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将187枚山羊胚胎按如下方式培养在GEF饲养层上:①桑椹胚直接培养;②囊胚直接培养;③囊胚去透明带后培养;④囊胚去透明带并被撕裂成碎片后培养;⑤囊胚去透明带后胰蛋白酶消化成小细胞团培养。将上述培养所获取的18个内细胞团(ICM)均分为2组,第1组始终从生长物中挑取较为浓密的类ES细胞团传代,第2组始终让培养物生长到铺满培养皿(瓶)底再传代。结果显示:①桑椹胚、囊胚直接培养以及囊胚被消化成小细胞团后培养,均未获得ICM;囊胚去透明带后培养,获得ICM的数量占参试囊胚数的30%;囊胚去透明带并被撕裂成碎片后培养,获得ICM的数量占参试囊胚数的60%。②始终从培养物中挑取类ES细胞团进行传代,传至第4代后已无细胞可传;而将培养物培养至长满培养皿(瓶)底后再一起传代,细胞可传11代以上,且其中的类ES细胞团呈大量扩增趋势。 相似文献
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胚胎干细胞(Embryonic stem cell,ES细胞)是从早期哺乳类动物胚胎或原始生殖细胞分离的具有全能性的细胞系。在体外分化抑制培养条件下,具有保持未分化的状态及无限增殖的能力。自Evans和Kaufman首次建立小鼠ES细胞系以来,各种动物ES细胞分离与克隆成为国际生物科学领域的热点课题之一。ES细胞可广泛应用于嵌合体的制备和克隆动物的生产。利用ES细胞遗传操作,可生产转基因动物,进行细胞基因结构与功能的关系以及细胞分化机制的研究。本研究采用不同培养方式对昆明小鼠类ES细胞进行分离及培养,供相关研究者参考。 相似文献
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目的:构建稳定表达猪PBD-1的转基因细胞系,为稳定生产猪PBD-1并将其应用于新型兽药的开发提供生产细胞源。方法:真核表达载体pIRES2-EGFP-PBD-1经酶切和测序鉴定后,用脂质体介导法转染marc-145细胞,通过不同浓度的G418加压筛选,和进一步采用单个克隆法筛选,建立稳定转染的marc-145细胞系,用RT-PCR及抑菌试验检测PBD-1的表达。结果:建立了稳定转染的marc-145细胞系,成功地表达目的基因,其培养上清液及细胞冻融液具有抑菌作用。结论:利用真核表达载体pIRES2-EGFP-PBD-1稳定转染marc-145细胞系,为进一步研究猪PBD-1的生物学特性及其在兽用生物制品上的应用奠定了基础。 相似文献
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初生奶公牛采血时间及体重与采血量、血清量等指标的关系 总被引:2,自引:1,他引:1
据统计,到2003年底,全国奶牛饲养总量已经达到800万头。这800万头的存栏奶牛每年可繁殖后代约500万头,其中约250万头为雄性后代,这些雄性后代不具备产奶能力,也很少用于继续饲养。目前,国内外对这种资源的利用主要是制造培养用血清。据估计:我国每年对培养用血清的总需求量在20亿ml以上,主要为质量较优的新生牛血清。国家药品监督管理局在2000年颁布了《中国生物制品原辅材料质量控制标准》,其中规定了牛血清质量标准的8项指标。在新生牛血清生产的实际中,有许多因素会影响血清的生产量与血清质量。但在具体因素对血清生产的影响程度方面,报道的研究资料则较少。本项研究在这方面作了一些初步探讨,供生产者参考。 相似文献
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超数排卵和同步发情是胚胎移植等胚胎生物技术的核心技术环节之一。目前,尽管超数排卵的方法已广泛应用,但现有超排方法的获卵率还不十分稳定,这在很大程度上影响了胚胎移植、转基因动物的生产等生物技术的成功率。FSH超排山羊效果优于PMSG,故目前山羊超排多用FSH多次注射法。 相似文献
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牛睾丸原代细胞是目前生产细胞型猪瘟弱毒疫苗的最主要细胞源.全国每年用于生产猪瘟弱毒疫苗的牛睾丸约为70万对,但牛的产仔具有相对严格的季节性,且同一个牛场每天的睾丸产量是极其有限的.这给疫苗生产厂家批量收集睾丸以及调剂生产周期等方面带来了困难.另外,经常不断的从外界送入生鲜睾丸组织,增加了药品生产质量管理规范(GMP)车间的污染频率,因此,进入GMP车间用于生产猪瘟疫苗的牛睾丸细胞最好是经检测无污染并能产出高效价病毒的合格细胞.但是,牛睾丸细胞传代次数是有限的.统计数据表明,牛睾丸细胞接种猪瘟病毒只适合传5代次[1]. 相似文献
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