猪细小病毒疫苗研究进展   总被引：7，自引：0，他引：7  

吕建强  陈焕春  赵俊龙 《动物医学进展》2002,23(1):31-34

猪细小病毒是引起猪繁殖障碍的主要病原之一。在世界范围内造成了巨大的经济损失，本文不常规疫苗，免疫程序及新型疫苗的研究作了综述，特别是猪细小病毒VP2基因在基因工程疫苗及核酸疫苗方面的应用前景的介绍，对其深入的研究甚有参考价值。  相似文献   

伪狂犬病病毒鄂A株gG^—／LacZ^＋突变株的构建   总被引：4，自引：0，他引：4  

周复春  陈焕春  方六荣  周锐  吴斌  何启盖 《畜牧兽医学报》2001,32(2):134-138

以从湖北某猪场分离鉴定的鄂A株为亲本，提取其基因组DNA，克隆含gG基因的SphI/KpnI片段，然后将LacZ基因融合到gG启动子下游，得到重组质粒pUSKZ,将重组质粒与鄂A株基因组共转染PK－15细胞，待细胞完全病变后，在X－gal存在下，作蓝斑筛选纯化。经斑点杂交和PCR扩增证实得到的是基因型为gG^-/LacZ^ 的重组伪狂犬病病毒。  相似文献   

BHV-1gG-／tk-／GM-CSF＋重组病毒的构建及其免疫效果的评价     

纪素坤  邓明亮  费文涛  胡长敏  陈颖钰  郭爱珍  陈焕春 《中国奶牛》2013,(17):3-8

通过引入免疫增强因子GM-CSF,提高重组病毒的免疫原性。将牛GM-CSF克隆到pcDNA3．1载体中,构建GM-CSF基因表达盒;将tk基因上游同源臂、GM-CSF基因表达盒、tk基因下游同源臂克到pcDNA3．1载体中,得到转移栽体pTK-GM-CSF。将亲本病毒BHV-1gG-／TK-／EGFP’基因组与转移载体pTK-GM-csF采用磷酸钙法共转染MDBK~g,得到重组病毒BHV-1gG／TK-／GM-csF’。并对重组病毒的生物学特性和对日本大耳白兔的免疫原性进行了评价。利用PCR和RT-PCR证实GM-CSF基因表达盒已正确插入重组病毒的tk基因位置,并具有转录活性。亲本株和重组株的空斑形态、空斑直径大小无明显差异;两者病毒滴度无明显变化．生长曲线相似;体外遗传稳定性良好。兔体试验表明,在免疫早期重组毒株能产生较亲本株更高水平的IFN-B（P〈0.05）。但中和抗体水平、攻毒后的临床症状及病毒排毒时间等各项指标检测表明,亲本株和重组毒株之间无明显差异。在免疫早期重组株刺激机体产生的IFN-p高于亲本株,具有-定的应用前景。  相似文献   

天然免疫与生物安全在未来疫病防控中的重要性——天然免疫与疫病防控新策略     

陈焕春 《兽医导刊》2013,(12):4-6

目前．养殖业正在经历新一轮的变革,产业升级是不可逆转的形势,整个行业都倍受疫病压力．将来疫病防控的发展趋势如何7在2013年10月21～25日,由中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会与军事医学院军事兽医研究所主办,的“中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会成立三十周年庆典、第八届全国会员代表大会暨第十五次学术研讨会”上众专家院士给出了共同的答案：建立或修复动物机体的天然免疫屏障,减少药物或疫苗的使用量．降低了机体排毒和病毒细菌等传播的可能性,是今后疫病防控的趋势,势必将成为疫病防控的主流趋势．动保行业的转型和变革或将到来。  相似文献   

我国农业科技创新与高等农业教育改革     

陈焕春  陈新忠 《中国农业教育》2019,(4)

改革开放40年来,我国农业科技取得了世界瞩目的成就,但也存在诸多问题,危机重重。文章梳理了改革开放40年来我国农业科技的主要成就与难题,分析了新常态下我国农业科技面临的形势和主要任务,提出了新常态下促进农业科技创新的我国高等农业教育改革建议。文章提出,我国农业与发达国家相比还存在较大差距,面临着"效益低下、食品安全问题突出、环境污染严重"三大难题。面对挑战和机遇,未来我国农业科技主要应从农业新品种的培育与繁殖技术创新、动植物病虫害防控技术创新、肥料及饲料营养技术创新、农业废异物资源化利用创新、农业设施设备创新、食品加工创新等方面进行突破;新常态下,振兴乡村、做强农业现代化,我国高等农业教育必须构建高水平的农业人才培养体系,建立中国农业与世界农业的生命共同体,对高等农业教育的培养目标、培养平台、本科生招生、研究生招生等进行大刀阔斧的改革。  相似文献   

检测多杀性巴氏杆菌毒素抗体的单抗竞争ELISA方法的建立   总被引：1，自引：1，他引：0  

卢顺  向敏  吴斌  赵战勤  汤细彪  但汉并  张建民  何华  陈焕春 《农业生物技术学报》2008,16(4)

本研究以纯化的多杀性巴氏杆菌毒素基因片段的原核表达产物作为抗原免疫小鼠制备单抗,并利用表达蛋白和多杀性巴氏杆菌毒素单抗酶结合物建立了竞争ELISA方法检测多杀性巴氏杆菌毒素抗体。经过研究确定抗原包被浓度为223ng／mL,待检血清最佳稀释度为1：2,酶标单抗工作浓度为1：3200,血清抑制率大于50%为阳性。应用单抗竞争ELISA和细胞毒性中和试验同时对82份血清进行猪多杀性巴氏杆菌毒素抗体检测,竞争ELISA的检出率为40.2％,细胞毒性中和试验检出率为36.6％,两者符合率达91.5％。试验结果表明,该ELISA方法特异性强,敏感性高,稳定性和重复性好,操作简便。本方法的建立在实验室诊断的标准化、猪群萎缩性鼻炎疫苗免疫效果的评价及流行病学调查方面具有应用价值。  相似文献   

伪狂犬病毒在潜伏感染猪体内的组织分布   总被引：2，自引：0，他引：2  

龙晓婷  刘俊磊  郭洪  习杨  邱德新  陈焕春  周锐 《畜牧兽医学报》2008,39(5):645-651

潜伏感染是猪伪狂犬病防治和净化工作中的重要障碍之一。本研究用伪狂犬病毒（PRV）gG-/LacZ＋标记毒株感染经过PRV灭活疫苗免疫的PRV阴性仔猪,建立了猪伪狂犬病毒潜伏感染动物模型,再用地塞米松激活PRV在猪体内的潜伏感染。运用免疫组织化学SABC染色法研究了PRV在潜伏感染猪和潜伏感染激活猪体内部分组织的分布情况。结果显示,阳性细胞主要分布在神经系统的大脑、小脑、脑干、三叉神经和视神经以及非神经系统的扁桃体、肺和肾等部位。阳性细胞数量随着攻毒后时间的发展呈现减少的趋势,而注射地塞米松后,阳性细胞数量在上述组织中显著增加。  相似文献   

猪链球菌2型昆明鼠动物病理模型的建立   总被引：4，自引：0，他引：4  

刘国平  梁雄燕  李江华  杨小林  程太平  金升藻  唐登华  吴斌  陈焕春 《中国兽医学报》2008,28(7)

为研究猪链球菌2型的病原特性、致病机理及对其疫苗与救治药物效果评价提供平台,选用20~25 g健康昆明鼠,以猪链球菌2型山东株为病原,以腹腔注射为感染途径,对猪链球菌2型昆明鼠病理模型进行了探讨(试验随机分为5组,每组10只)。结果表明,感染鼠能表现出典型的临床症状及病理变化,具有较好的重复性,且临床症状及病理变化与本动物猪类似。剖检后从脑、肺,以及胸腔、腹腔和心包积液中都可以分离出猪链球菌2型,分离菌株生物学特性与攻毒菌株一致。按Reed-Munch法计算此菌株对昆明鼠的半数致死量为7×108cfu。感染后2周的血清平均抗体水平为1∶64。这说明昆明鼠能够很好地用作猪链球菌2型的动物病理模型。  相似文献   

伪狂犬病病毒Ea株UL18基因的克隆、序列分析及表达     

薛念波  肖少波  江云波  常天明  刘曼莉  赵骞  罗锐  陈焕春  方六荣 《中国预防兽医学报》2008,30(4):255-259

本研究以伪狂犬病病毒Ea株基因组DNA为模板,PCR扩增含ULl8全长基因的片段并克隆至pMDl8-T载体,采用双脱氧末端终止法测序.序列分析显示ULl8全长891 bp,可编码297个氨基酸.将该基因亚克隆到原核表达栽体pQE.82L的6×His标签下游,获得原核表达质粒pQE-UL18,转化大肠杆菌DH5α,经IPTG诱导在大肠杆菌中成功表达,表达的融合蛋白6 × His-UL18的分子量约为33 ku.Western blot证实,表达的融合蛋白能与抗6×His的单抗发生特异性反应.进一步将UL18基因插入真核表达栽体pEGFP-N1中EGFP基因的5'端,获得与EGFP融合表达的真核表达质粒pEGFP-UL18,转染HeLa细胞,通过激光共聚焦显微镜观察发现,转染后24 h融合蛋白EGFP-UL18主要定位于细胞浆,仅有部分定位于细胞核,而48 h时则主要定位在细胞核.但对照载体pEGFP.N1转染细胞的荧光一直呈弥散型分布于整个细胞中.  相似文献   

鸡传染性支气管炎病毒S1基因与猪IgG Fc基因在HeLa细胞中的融合表达     

张明富  陈汉阳  彭博  佟铁俦  陈焕春  郭爱珍 《中国兽医学报》2008,28(10)

根据GenBank中发表的猪的IgG Fc段基因及鸡传染性支气管炎病毒(IBV)S1基因序列,设计并合成引物.以猪肝组织总RNA为模板扩增出猪IgG Fc基因,以舍全长IBV M41 S基因的质粒为模板扩增出IBV S1基因,分别克隆至T裁体.DNA测序表明,所获得的IBV S1基因大小为1.5 kb,lgG Fc大小为1 kb,序列正确.将IBVS1与IgG Fc基因串连,插入舍有人组织型纤维蛋白溶酶原激活物分泌信号肽序列(tPA)的真核表达载体pcDNA3.1-tPA上,在HeLa细胞上进行瞬时融合表迭.经免疫光和斑点杂交检测,表达产物同时具有IBV S1蛋白和IgG Fe活性.  相似文献