DEV核衣壳可根据所含核酸形态的差异分为空心核衣壳、内壁附有颗粒型核衣壳、同心圆形核衣壳和实心核衣壳；成熟的病毒粒子具有囊膜和皮层结构．呈圆形．直径150～300nm，存在于胞浆空泡内；DEV可在DEF中分别形成胞浆内和胞核内包涵体结构；伴随子代病毒在细胞内的出现，胞浆内迁出现豆英状、马蹄形、半圆形、圆形、同心圆形等与病毒发生有关的电子致密结构。  相似文献   

鸭瘟病毒弱毒株在免疫雏鸭体内的分布和排毒规律   总被引：9，自引：5，他引：9  

程安春  汪铭书  刘菲  宋涌  袁桂萍  韩晓英  徐超  廖永洪  文明  周伟光  贾仁勇 《中国兽医学报》2005,25(3):231-233,258

鸭瘟病毒(DPV)弱毒Cha株经皮下、口服和滴鼻3种途径免疫1日龄雏鸭，应用聚合酶链反应(PCR)检测了病毒在体内分布和排毒规律。Cha株免疫雏鸭后，对血液、心、肝、脾、肺、肾、十二指肠、直肠、法氏囊、胸腺、胰腺、延脑、大脑、小脑、舌、肌肉、骨髓、粪便和食道共19种组织PCR检测结果如下：(1)皮下接种雏鸭后4h，即可在心、肝、脾、肾、法氏囊、胸腺、胰腺、延脑、大脑和小脑共10种组织中检出DPV的DNA；8h后，所有采取的组织器官均可检测到DPV的DNA。(2)口服接种雏鸭后4h，可在舌和食道中检测到DPV的DNA；8h后，可在心、肝、脾、肾、胸腺、胰腺、延脑、大脑、小脑、舌、食道和血液共12种组织器官中检出DPV的DNA。(3)滴鼻接种雏鸭后4h，未能在各种组织中检出DPV的DNA；8h后，可在心、肝、脾、肾、胸腺、延脑、大脑、小脑、舌、食道和血液共11种组织中检测到DPV的DNA。(4)在3种免疫途径中，检出时间最早和检出率最高的组织器官为肝脏、脑(大脑、小脑和延脑)；3种途径免疫的鸭，从免疫后12h至21d均能从所有采集的组织中检测出DPV DNA。  相似文献   

大肠杆菌中重组蛋白可溶性表达的研究进展及展望   总被引：1，自引：1，他引：0  

余波  程安春  汪铭书 《黑龙江畜牧兽医》2008,(10)

大肠杆菌表达系统是目前基因工程中最常用的重组蛋白表达系统.但由于大肠杆菌表达系统所表达的蛋白常常形成无活性的包涵体,为此研究者摸索出许多用来提高重组蛋白在大肠杆菌中可溶性表达的方法,近年来在提高重组蛋白可溶性表达的策略方面取得了一定进展,现介绍如下.  相似文献   

致羔羊脑炎粪肠球菌分离鉴定及毒力因子基因的PCR检测   总被引：2，自引：2，他引：0  

周霞  程安春  汪铭书  剡根强  马勋  韩素娟 《中国兽医学报》2008,28(1):35-39

从新疆部分地区羊场近年来发生的以脑炎为主要临床特征的病死羔羊体内分离出2株细菌,经鉴定为粪肠球菌。经链球菌A-G乳胶分型诊断液检测后确定为D群链球菌。该菌对小鼠和羔羊有较强的致病性,人工感染可引起小鼠的死亡,感染羔羊能够复制出与自然感染相同的临床症状和病理变化,并从感染发病和死亡羊的脑、心血、肝脏中再分离到相同细菌,分离菌对万古霉素、氟苯尼考、头孢噻肟钠、诺氟沙星和恩诺沙星敏感,根据GenBank中粪肠球菌主要毒力因子的基因序列设计引物进行PCR检测,结果显示,1株细菌明胶酶（GelE）、聚合物质（Asa1）、心内膜炎抗原（efaA）、胶原蛋白黏附素（Ace）、新的表面蛋白1（EF3314）等毒力因子基因阳性;另1株细菌溶血素激活因子（CylA）、表面蛋白（esp）、聚合物质（Asa1）、心内膜炎抗原（efaA）、胶原蛋白黏附素（Ace）、2种新的表面蛋白1和2（EF0591和EF3314）等毒力因子基因为阳性。  相似文献   

减蛋综合征病毒六邻体蛋白基因的克隆和表达   总被引：1，自引：0，他引：1  

汪铭书  程安春  郭万柱  王小玉 《畜牧兽医学报》2003,34(2):172-176

根据Genebank中EDSV-AV127的序列设计一对引物，从EDSV四川株中扩增出六邻体蛋白基因并将其克隆到pUC18中，PCR、限制性内切酶分析和序列分析表明：所扩增、克隆的基因片段包括了EDSV六邻体蛋白基因的完整序列。将克隆的基因正向插入pBV220的PRPL启动子游的SmaⅠ位点，经SDS-PAGE、Western印迹和琼脂扩散试验表明：六邻体蛋白基因在大肠杆菌中获得了表达并具有免疫学活性。  相似文献   

鸭病毒性肝炎的研究：病原分离,鉴定及弱毒株培育   总被引：4，自引：1，他引：3  

程安春  廖德惠 《中国兽医杂志》1993,19(1):3-4

  相似文献   

原位反转录PCR技术的应用     

李雪梅程安春  汪铭书 《中国兽医科技》2005,35(3):239-243

针对已有资料中对于以DNA为靶基因序列的原位PCR介绍较多，而对于原位反转录PCR的介绍很少，但在实际研究工作中有很多检测的靶基因是RNA(病毒的或基因组的RNA)的实际情况，就原位反转录PCR技术的基本原理、影响试验结果的关键因素和步骤，如组织细胞的固定、引物和探针的选择、蛋白酶及DNA酶消化、假阳性及假阴性的产生等进行了概述，旨在通过探讨上述问题，对该技术的实际应用有所指导。  相似文献