北京油鸡胚胎成纤维细胞系建立与生物学特性研究   总被引：12，自引：3，他引：12  

周向梅  马月辉  关伟军  文杰  李晗 《畜牧兽医学报》2005,36(3):209-215

采取组织块直接培养法，对北京油鸡胚胎组织进行原代和继代培养，成功地建立了成纤维细胞系。并对培养细胞进行了形态学、细胞生长动力学观察，以及核型和乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶的同工酶分析。结果表明，该细胞系的群体倍增时间(PDT)为24h；细胞染色体中二倍体占主体，为76％～88％；乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶同工酶电泳图谱与本室其它细胞系有明显差别；细菌、真菌、病毒、支原体检测呈阴性。该细胞系的建立，使北京油鸡这一国家重要种质资源在细胞水平上保存下来，也为基因组文库和体细胞克隆等研究提供了理想的生物材料。  相似文献   

检测鸡TRIM25蛋白的免疫组化方法     

禇颖  马文杰  胡卫国  陈茹  邱建华  郭慧君  李宏梅 《畜牧兽医学报》2018,(4)

为建立检测鸡TRIM25蛋白表达的免疫组化方法,根据发表的鸡TRIM25基因序列,设计引物,从海兰褐鸡脾中扩增TRIM25基因,构建重组原核表达质粒,通过诱导表达获得重组TRIM25蛋白,经纯化后免疫接种兔和小鼠,获得高效价血清抗体,用该抗体建立免疫组化方法,对鸡肺、脾、肝组织中TRIM25蛋白进行检测。结果显示,克隆的鸡TRIM25抗原基因大小为1 012bp,构建的重组表达质粒能够在大肠杆菌中稳定表达,经纯化后的重组蛋白质能够诱导兔和小鼠产生效价为1∶106以上的血清抗体,该血清抗体免疫组化检测发现鸡肺、脾和肝组织中均有不同程度的TRIM25蛋白表达,在肺组织中主要存在肺泡周围的内皮细胞、淋巴细胞等的细胞质内;脾组织主要出现在脾淋巴细胞和血管内皮细胞等的细胞质中;肝组织中主要出现在肝小叶肝细胞、淋巴细胞以及血管内皮细胞细胞质中。该研究为深入研究鸡TRIM25蛋白的组织分布、动态表达和生物学活性提供物质基础和方法依据。  相似文献   

猪流行性腹泻病毒胶体金检测方法的建立     

汪怿旸  赵振鹏  赵巍  王姣  郑建高  姜军华  柴文娴  金文杰  秦爱建 《畜牧与兽医》2018,(4):100-105

应用胶体金免疫层析技术,建立了一种快速检测猪流行性腹泻病毒(PEDV)的方法。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记纯化的抗猪流行性腹泻病毒的单克隆抗体m Ab-PEDV1C12和(m Ab)-PEDV2C11,并将m Ab-PEDV2C11和羊抗鼠Ig G抗体喷在硝酸纤维素膜上分别作为检测线和质控线,对pH值、抗体浓度、封闭时间等条件摸索与优化。测试结果表明,该猪流行性腹泻病毒快速检测试纸条的检测下限达到310个TCID50的病毒量,检测时间为10 min,批内和批间重复性为100%。结论:该方法使用简单快速,适合猪场检测猪流行性腹泻病毒。  相似文献   

三株乳酸杆菌的分离鉴定与益生特性研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

梁东梅  李玉鹏  杜艳芬  朱琪  安建勇  崔茂盛  李治欣  乔家运  杨卓婧  王文杰  李海花 《中国饲料》2018,(11)

本研究通过分离鉴定猪肠道内乳酸杆菌并对其益生特性进行比较分析,旨在为乳酸杆菌在仔猪饲粮中的应用提供科学依据。试验选取健康猪粪便,利用选择性培养基进行厌氧培养和单克隆纯化,共获得三株乳酸杆菌,通过生化鉴定、16Sr RNA基因序列测定和同源性分析,确定分离菌株分别为植物乳杆菌、唾液乳杆菌、嗜酸乳杆菌;采用牛津杯法、活菌计数法和细胞试验等研究三株乳酸杆菌体外抑菌活性、黏附性及竞争性黏附猪小肠上皮细胞(IPEC-J2)的益生特性。结果表明:与对照组相比,三株乳酸杆菌培养上清液的抑菌圈直径(P0.01)和抑菌效果(P0.01)差异均极显著,并且以植物乳杆菌培养上清液的抗菌效果为最佳;三株乳酸杆菌均可黏附于IPEC-J2细胞,并且以植物乳杆菌黏附IPEC-J2的菌数为最多;与对照组相比,三株乳酸杆菌对大肠杆菌黏附IPEC-J2细胞均具有抑制作用(P0.01),并且以植物乳杆菌抑制黏附的效果最好。  相似文献   

玉屏风散多糖对仔猪生长性能和血清部分抗氧化指标的影响     

邓缘  蔡文杰  胡雄贵  张星  陈晨  张翠永 《黑龙江畜牧兽医》2018,(2)

为了研究玉屏风散多糖对仔猪生长性能、腹泻率和抗氧化力的影响,试验选用初始体重相近的杜长大三元仔猪120头,随机分为5个处理组,每个处理组4个重复,每个重复6头猪,饲养期21 d。试验Ⅰ组为对照组,饲喂基础日粮,试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组分别在日粮中添加100,200,400,600 mg/kg的玉屏风散多糖。试验结束的第2天对仔猪称重、采血,计算平均日增重、平均日采食量、料重比、腹泻率,检测血清抗氧化指标。结果表明:与对照组相比,4个试验组均可明显提高仔猪的末重和平均日增重;各试验组之间料重比差异不显著(P0.05),但随着玉屏风散多糖添加量的增加而降低。添加玉屏风散多糖能显著降低仔猪腹泻率(P0.05),添加量为100 mg/kg时即可达到显著性差异(P0.05)。随着玉屏风散多糖添加量的增加,仔猪的抗氧化力逐渐增强。试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ组的谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和丙二醛(MDA)含量均与试验Ⅰ组(对照组)有显著性差异(P0.05);试验Ⅲ、Ⅳ组的总抗氧化能力(TCA)与对照组有显著性差异(P0.05);铜锌超氧化物歧化酶(Cu-Zn SOD)活性与对照组相比无显著性差异(P0.05),但有正向效应的趋势。说明在日粮中添加玉屏风散多糖可提高仔猪的生长速度和平均日增重,降低料重比,同时可减少仔猪腹泻的发生,提高机体抗氧化能力,添加量以400 mg/kg效果较好。  相似文献   

共培养体系中猪骨骼肌卫星细胞对肌内前体脂肪细胞脂质沉积的影响     

马衍旋  王文杰  穆淑琴  席静宁  李宁  郑梓  闫峻  孙超 《动物营养学报》2018,(4)

本试验旨在研究共培养体系中猪骨骼肌卫星细胞对肌内前体脂肪细胞脂质沉积的影响。试验分离培养了猪骨骼肌卫星细胞和肌内前体脂肪细胞,2种细胞分离培养鉴定后,接种于Transwell细胞小室共培养板进行共培养,待细胞密度达到90%以上分别进行诱导分化。骨骼肌卫星细胞诱导分化8 d后,检测肌内前体脂肪细胞分化水平、分化标志基因的表达以及脂质代谢关键酶的表达。结果显示:与肌内前体脂肪细胞单独培养相比,共培养体系内肌内前体脂肪细胞的脂滴数量和脂滴面积极显著减少(P0.01),肌内前体脂肪细胞增殖分化转录因子过氧化物酶体增殖物激活受体γ和CCAAT增强子结合蛋白的基因和蛋白表达水平极显著下降(P0.01),肌内前体脂肪细胞的乙酰辅酶A羧化酶、脂肪酸合成酶的基因和蛋白表达水平极显著下降(P0.01)。由此可见,共培养体系中猪骨骼肌卫星细胞对肌内前体脂肪细胞脂质沉积具有抑制作用。  相似文献   

湖南首届规模猪场变异株腹泻成果研讨会在长沙举行     

蔡文杰 《湖南畜牧兽医》2018,(4)

正2018年以来,国内生猪行情低迷,养猪形势更加严峻,"抓环保,促产能,防疫病,降成本,增效益"已是养猪人当下最关注的问题。猪场如何防控冬春仔猪腹泻,如何降本增效,正是养猪人当前迫切关心的问题。8月14日,由武汉科前生物股份有限公司主办的湖南首届规模猪场变异株腹泻成果研讨会暨"2018科前冬季腹泻防控总动员"大会在长沙举行。大会邀请主管部门、行业  相似文献   

谁绊住了普氏原羚自由的舞步？     

邵文杰 《绿色中国(A版)》2014,(19):36-40

生活在青藏高原东部青海湖畔的普氏原羚是国家一级保护动物,也是世界上最濒危的有蹄类动物。虽然民间力量和政府部门共同努力,其数量在逐渐增长,但网围栏、狼害、饮水困难等因素仍在威胁着普氏原羚的生存。  相似文献   

浅析母猪产后瘫痪预防和治疗   总被引：1，自引：0，他引：1  

裴文杰 《现代农业》2011,(5):186-187

随着畜牧业的不断发展,规模健康养殖和专业合作社、养殖小区的兴起,母猪产后瘫痪为养殖业带来不少的经济损失,一直是农村散养户和集约化猪场中常见到的一种疾病,应当引起畜牧兽医行业的高度重视,它并非是一种独立的疾病,而是由多种因素所引起的一种症状表现,主要发生在母猪产后和哺乳过程中。母猪产后瘫痪是母猪产后体质衰弱,  相似文献   

氯化铯催化氢氧化钾促进二烷基二硒醚的合成     

喻爱和  赵文杰  李宁波  许新华 《湖南农业大学学报(自然科学版)》2011,38(6):60-63

针对氢氧化钠作用下水合肼还原硒形成Na2Se2 与磺酸酯反应制备二烷基二硒醚需要在高温(100 ℃)下才能有效进行,且仅适用于制备不含官能团的二烷基二硒醚的问题.由于铯离子体积大, 与阴离子之间的静电作用弱, 使与之键合的阴离子表现出强的碱性和亲核性，利用铯碱作缩合剂，能显著降低反应的活化能, 使许多反应在温和条件下就能有效进行.根据离子交换原理，采用氯化铯和TBAI作催化剂, 以无水DMF作溶剂, 4A分子筛作吸水剂, 氢氧化钾促进肼还原硒, 随后与含官能团的卤代烃或磺酸酯反应, 高收率地形成对应的二烷基二硒醚.本方法不仅可以合成含官能团的二硒醚，而且具有反应条件温和、产率高等优点.  相似文献