戊二醛对伪狂犬病毒和鸡传染性法氏囊炎病毒的杀灭试验及对猪、鸡的安全试验     

徐涤平  方雨玲  杨峻  邵华斌  杨宜生  熊贤涛 《中国兽药杂志》1995,(3)

戊二醛对伪狂犬病毒和鸡传染性法氏囊炎病毒的杀灭试验及对猪、鸡的安全试验徐涤平，方雨玲，杨峻，邵华斌，杨宜生（湖北省农业科学院畜牧兽医研究所）熊贤涛（湖北省兽药监察所，武汉４３００６４）戊二醛（Ｇｌｕｔａｒａｌｄｅｈｙｄｅ，ｐｅｎｔａｎｄｉａｌ）为醛类...  相似文献   

猪乙型脑炎减毒活疫苗的安全性和免疫原性试验   总被引：3，自引：2，他引：1  

徐涤平  刘泽文  杨宜生  熊忠良  段正赢  邵华斌  贾丽丽  俞永新 《中国兽药杂志》2002,36(8):20-22

将猪用JEV减毒株SA14-14-2VS制备的活疫苗脑内注射3周龄小白鼠,不能使小鼠致病。用不同剂量活苗注射后备母猪,均未出现任何不良的临床反应。用后备母猪进行免疫原性试验,能产生良好的免疫应答。免疫该疫苗的初产母猪能抵抗JEV强毒的攻击,不产生病毒血症,对胎儿感染的保护率达100%。因此,该减毒活疫苗具有可靠的安全性,良好的免疫原性。  相似文献   

新城疫病毒荧光RT-PCR检测方法的建立及应用     

商雨  郭静  王红琳  罗青平  胡薛英  邵华斌  程国富  温国元 《中国兽医学报》2013,33(8)

经对部分发表在NCBI里的新城疫病毒序列进行比对,在其F基因上找到1段相对保守序列,根据保守序列设计1对引物和1条TaqMan探针,以新城疫Ⅰ系疫苗株(Mukteswar株)作为标准品,通过系列条件优化、特异性、灵敏性和重复性试验,建立了一种灵敏度高、特异性强和重复性好的荧光RT-PCR检测新城疫病毒的方法.该方法能检测最低初始病毒浓度为102.2 ELD50/mL,且在108.2～102.2 ELD50/mL内Ct值与病毒浓度的对数值(lgELD50/mi)呈很好的线性关系,R2达到0.997 5;该方法对禽流感、禽痘病毒和禽大肠杆菌等禽病病原核酸无交叉反应;批间和批内重复性良好;临床样品检测中荧光RT-PCR与鸡胚分毒的符合率、诊断灵敏度和诊断特异性分别为98.5％,50.0％和98.4％.因此,荧光RT-PCR检测方法的建立为新城疫病毒检测提供了一种快速有效的方法,为新城疫病毒的研究奠定了一定的基础.  相似文献   

基于Taqman-MGB探针的猪瘟病毒野毒株荧光RT-PCR检测方法的研究     

温国元  杨峻  罗青平  廖永洪  胡智斌  张蓉蓉  王红琳  艾地云  罗玲  宋念华  邵华斌 《中国猪业》2013,(Z2):136-140

应用MGB荧光RT-PCR技术对猪瘟病毒野毒株进行实时定量检测,以实现对猪瘟病毒野毒株与疫苗株的鉴别诊断。以猪瘟病毒5’端非编码区为扩增靶区,通过鉴别诊断位点的筛选、引物、探针和反应条件的优化,建立了猪瘟病毒野毒株荧光RT-PCR检测方法。试验结果表明,该方法的检测灵敏度为10拷贝/反应或3.0 TCID50/反应;对猪瘟病毒野毒株的检测结果均为阳性,而对猪瘟病毒疫苗株和其他猪源病毒的检测结果均为阴性,表明该方法具有较好的特异性;对515份临床样品的检测结果表明,该方法与RT-nPCR测序法的检测符合率为98.3%;猪瘟病毒人工感染猪实验结果表明,猪瘟野毒感染猪发病前2-4天即可被检测出阳性,疫苗免疫株检测结果始终为阴性。  相似文献   

猪圆环病毒Ⅱ型抗体间接ELISA检测方法的建立   总被引：1，自引：0，他引：1  

李坤  温国元  罗青平  商雨  艾地云  罗玲  王红琳  杨峻  邵华斌  程国富 《华中农业大学学报》2009,28(6)

建立了检测猪圆环病毒2型血清抗体的间接ELISA方法,并初步应用于临床血清样品的检测.用PCR方法从PCV2 HBZX株中获得截短的核衣壳(capsid,Cap)基因,将该基因克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,构建重组表达质粒pET-Cap,将该重组质粒转化宿主菌E.coli BL21-CodonPlus(DE3),用IPTG诱导,SDS-PAGE和Western-blot鉴定蛋白的正确表达,表达蛋白cap分子质量为42 ku,可与6×HIS抗体反应;KCl预染切胶纯化目的蛋白,以其为抗原建立检测PCV2感染猪血清抗体的间接ELISA方法.ELISA检测5份血清样品结果变异系数均小于10%.用该方法分别检测湖北、河南等地的91份临床血清样品,阳性率为25%～100%.上述结果表明,所制备的目的蛋白具有较高的纯度和良好的免疫原性,所建立的间接ELISA检测抗体方法,具有良好的重复性,初步临床试用效果良好.  相似文献   

禽霍乱-新城疫二联油乳剂灭活疫苗研究 (Ⅳ报)——疫苗的田间试验     

王红琳  杨峻  邵华斌  温国元  艾地云  罗玲  罗青平  张蓉蓉  张琳 《安徽农业科学》2009,37(10):4513-4516

[目的]评价禽霍乱-新城疫二联油乳剂灭活疫苗的临床应用效果,为联合防制禽霍乱和新城疫提供条件。[方法]将禽A型多杀性巴氏杆菌1502强毒株与鸡新城疫病毒La Sota弱毒株混合,制备成5批合格的二联油乳剂灭活苗,用于鸡、鸭和鹅的田间安全性和免疫保护试验。[结果]田间安全性试验表明,免疫鸡、鸭和鹅均未出现不良反应;鸡的田间免疫效力试验表明,7～14日龄雏鸡和60～90日龄青年鸡免疫3周后新城疫血凝抑制（ND-HI）抗体效价均比对照组高2～3 log2,可持续4个月以上,禽多杀性巴氏杆菌攻毒保护率均达到75.0%以上,免疫效力可持续6个月;鸭和鹅的田间免疫效力试验表明,接种3周后免疫组ND-HI抗体效价均≥4.2 log2,对照组均≤2 log2;鸭、鹅的禽多杀性巴氏杆菌攻毒保护率分别在75.0%和62.5%以上。[结论]该二联苗免疫禽类安全可靠,具有良好的免疫效果。  相似文献   

新城疫活疫苗HB92克隆株的筛选、纯化与细胞培养特性观察     

杨峻  邵华斌  温国元  王红琳  艾地云  罗青平  张蓉蓉  罗玲  廖永洪 《湖北农业科学》2009,48(6)

将引进的新城疫V4无毒耐热毒株连续用鸡胚传代.每次挑选48～96 h有明显病变的死亡鸡胚,取其尿囊液毒于-20℃保存,观察V4毒株对鸡胚毒力的病理变化.结果显示,经过20代次的鸡胚毒力筛选.V4毒株对鸡胚的致死率从小于10%上升至20%以上,接种后120 h的活胚有明显地萎缩症状.将鸡胚20代次以上筛选的V4病毒液在鸡胚成纤维细胞上传代培养,并进行蚀斑筛选纯化病毒,直到第5代才出现明显地细胞病变.使用二层琼脂进行病毒的蚀斑分析,第二层琼脂糖在第一层凝固后72 h覆盖,8 h后NDV鸡胚成纤维细胞适应株的蚀斑出现.蚀斑大小直径在1～2 mm变化.通过对NDV V4鸡胚毒力筛选和蚀斑纯化.获得了一株蚀斑克隆株(NDV HB92).  相似文献   

猪高热病综合症流行病学调查与病原分离鉴定   总被引：2，自引：0，他引：2  

杨峻  温国元  罗青平  张蓉蓉  艾地云  王红琳  罗玲  邵华斌 《湖北农业科学》2008,47(11)

对2006～2007年湖北省部分地区的猪高热病综合症的流行情况进行了实地调查和实验室诊断.共调查7个地市147个养猪场和养猪户,发病猪有67 040头,发病死亡27477头,发病死亡率41%.273份病料PCR检测呈阳性结果,其中猪瘟的阳性率为41%(86/210)、蓝耳痛为83.2%(213/256)、伪狂犬病为33.8%(48/142)、猪圆环病毒为70.5%(189/268).从采集的病料中分别分离到3株蓝耳病病毒、2株猪圆环病Ⅱ型病毒和2株猪流感病毒;分离到25株猪链球菌、36株大肠杆菌、13株副猪嗜血杆菌和29株巴氏杆菌等病原菌.  相似文献   

多种单味中药对禽多杀性巴氏杆菌C48-1的抑菌作用研究     

蔡萌  张文婷  汪最  汪琛  邵华斌  罗青平  江涛 《湖北农业科学》2019,58(7)

试验选取厚朴酚、黄藤素、秦皮、大黄素和黄柏5种中药提取物,采用药敏纸片法和布氏肉汤稀释法对禽多杀性巴氏杆菌C48-1进行抑菌试验。体外抑菌试验结果表明,厚朴酚、黄藤素和秦皮提取物的抑菌圈大小分别为22.0、11.3、15.6 mm,最小抑菌浓度(MIC)分别为8、256、64μg/mL,最小杀菌浓度(MBC)分别为16、512、256μg/mL;大黄素和黄柏提取物对C48-1没有抑菌作用;厚朴酚的抑菌作用最强,秦皮次之,黄藤素最弱。培养禽多杀性巴氏杆菌C48-1时,培养基中加入厚朴酚含量为6μg/mL时,细菌的生长速度相比对照组受到明显抑制,当药物浓度为MIC(8μg/mL)值时,禽多杀性巴氏杆菌C48-1生长被完全抑制。从体内抑菌试验结果可知,厚朴酚对禽多杀性巴氏杆菌C48-1侵染江汉鸡的保护力最高,为50%。该结果为进一步研制中药制剂预防禽多杀性巴氏杆菌病提供了理论基础。  相似文献   

肉鸡养殖中兽药的合理使用     

艾地云  罗玲  邵华斌  杨峻 《湖北畜牧兽医》2010,(10):32-33

<正>科学、高效、安全地使用兽药,不但能及时预防和治疗动物疾病,提高养殖效益,而且对控制和减少药物残留、提高动物产品质量具有重要意义。肉鸡养殖中兽药的合理使用包括正确使用药物和正确选择药物。  相似文献