利用CRISPR/Cas9技术敲除RNA甲基化酶TRDMT1基因及其功能初探     

徐慧  孙振  薛松磊  豆春峰  胡序明  崔恒宓 《扬州大学学报(农业与生命科学版)》2018,(2)

为构建TRDMT1基因敲除的HEK293细胞系,利用CRISPR/Cas9系统在TRDMT1基因第1个外显子前插入BGH Ploy(A)转录终止序列,终止TRDMT1基因表达。利用重叠PCR方法合成sgRNA序列,构建TRDMT1-gRNA载体及含不同抗生素基因的同源重组载体TRDMT1-LOXN-Puro和TRDMT1-LOXP-Neo;将同源重组载体TRDMT1-LOXN-Puro、TRDMT1-LOXP-Neo及TRDMT1-gRNA、Cas9表达载体MLM3613共转染HEK293细胞;利用Puromycin和Neomycin抗生素筛选细胞,通过RT-qPCR检测TRDMT1基因转录终止效率。通过细胞生长曲线和划痕试验检测TRDMT1基因敲除对HEK293细胞增殖和迁移能力的影响。结果表明:成功构建了TRDMT1-gRNA载体及TRDMT1-LOXN-Puro、TRDMT1-LOXP-Neo同源重组载体;与正常HEK293细胞相比,试验组TRDMT1表达量仅为1%;TRDMT1基因敲除后显著影响HEK293细胞增殖和迁移。这一研究通过CRISPR/Cas9技术成功构建了TRDMT1基因敲除的HEK293细胞系(HEK293-TKO),为RNA甲基化研究提供了一种有效的工具;TRDMT1基因可能与细胞的增殖和迁移有关。  相似文献   

基于声发射技术的木材害虫信号特征检测     

豆春峰  熊鑫  李明  朱代根 《西北林学院学报》2020,35(4):120-124

针对木材害虫声发射（AE）信号检测问题,研究杨树木段中麻点豹天牛幼虫AE信号波形特征及其信号的能量,为钻蛀害虫声音的监测提出一种新的方法。取一段具有麻点豹天牛幼虫的杨树木段,通过采样频率为500 kHz的2通道木材蠕变声发射信号采集系统采集原始AE信号。对采集到的原始信号滤波后进行小波分解,通过对各层高频信号的分析获取AE信号的频域特征,并对其进行重构与信号解析。结果表明,麻点豹天牛幼虫AE信号的主频主要集中在30 kHz附近,其信号的能量在16:00最高,反映了该幼虫在15:00-16:00较活跃。  相似文献   

Word使用小技巧     

刘蕴  豆玉杰 《农业网络信息》2007,(1):99-100,111

我们在用Word编辑专业论文时,经常会遇到一些特殊符号的输入,另外有的时候当你再次打开一个你认为没有问题的文档时,可能会看见文件中一片乱码根本就无法阅读或者是程序没有响应,本文简要介绍了这几种情况的处理方法.  相似文献   

仙客来的休眠与度夏     

豆豌豆 《中国花卉盆景》2012,(8):36-37

盛夏,仙客来总会"稍事休息"或"长睡不醒"。帮它度过这段特殊时期,就等于为它的下一个生长周期搭建了前后贯通的桥梁,不可掉以轻心。听说有的网友谈仙客来度夏而色变——说明它度夏之难。的确,仙客来越夏看似简单,实则确有一些要规避的细节,毕竟这一段是承接下一个生长周期的桥梁。这里说说我的度夏方法,希望我对仙客来休眠的认识和我的经验能对您有益。  相似文献   

维生素E在蛋鸡日粮中的应用     

胡梅  李锋  贾俊静  豆腾飞 《饲料研究》2023,(6):117-122

目前，我国蛋鸡养殖向规模化、集约化发展，但规模化养殖会引发蛋鸡应激加剧、疾病频发等问题。禁抗环境下，寻求安全高效、质量可控的绿色饲料添加剂具有广阔的应用前景。维生素E具有安全性、有效性、质量可控等特点，已经在蛋鸡生产中取得了较好的应用效果。文章简要概述维生素E的组成、理化性质、生理功能、作用机理及其在蛋鸡日粮中的应用，并对维生素E的现状进行总结与展望，以期为维生素E进一步在蛋鸡日粮中的应用提供参考。  相似文献   

河西走廊绿洲外围沙化草地固沙造林效果研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

李福  韩天虎  豆卫  喻文虎  向金城  刘克彪  陈鸿 《草原与草坪》2006,(5):30-33

通过对流动沙丘固沙造林效果的对比研究,结果发现:未固沙造林的沙丘,丘间低地是以芦苇和赖草为优势种的原生群落,沙丘迎风坡植被稀疏,不形成植物群落,而实施固沙造林技术20年后的沙丘,虽丘间低地群落组成成分变化不大,但流动沙丘被完全固定,中下部形成以引入固沙灌木柠条锦鸡儿、花棒为优势种的人工植物群落,植物种类增加,生产力提高,草地生态系统得到有效恢复。固沙造林沙丘与未固沙造林沙丘相比,丘间低地群落高度增加51.6%,产草量增加12.6%,盖度增加4.7%,多度无变化,密度提高15%,物种丰富度指数提高25%,均匀度指数提高34.8%;迎风坡下部群落高度增加87.1%,产草量增加13%,多度提高一个等级,密度增加15%,物种丰富度指数提高228%,均匀度指数提高22.8%;迎风坡中部群落高度增加453.7%,产草量增加64.5%,多度提高一个等级,密度增加128.9%,物种丰富度指数提高616%,均匀度指数提高33.3%;迎风坡上部植被非常稀疏,不形成群落,植株平均高度25.3 cm,产草量增加206.8%,多度提高一个等级,密度增加550%,物种丰富度指数提高800%,均匀度指数提高66.7%。  相似文献   

天麻散治疗马类家畜脾虚湿邪     

豆兆琪 《中国草食动物》2006,26(2):64

脾虚湿邪为脾虚湿困，血不养肿，肝风内动之风邪证，是马类家畜临床常见病之一。从临床所表现的症状来看，近似于现代医学的脑水肿。过去我们对此病采取西药降压、镇惊、利尿等治疗，疗效不甚满意。从90年代中期开始，我们从色、脉、形进行综合分析，辨证施治，内服天麻散，共治疗25例，取得了较满意的效果，缩短了疗程，一般连服4～5剂，症状明显减轻，6～12剂，基本获痊愈。  相似文献   

猪IL-2真核表达质粒构建及对PRRSV-ORF5基因疫苗免疫佐剂作用的研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

希尼尼根  程安春  汪铭书  陈希文  豆文波  李雪梅  刘伍梅  张平英  刘菲  陈孝跃 《畜牧兽医学报》2007,38(9):1003-1008

本研究应用真核表达载体pcDNA3.1（＋）和猪白细胞介素2（IL-2）基因成功构建了IL-2的真核表达质粒（pcDNA-IL-2）,探讨了pcDNA-IL-2作为分子免疫佐剂对猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）ORF5基因疫苗（pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5）免疫猪的增强作用。经间接ELISA法、MTT比色法及流式细胞仪分别对pcDNA-IL-2与pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5共同免疫猪、pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5单独免疫猪、pcDNA3.1（＋）空载体和灭菌水免疫对照猪的血清抗PRRSV抗体IgG、外周血T淋巴细胞的增殖活性、CD4^＋和CD8^＋细胞比例进行检测,结果表明pcDNA-IL-2与pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5共同免疫猪的IgG含量、外周血T淋巴细胞的增殖活性、CD4^＋和CD8^＋细胞比例与pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5单独免疫猪相比有显著差异（P〈0.05）。说明pcDNA-IL-2能显著增强pcDNA-PRRSV-SC2-ORF5基因疫苗免疫猪的体液和细胞免疫应答,可作为PRRSV基因疫苗的良好佐剂。  相似文献   

种公牛采精过程中的操作细节     

豆有院  王珂  丁春贤  郭海龙 《甘肃畜牧兽医》2007,37(2):35-36

在牛的冻精制作生产上,精液的活力和密度是其重要指标,公牛精液的采集是第一个重要步骤,要提高冷冻精液活力和质量,采精过程中的每一个细节都要一丝不苟,严格把关.  相似文献   

仙客来剪根换盆术     

豆豌豆 《中国花卉盆景》2012,(3):34-36

换盆没有太多的技术含量,但对于会动脑、爱琢磨的人来说一样能摸索出与众不同的方法来,关键看你是不是满足于习惯成自然的定律。  相似文献