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利用已克隆的BALB/c小鼠Doppel蛋白基因,将其成熟蛋白编码区亚克隆至表达载体pGEX-6P-1上,构建重组表达质粒pGEX-6P-1-PRND。将重组蛋白表达载体转入E.coli BL21（DE3）中诱导表达,SDS-PAGE及Western blot分析结果表明,BALB/c小鼠Doppel蛋白在大肠杆菌中以包涵体形式高效表达。对表达的蛋白进行提取和纯化并免疫新西兰大白兔制备兔抗血清,初步建立了小鼠睾丸Doppel蛋白组织学分布的免疫组织化学方法。为进一步研究Doppel的结构、功能及其在TSEs发生发展中的作用提供基础材料和数据。 相似文献
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血管瘤型禽白血病是由禽白血病病毒引起的肿瘤性疾病之一,属于内皮性肿瘤[1].血管瘤易发于病鸡皮肤或内脏器官的表面,瘤壁破裂后引起流血不止,病鸡表现贫血症状并常死于大量失血.自辛朝安[2]2006年首次报道以来,孟祥凯[3]、何爱飞[4]、罗明星[5]等分别于2008年和2009年报道了血管瘤型禽白血病.虽然有该病发生的报告,但迄今还没有详细的病理组织学检查数据.病理组织学检查是检查家禽肿瘤性疾病的重要依据和判定标准[1],也是进行家禽肿瘤性疾病鉴别诊断的"金标准".本文通过对送检的具有典型血管瘤临床特征的三黄鸡病例进行了病理组织学观察,发现这些血管瘤病例具有J亚群白血病的标志性肿瘤细胞[6,8],诊断为血管瘤型J亚群白血病.病理组织学观察结果为深入探讨血管瘤型禽白血病的发生机制及临床诊断提供基础数据. 相似文献
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依次采用离子交换层析(DEAE-Cellulose、CM-Cellulose和SP-Sepharose)和凝胶过滤层析(Superdex75 HR10/300 GL)从三色雷蘑(Leucopaxillus tricolor)子实体中分离纯化得到一种核糖核酸酶(Ribonuclease,RNase)。该酶比活为1406 U/mg,纯化倍数为154,通过HPLC-LTQ-Orbitrap测序得到4条肽段序列,分别为DMAVSYLSR、IGLSSIPR、ILGRFVVDTYK和SGKANAATPK。该核糖核酸酶的相对分子质量为15000,最适反应pH为9.0,最适反应温度为40℃,热稳定性高,80℃孵育1 h后能保持90%以上的活性:Cu~(2+)、Ca~(2+)、Mn~(2+)、Cd~(2+)和Al~(3+)在1.25～10 mmol/L浓度下对该酶活性具有抑制作用,且抑制作用随着金属离子浓度的升高而变强;Fe~(2+)在1.25～5 mmol/L的浓度下,Pb~(2+)、Zn~(2+)、Mg~(2+)、Hg~(2+)、Fe~(3+)在1.25～2.5 mmol/L的浓度下对该酶的活性有促进作用。 相似文献
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以猴头菇粉和低筋面粉为主要原料制作饼干,探索不同猴头菇粉添加量对苏打饼干品质的影响。利用色差仪分析色度,质构仪测定质构品质,顶空固相微萃取-气相色谱-质谱联合测定风味物质,结合感官评价筛选最佳猴头粉添加量。结果表明,不同猴头菇粉添加量均可显著提高苏打饼干的脆度,降低色度值L*值,增加a*值、b*值,使饼干颜色偏黄、偏暗,猴头菇粉添加量为7.5%的苏打饼干比普通苏打饼干多了18种不同的风味成分,且感官品质最佳。因此,猴头菇粉的最适添加量为7.5%。 相似文献
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分别灌胃环磷酰胺所致免疫低下小鼠广叶绣球菌(Sparassis latifolia)多糖(SCPs,低、中、高剂量分别为100、200、400 mg·kg;),观察小鼠海马组织形态变化,检测5-羟色胺(5-hydroxytryptamine, 5-HT)、色氨酸羟化酶(tryptophan hydroxylase 2,TPH2)和环磷酸腺苷(cyclic adenosine monophosphate, cAMP)含量,测定细胞因子和cAMP-PKA-CREB-BDNF信号通路基因mRNA表达量、cAMP反应元件结合蛋白(cAMP response element binding protein, CREB)和磷酸化CREB(phosphorylated CREB, p-CREB)蛋白表达量,探讨SCPs对海马组织损伤的干预作用。结果表明:SCPs使免疫低下小鼠海马组织神经细胞数量增多,细胞间隙缩小,结构更为完整。与模型组相比,SCPs各剂量组5-HT和TPH2含量、中和高剂量组cAMP含量极显著增加;SCPs各剂量组TNF-α、中和高剂量组IL-1β mRNA表达量显著降低,SCPs中和高剂量组5-HT;受体、高剂量组蛋白激酶A和脑源性神经营养因子基因mRNA表达量显著增加;SCPs高剂量组CREB蛋白、各剂量组p-CREB蛋白表达量显著提高。研究结果为揭示广叶绣球菌多糖对海马组织保护作用的机制提供参考。 相似文献
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食用菌具有较高的营养价值和功能价值,多糖作为食用菌最主要的活性成分之一,不仅能够为机体供给能量,而且可以参与生物合成反应及细胞的各项生命活动。大多数食用菌多糖是α-葡聚糖、β-葡聚糖、混合α,β-葡聚糖,以及由果糖、半乳糖、甘露糖等多种单糖组成的杂多糖,其中,β-葡聚糖是食用菌中最具生物活性的多糖。食用菌多糖具有多种生物活性。为了为食用菌多糖在功能性食品中的应用提供理论基础,综述了食用菌多糖的结构及其抗氧化、抗衰老、调节免疫、抗炎、抗肿瘤、降血糖、降血脂、抗病毒、抗辐射、抗突变、抑菌、抗疲劳、抗凝血等方面的功能及机理,并对其进行了展望。 相似文献
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对刺芹侧耳（Pleurotus eryngii）子实体进行热风干燥处理,检测其色差值、褐变指数、中间指数、紫外可见吸收光谱,分析其美拉德反应程度;提取刺芹侧耳多糖-蛋白质复合物,分析其基本成分、加工特性（溶解性、相对黏度、起泡性、乳化性、硬度、内聚性、弹性、咀嚼性和凝胶强度）和抗氧化性。结果表明：新鲜刺芹侧耳的色差值最高,干制24 h的最低;新鲜刺芹侧耳的褐变指数与中间指数最低,干燥24 h的褐变指数与中间指数最高。新鲜刺芹侧耳多糖-蛋白质复合物溶解所需时间最长,干燥18、24 h的溶解时间较短;干燥24h的相对黏度最高,新鲜刺芹侧耳的最低;干燥24h的乳化性、起泡性均最好,干燥12、18、24h的乳化稳定性较好,干燥18 h的起泡稳定性较好;干燥24 h的硬度、内聚性、弹性、咀嚼性和凝胶强度均最高;干燥18、24h的对DPPH自由基清除率较高,干燥24h的对羟基自由基清除率最高,干燥24h的对超氧阴离子清除率较高,干燥18、24 h的对多酚氧化酶抑制率较高。研究结果可为刺芹侧耳的进一步开发利用提供参考。 相似文献
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采用超声辅助皂化法提取香菇(Lentinula edodes)子实体麦角甾醇，通过单因素实验和正交实验优化提取条件，对麦角甾醇纯化产物表征、光稳定性进行分析，并测定其对羟基、DPPH自由基清除率和降胆固醇活性。结果表明：麦角甾醇最佳提取条件为料液比1∶40 (g:mL)、0.04 g·mL-1 KOH、超声温度70℃、超声时间70 min，在此条件下麦角甾醇得率为(0.81±0.02)%，麦角甾醇纯化产物纯度为(86.18±3.49)%。与白炽光比较，紫外光照射麦角甾醇纯化产物的存留率显著降低。在实验范围内，1 mg·mL-1麦角甾醇纯化产物对羟基、DPPH自由基清除率较高，清除羟基、DPPH自由基的IC50分别为(12.96±1.36)、(6.68±0.98) mg·mL-1。麦角甾醇纯化产物显著降低胆固醇在胶束中的溶解度。研究结果可为香菇麦角甾醇的利用提供参考。 相似文献
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通过小鼠肝脏指数测定、肝脏的组织形态HE染色观察、肝脏脂质代谢和抗氧化指标测定，并采用实时荧光定量PCR技术检测肝脏抗氧化应激反应及炎症相关基因表达量，研究广叶绣球菌(Sparassis latifolia)多糖(SLP，低、中、高剂量分别为100、200、400 mg·kg-1)对高脂小鼠肝脏氧化应激的调节作用。结果表明：与模型组相比，SLP中、高剂量组的肝脏指数显著降低；高剂量组肝脏的TC、TG含量均显著降低，低、中、高剂量组的LDL-C含量极显著降低；中、高剂量组的MDA含量显著降低，高剂量组的SOD、GSH-Px活性和GSH含量均显著升高；低、中、高剂量组的HO-1、GST表达量均显著升高，高剂量组的NQO1表达量显著升高，中、高剂量组的γ-GCL表达量显著升高；高剂量组的CRP、IL-6、TNF-α表达量均极显著降低，中、高剂量组的VCAM-1表达量极显著降低，低、中、高剂量组的ICAM-1表达量极显著降低，表明广叶绣球菌多糖可通过提高肝脏的抗氧化能力，调节炎症相关基因表达，改善高脂饮食导致的小鼠肝损伤。研究结果可为广叶绣球菌多糖开发提供参考。 相似文献