高渗溶液条件下猪肺炎支原体形态和活性变化的研究     

王占伟刘茂军  冯志新熊褀琰白方方  邵国青 《中国农学通报》2012,28(20):93-97

为研究高渗溶液对猪肺炎支原体(Mhp)形态、大小,以及活力的影响。Mhp经终浓度为1.8% NaCl的高渗溶液分别作用1、2、4、6、8 min后,分别进行染色镜检、粒径分析仪测定粒径、CCU测定和PCR鉴定。结果表明：在高渗溶液作用不同时间后,从2 min开始,Mhp皱缩变圆,且直径变小,菌体数量也快速变少至消失;测定的终CCU降低了一个梯度,且时间延长了1天;在作用不同时间后的样品中,PCR均能扩增出Mhp目的条带。经终浓度为1.8% NaCl作用1~6 min,Mhp的形态大小发生了变化,且具有活性,这将为Mhp经肌肉注射进入血液循环研究和猪支原体肺炎活疫苗的新免疫途径研究提供参考数据。  相似文献   

免疫刺激复合物基质为佐剂的猪支原体肺炎活疫苗肌肉注射免疫效果评价   总被引：1，自引：0，他引：1  

熊祺琰  王占伟  甘源  孔猛  冯志新  刘茂军  邵国青 《江苏农业学报》2011,27(6):1310-1315

试验旨在探讨免疫刺激复合物基质(ISCOM-基质)作为猪支原体肺炎168株活疫苗佐剂使用的可行性,并考察其配合疫苗肌肉注射时的免疫效力和攻毒保护效力.首先以Quil A、胆固醇和磷脂为原料,采用透析法制备ISCOM-基质,然后将制备好的ISCOM-基质与活疫苗混合孵育,检验其对活疫苗的毒性.于体外用ISCOM -mat...  相似文献   

新型鹅黄病毒JS804毒株的分离与鉴定   总被引：7，自引：0，他引：7  

黄欣梅  李银  赵冬敏  刘宇卓  张敬峰  何孔旺  侯继波  钮慧敏  李彬  温立斌  王永山  邵国青  张康宁  朱江宁  吴东明  高磊 《江苏农业学报》2011,27(2)

2010年4月至11月,江苏等地鸭、鹅发生了一种以产蛋率、采食量显著下降,出现脑炎样神经症状为特征的传染病.对发病鹅进行剖检观察,鸭胚尿囊腔途径接种发病鹅病料分离病原,电镜观察病毒粒子.对健康鹅接种分离病毒进行动物回归试验.在病毒核酸背景未知的情况下,应用非序列依赖性单引物扩增法结合DNA酶处理(DNase-sequence independent single primer amplificmion,DNase-SISPA)对病原基因进行扩增,并在此基础上设计了1对特异性引物对病毒基因进行PCR扩增.剖检结果发现病鹅的脑膜、肺脏、肝脏、心脏、卵巢等多器官出血,脾脏肿大坏死.含毒鸭胚尿囊膜超薄切片电镜观察显示:病毒粒子直径为50～60 nm.动物回归试验成功复制出该病并分离到病毒.应用DNase-SISPA方法发现了3个病毒相关基因片段,经序列比对分析,与黄病毒属(Flavivirus)坦布苏病毒(Tembusu virus)基因序列有很高的同源性,分别为96%、88%、93%.据此设计特异性引物扩增出一段985 bp基因片段,该片段与黄病毒属坦布苏病毒E基因的核苷酸同源性为91%,氨基酸同源性为97%.将分离的鹅黄病毒毒株命名为Goose/Jiangsu/804/2010(简称JS804).研究结果表明:此次鸭、鹅新发疫病的病原为一种新的黄病毒.  相似文献   

猪支原体肺炎活疫苗（168株）肺内免疫机制研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

冯志新  邵国青 《中国兽药杂志》2012,46(8):4-7,19

为研究猪支原体肺炎活疫苗(168株)的免疫机制,通过肺内接种免疫5 ～ 10日龄仔猪,并于免疫后不同时间点检测血清中IgG抗体效价、全血中淋巴细胞转化效率、呼吸道局部的IFN-γ浓度和特异性SIgA滴度,于免疫后28 d剖杀采集呼吸道上皮组织,通过扫描电镜法与原位杂交检测法观察疫苗株在呼吸道的存留以及对纤毛的影响情况.结果发现,免疫后猪血液中淋巴细胞转化增强1.52～2.01倍,支气管表面IFN-γ浓度和特异性SIgA滴度持续增加,但血清抗体一直未检测到.扫描电镜与原位杂交检测结果发现疫苗株能有效地黏附在支气管纤毛上皮细胞上,但对纤毛的影响较小.由此表明,猪支原体肺炎活疫苗(168株)通过肺内免疫可有效激活全身细胞免疫及呼吸道局部的黏膜免疫与细胞免疫反应,而且还可以通过黏附支气管纤毛上皮细胞产生占位效应而对上皮组织不产生损伤.  相似文献   

猪支原体肺炎疫苗的免疫原理及应用效果概述     

华利忠  邵国青 《中国兽药杂志》2012,46(8):58-61

猪支原体肺炎灭活疫苗和弱毒活疫苗的临床应用均有很好的效果。简述了猪支原体肺炎灭活疫苗以体液免疫为主、弱毒活疫苗以细胞免疫和粘膜免疫为主的不同免疫学特性,分析认为占位效应可能是猪支原体肺炎弱毒活疫苗独特的免疫原理之一,提出了灭活疫苗可能的改良方向及保证弱毒疫苗高效免疫的三项措施,以期为猪支原体肺炎防控提供参考。  相似文献   

混合感染背景下猪呼吸道病的免疫与控制     

邵国青  华利忠 《中国兽药杂志》2012,46(Z1)

混合感染已成为我国规模化猪场的普遍现象,猪呼吸道病和猪呼吸系统综合症(PRDC)为规模化养猪生产的主要难题.猪气喘病作为原发性关键疾病,该病的控制对于养猪业的发展至关重要.文章对混合感染背景及猪呼吸道病的发病特点、控制方法做了简介,重点介绍疫苗、敏感药物及管理在猪呼吸道病的控制和净化中的作用,提出首先控制好继发性细菌感染是做好猪场PRDC预防和控制工作的重要手段.  相似文献   

渗透压对猪肺炎支原体168株的影响(英文)     

王占伟  刘茂军  冯志新  熊褀琰  白方方  邵国青 《农业科学与技术》2012,(10):2051-2054,2069

[目的]研究高渗溶液对猪肺炎支原体(Mhp)形态、大小以及培养时间和菌体活力的影响。[方法]将Mhp用终浓度为1.8%的NaCl高渗溶液分别作用1、2、4、6和8min后,对其进行染色和镜检,测定其粒径和CCU(Colour Change Unit),并进行PCR鉴定。[结果]在高渗溶液作用不同时间后,从2min开始,Mhp皱缩变圆,且直径变小,菌体数量也快速变少至消失,测定的终CCU降低了一个梯度,且时间延长了1d;在作用不同时间的样品中,PCR均能扩增出Mhp目的条带。经1.8%NaCl溶液作用1～6min,Mhp的形态大小发生了变化,但仍具有活性。[结论]该研究为Mhp经肌肉注射进入血液循环的研究以及猪支原体肺炎活疫苗的新免疫途径研究提供了参考数据。  相似文献   

猪肺炎支原体斑点杂交检测方法的建立及应用   总被引：1，自引：0，他引：1  

李桂兰  张映  邵国青 《山西农业大学学报(自然科学版)》2012,32(6)

为建立猪肺炎支原体斑点杂交检测方法,并用于猪肺样品的检测,根据GenBank中登录的猪肺炎支原体(Mhp)P36基因序列,设计并合成一条地高辛标记的DNA寡核苷酸探针。进行Mhp斑点杂交反应,建立最佳反应体系和反应条件,对该方法进行特异性和敏感性试验,并采用最佳反应体系和反应条件在尼龙膜上对猪肺组织样品进行检测。结果表明,该检测方法可有效从可疑病料的猪肺组织中检出Mhp感染,检出率为39.5%。本研究建立的Mhp斑点杂交检测方法快速、敏感、特异,对Mhp的临床检测具有较好的应用价值。  相似文献   

抗猪肺炎支原体特异性P36蛋白单克隆抗体的制备与鉴定   总被引：1，自引：0，他引：1  

胡茂志  焦新安  潘志明  邵国青  刘秀梵 《中国兽医学报》2006,26(6):619-621

表达P36基因的重组菌BL21(6P-1-P36)经诱导表达,超声波裂解后高速离心,分别收集上清和沉淀。可溶性表达产物亲和层析纯化后用于单抗筛选;同时,用GST-P36包涵体抗原腹腔注射免疫BALB/c小鼠(400μg/只)。利用淋巴细胞杂交瘤技术,获得了1株能分泌特异性抗体的杂交瘤细胞株5A7-2。生物学特性鉴定表明,腹水单抗的间接ELISA效价为1∶2.5×106;免疫球蛋白亚类为IgG2a。免疫印迹结果显示,腹水单抗能与GST-P36融合蛋白反应而不与谷胱苷肽转移酶(GST)反应,并且在猪肺炎支原体(Mycop lasma hyopneumoniae,Mhp)蛋白36000位置也有明显的条带,说明5A7-2所分泌的是针对MhpP36蛋白的单抗。P36蛋白是Mhp种特异性蛋白,其单克隆抗体的制备,为Mhp种特异性检测方法的建立奠定了基础。  相似文献   

替米考星预混剂对人工诱发猪气喘病的疗效试验     

赵永前  刘茂军  周勇歧  刘冬霞  邵国青 《畜牧与兽医》2007,39(11):60-62

本试验利用人工诱发猪气喘病的动物模型,设计高、中、低剂量(剂量分别为400、200、100mg/kg饲料)的替米考星治疗试验组和阳性对照组(不用药、强毒感染)、阴性对照组(不用药不感染),通过观察、检测试验猪在试验前后的增重变化和试验治疗后肺部病变率来判定替米考星的治疗效果。结果成功建立了人工诱发的猪气喘病模型,替米考星高、中剂量组的治疗效果显著,在增重和肺部病变率方面和阴性对照组差异不显著(P>0.05),而替米考星低剂量组的治疗效果略差,在增重方面和阴性对照组差异不显著(P>0.05),但在肺部病变率方面和阴性对照组差异显著(P<0.05)。这些结果为临床合理地使用替米考星防治猪气喘病提供了科学依据。  相似文献