凡纳滨对虾遗传多样性的微卫星DNA分析   总被引：4，自引：0，他引：4  

陈晓汉  曾地刚  李咏梅  彭敏  蒋伟明  杨春玲 《广西农业科学》2006,37(5):579-583

通过对5个微卫星座位的聚合酶链式反应(PCR)扩增、聚丙烯酰胺凝胶电泳和银染色检测,探究凡纳滨对虾群体的遗传多样性。结果表明,供试的凡纳滨对虾群体在5个微卫星位点上有2~4个等位基因,平均等位基因数3个,平均杂合度0.5755,平均多态信息量0.4864,平均有效等位基因数2.5053。全群基因纯合度0~0.8,平均0.3917。显示凡纳滨对虾群体遗传多样性水平处于中度多态。  相似文献   

企鹅珍珠贝微卫星分子标记的筛选     

许友卿  肖群平  陈秀荔  彭敏  蒋伟明  李咏梅  丁兆坤 《水生态学杂志》2011,32(3):88-93

运用生物素与链霉亲和素的强亲和性原理,用生物素-磁珠吸附微卫星富集法,筛选企鹅珍珠贝(Pteria penguin)的微卫星分子标记序列,进而对南海区企鹅珍珠贝的遗传多样性进行分析。对136个菌落中的85个阳性克隆进行微卫星测序,获得64个序列,达到85.93%。所得到的55个重复6次以上的微卫星序列中,除生物素探针中使用的CA重复外,还得到TG、TC、GA的重复序列。重复序列中完美型36个,占65.5%;不完美型14个,占25.5%;混合型5个,占9.1%。利用Primer Premier5.0设计引物40对,合成其中的20对并进行PCR筛选,15对可扩增出特异性条带。研究表明,筛选出的企鹅珍珠贝微卫星分子标记可用于进一步的遗传多样性分析。  相似文献   

凡纳滨对虾围食膜蛋白基因全长cDNA的克隆及序列分析   总被引：1，自引：1，他引：1  

陈秀荔  赵永贞  彭敏  杨春玲  蒋伟明  李咏梅  曾地刚  马宁  黎铭  陈晓汉  吴铁军 《水产学报》2012,36(10):1503-1511

为研究凡纳滨对虾围食膜蛋白在IHHNV感染虾体过程中的作用,实验采用SMART技术构建了凡纳滨对虾肠道组织的全长cDNA文库,电子拼接获得了对虾围食膜蛋白基因全长cDNA序列,并进行了功能分析。全长cDNA文库的库容达1.05×106pfu/mL,重组率为95%。随机挑选1 600个克隆进行测序,去除载体后得到插入长度≥450 bp的有效序列1 531条,根据同源片段长度不小于100 bp,90%同源性的原则对这些序列归并unigene,得到unigene 399条。从所测克隆中得到一个围食膜蛋白基因,其cDNA序列长度为1 002 bp,编码由303个氨基酸组成的蛋白,基因序列比对发现该序列与斑节对虾卵巢围食膜蛋白1和2、围食膜蛋白前体3,短钩对虾围食膜蛋白1、2,以及中国对虾围食膜蛋白编码序列的同源性较高,均达到80%以上。通过半定量RT-PCR对该基因在不同组织的表达分析结果表明该基因在抗感染对虾传染性皮下及造血组织坏死病毒(IHHNV)的对虾的心脏和胃中高表达,在肝脏、肠和肌肉中表达较低,在鳃中表达最弱,在眼中不表达;该基因在感染IHHNV病毒的对虾的心脏表达明显减弱,在肝脏、眼、肌肉和鳃中表达较低,在肠道和胃中几乎不表达,说明该基因参与对虾抵御病原体侵入过程。  相似文献   

对虾白斑病毒VP15基因的RNA干扰体外研究     

黎铭  陈晓汉  马春霞  蒋伟明  马宁  熊建华  彭金霞  陈秀荔  彭敏  曾地刚  李咏梅 《水生态学杂志》2010,31(5):56-61

VP15是南美白对虾WSSV病毒的一个核衣壳基因。本研究采用体外干扰实验筛选对VP15具有针对性的siRNA。实验构建了真核表达载体pEGFP–VP15,并将设计的siRNA以及pEGFP–VP15共转染BHK细胞。采用Western blot方法检测GFP–VP15融合蛋白的表达,半定量RT-PCR方法检验siRNA抑制VP15基因转录的效果。 实验结果表明,pEGFP–VP15在PK细胞正常表达,设计的三对siRNA对GFP–VP15的mRNA转录均有不同程度的干扰效果,其中siRNA1的干扰效果最为显著。实验结果为下一步对虾体内干扰WSSV病毒复制研究以及筛选更多的特异siRNA建立基础。  相似文献   

卵形鲳!线粒体１６ＳｒＲＮＡ基因全长序列的克隆与分析     

彭金霞  彭敏  陈秀荔  蒋伟明  杨春玲  李咏梅 《水生态学杂志》2010,31(4):81-85

根据近源物种线粒体序列的同源比对,在16S rRNA基因上下游保守区域设计一对通用引物。PCR扩增获得特异的DNA片段,经克隆、测序和比对证实该片段包含了卵形鲳鲹线粒体16S rRNA全长序列1725bp。对5个个体分别测序后比对,发现卵形鲳鲹16S rRNA基因在钦州湾种群个体间存在至少7个变异位点,使5个个体分别具有5种不同的单倍型。将卵形鲳鲹和鲹科其它物种的16S rRNA序列进行比,根据比对结果构建的鲳鲹科各物种的系统进化树,支持鲹科下设四个亚科(鲹亚科,鰤亚科,鲳鲹亚科,鰆鲹亚科)的分类系统。综上所述,16S rRNA基因既可用于卵形鲳鲹种群遗传多样性分析,又适用于鲹科鱼类的系统进化分析。  相似文献   

白菜类几种蔬菜花粉扫描电镜观察   总被引：1，自引：0，他引：1  

周林  蒋伟明  杨槐俊  段锦兰 《华北农学报》1989,(3)

用扫描电子显微镜对白菜类6种蔬菜花粉及甘蓝花粉进行了观察:白菜类蔬菜不同类型的花粉其大小、形态、花粉外壁纹饰存在差异.芜菁、卵圆型大白菜、苔菜属大花粉类型,直筒型大白菜、白菜型油菜、小白菜属小花粉类型.形状大部分为长椭球形.萌发孔形式为三孔沟状.表面纹饰为穴状网.分析比较结果为鉴定和识别这些蔬菜类型,研究其起源、进化及分类提供了参考.  相似文献   

不同铬化合物对奥尼罗非鱼生长的影响   总被引：4，自引：0，他引：4  

蒋伟明  韩耀全  李大列 《广西农业科学》2004,35(1):76-78

在日粮中添加不同铬化合物饲养奥尼罗非鱼，结果表明：添加甘氨酸铬和烟酸铬组的鱼增重效果较好。适当添加铬化合物，有助于鱼的生长和消长，降低饲料系数，每养成1kg鱼体重，可节约成本0．23～0．86元。  相似文献   

醋酸铵法提取卵形鲳鲹基因组DNA   总被引：1，自引：0，他引：1  

彭敏  陈秀荔  蒋伟明  杨春玲  李咏梅 《天津农业科学》2011,17(1):114-117

建立了一种简便、安全、经济的提取卵形鲳鲹基因组DNA的方法,即醋酸铵法。该方法采用7.5mol·L~(-1)醋酸铵代替酚、氯仿,通过高盐-SDS去除蛋白和多糖,异丙醇在一定浓度醋酸铵存在条件下选择性沉淀DNA,而不沉淀蛋白,并通过酶切和AFLP验证该法抽提的DNA纯度。该法提取的DNA质量较高,无蛋白质和RNA污染,较酚/氯仿法和试剂盒法抽提得到量多,酶切和AFLP试验结果表明,提取的DNA可用于酶切分析和分子标记等试验。此法安全、简便、经济,该方法更适合于对大量样品的提取。  相似文献   

紫外线系统净化近江牡蛎(Crassostrearivularis)中细菌的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

蒋伟明  吴卫君  番志忠  丁兆坤  李咏梅  陈秀荔  何为  吴铁军 《西南农业学报》2011,24(5)

为保证食品安全,研究采用紫外线系统杀菌海水,以近江牡蛎为试验材料,经人工接菌、清洗、粗选等流程后,进行各净化处理条件试验及正交试验筛选,以大肠菌群和菌落总数为指标,探讨净化的最佳环境条件.结果表明,利用紫外线系统能达到海水杀菌的效果,可用于贝类净化.正交试验最优组合为第6组A2 B3 C1 D2(温度25℃、盐度25‰、换水率1次/4h、贝水比1∶6)和第7组A3B1C3D2(温度30℃、盐度15％、换水率1次/8 h、贝水比1∶4).但综合考虑净化效果及经济效益,可选取温度30℃、盐度25‰、换水率1次/4h、贝水比1∶4,净化时间36 h作为近江牡蛎细菌净化的优化条件.  相似文献   

应用6-DMAP人工诱导近江牡蛎三倍体的初步研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

杨春玲  陈晓汉  李咏梅  彭敏  蒋伟明  韦嫔媛  王大鹏  杨彦豪 《西南农业学报》2008,21(3)

采用6-二甲基氨基嘌呤（6-DMAP）抑制受精卵第二极体排放法诱导近江牡蛎产生三倍体,通过6-DMAP浓度、诱导时机、诱导持续时间3因素3水平正交试验设计,得出近江牡蛎三倍体诱导3因素最优水平组合,即当30％受精卵出现第一极体时,将受精卵浸泡在含6-DMAP450μmol／L的海水中20min;3因素影响诱导率的主次顺序为：6-DMAP浓度→诱导时机→诱导持续时间。  相似文献