新型鸭呼肠孤病毒DH13株结构蛋白σB的原核表达及免疫原性分析     

杨惠湖  黄惠兰  袁生  李文俊  姚鑫炎  张玉倩  梁昭平  黄淑坚  张雪莲 《中国畜牧兽医》2021,48(11):4204-4212

本研究旨在利用原核表达系统表达新型鸭呼肠孤病毒（NDRV） DH13株重组σB蛋白,并检测其免疫原性,为NDRV基因工程疫苗研制等提供物质材料。采用RT-PCR方法扩增获得NDRV σB基因,构建原核表达重组质粒pET-30a-σB和pET-32a-σB,将2个重组质粒转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞,利用IPTG诱导获得相应的重组蛋白,通过SDS-PAGE分析重组蛋白的表达形式。纯化无His的σB蛋白,并以此蛋白作为免疫原免疫新西兰白兔,制备兔源多克隆抗体。利用Ni²⁺柱亲和层析法纯化含His的σB蛋白,以此蛋白作为检测原,通过间接ELISA方法测定兔源多克隆抗体效价;Western blotting鉴定多克隆抗体与重组蛋白的特异性识别能力。结果显示,PCR扩增获得大小约为1 100 bp的σB基因片段。SDS-PAGE结果显示,高效表达出了2种重组σB蛋白,大小分别约为41和46 ku,均以包涵体形式存在。间接ELISA结果显示,制备的多克隆抗体效价达1∶204 800,能特异性地识别原核表达的重组蛋白,表明重组无His的σB蛋白具有良好的免疫原性。Western blotting特异性鉴定结果显示,含His的σB蛋白和无His的σB蛋白均与制备的兔源多克隆抗体发生特异性反应,表明原核表达得到的重组σB蛋白具备良好的反应原性。本试验利用原核表达系统成功地表达出了重组σB蛋白,并证实了重组NDRV σB蛋白具有良好的免疫原性及反应原性,该结果将有助于后续对NDRV σB蛋白生物学功能的鉴定、NDRV诊断用抗原的制备及NDRV新型疫苗的研制。  相似文献   

我国柴油轿车的发展现状及展望   总被引：2，自引：0，他引：2  

吴修文  孙玉娟  袁修坤  苏传明 《农业装备与车辆工程》2007,(1):7-9

随着汽车工业的不断发展，轿车动力柴油化已成为行业发展的必然。总结了我国柴油轿车的发展现状，指出了柴油轿车的优势，论述了制约柴油轿车发展的因素，提出了促进柴油轿车未来发展的几点建议。  相似文献   

基于SWAT模型的西江流域径流模拟研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

袁媛  雷晓辉  蒋云钟  宋万祯 《中国农村水利水电》2015,(3):14-17,21

采用SWAT(Soil and Water Assessment Tool)模型,在整个珠江流域构建分布式水文模型,对西江流域1951~2008年的月径流过程进行模拟。选取西江流域的迁江、柳州、武宣3个水文站的径流数据,利用SWAT模型自带的敏感性分析模块和自动率定模块,采用LH-OAT敏感性分析方法和SCE-UA算法分别对选取的各参数进行敏感性分析和参数率定,并对率定模型进行验证。敏感性分析结果表明,不同的参数对流域月径流过程表现出不同程度的敏感度,其中CN2、ESCO、SOL_AWC、CH_K2和ALPHA_BF的敏感度较高,是较敏感因子。从率定和验证结果来看,3个水文站的径流模拟效果均较好,Nash-Suttcliffe效率系数ENS均在0.75以上,其中柳州站和武宣站率定期和验证期的ENS在0.8以上。SWAT分布式水文模型在西江流域月径流模拟中的应用效果良好。  相似文献   

电压空间矢量脉宽调制的简单算法     

袁帆 《湖南农机》2015,(4)

在电压空间矢量脉宽调制(SVPWM)控制技术原理的基础上,提出了一种简单快速算法,该算法只有普通的四则运算,计算变得非常简单,消除了常规的空间矢量控制算法中由于三角函数和无理数的近似计算而带来的计算误差及影响计算精度和速度的缺点,使结果更加准确。因而更适合应用于基于DSP 的数字化控制。理论分析和大量的MATLAB仿真结果表明,该算法具有谐波含量低、直流电压利用率高的优点。  相似文献   

鞭毛素fliC基因的缺失对肠炎沙门氏菌生物膜形成的影响     

朱春红  董立伟  张江英  谢静  李芙蓉  陆广富  朱国强 《中国预防兽医学报》2016,(4):303-306

为研究肠炎沙门氏菌鞭毛素对其生物膜形成的影响,本研究利用构建的肠炎沙门氏菌鞭毛素编码基因fliC缺失株,检测其缺失性修饰后的生长表型变化及其对生物膜形成的影响。结果显示在表型检测试验中,fliC缺失株在电镜下观察呈无鞭毛形态,在半固体培养基上缺乏运动性,并且不能与肠炎沙门氏菌鞭毛单克隆抗体发生可见的凝集反应。生物膜形成能力定性试验结果表明,肠炎沙门氏菌fliC缺失株生物膜形成大量减少,并且生物膜脆弱,而其回补株能够较好地恢复生物膜的形成;生物膜定量结果进一步证明,鞭毛素fliC基因缺失后肠炎沙门氏菌形成生物膜的能力下降50%左右,以上结果显示鞭毛在肠炎沙门氏菌体外生物膜形成中具有重要作用。  相似文献   

蒙古口蘑担孢子萌发及初生菌丝生物学特性研究   总被引：1，自引：0，他引：1  

刘晓婷  郭九峰  王淑妍  李亚娇  袁丽丽  那日 《北方园艺》2016,(16):136-141

以蒙古口蘑(Tricholoma mongolicum)为试材,采用光学显微镜观察担孢子及菌丝体形态的方法,研究了不同培养基对蒙古口蘑担孢子萌发及初生菌丝生长情况的影响。结果表明:蒙古口蘑担孢子呈肾形或椭圆形,大小约为(4~6)μm×(6~9)μm;担孢子在培养基上萌发出肉眼可见的微小菌落至少需要1周的时间;MS培养基中添加1.5g·L~(-1)酵母粉和1.5g·L~(-1)酸水解酪蛋白,对担孢子萌发有明显的促进作用;根据初生菌丝菌落生长速度和菌落形态等有关特征,发现有5种明显不同类型的初生菌丝,分别为菌丝绒毛型、菌丝贴生型、菌丝稀薄型、成簇生长型、缓慢生长型。另外,采用rDNA-ITS方法、PCR产物测序及NCBI-Blast比对,证明试验材料为蒙古口蘑。该试验提供了一种食用菌菌丝体直接PCR的方法,为进行有关食用菌DNA分子方面研究提供了便利;该研究结果可为蒙古口蘑担孢子交配型研究提供依据,为珍稀食用菌研究积累资料。  相似文献   

大葱雄性不育系的雄蕊特征及花药细胞学研究     

冯大领  王丽乔  张巍巍  赵玉靖  付雅丽  袁瑞江  王其鹏 《北方园艺》2016,(23):1-6

以大葱不育系和保持系为试材,对其进行了形态学和细胞学观察,以揭示大葱雄性不育系和保持系的雄蕊鉴别特征及雄性不育发生的细胞学机制。结果表明:大葱不育系的花药外形表现为干瘪,无花粉粒散出,花粉囊内的花粉粒无活性;保持系的花药外形饱满,成熟后开裂,有黄色花粉粒散出,花粉囊内的花粉粒活力为91.65%;通过对大葱不育系和保持系花药发育的细胞学比较发现,大葱不育系的花粉败育原因体现在3个方面:一是绒毡层细胞的提早液泡化并解体,解体时间始于花粉母细胞时期,到单核花粉粒时期几乎完全消失,不能为小孢子发育提供必需的营养物质;二是绒毡层细胞内的原生质浓度低,无明显的多核现象,该绒毡层细胞的异常也造成营养物质供应不足,引起花粉粒败育;三是在单核花粉粒到成熟花粉粒发育过程中,有些花药的药隔细胞纤维化,阻碍了水分和营养物质由维管束向花粉囊的输送,从而引起花粉粒败育。而保持系的花药绒毡层细胞在花粉母细胞和减数分裂时期,细胞质浓、染色较深、无早期液泡化现象,在单核花粉粒时期出现解体,一直到花粉粒成熟才逐渐解体消失。该研究为田间鉴定大葱不育系及揭示不育发生的细胞学机制奠定了基础。  相似文献   

酿酒葡萄“赤霞珠”组织培养快繁技术优化     

徐美隆  刘静  王巧珍  袁婷 《北方园艺》2016,(22):117-120

以酿酒葡萄"赤霞珠"为试材,采用组织培养法,研究了不同基本培养基与不同IBA浓度的组合及不同培养容器对酿酒葡萄"赤霞珠"试管苗生长的影响,以期优化酿酒葡萄"赤霞珠"试管苗培养技术体系。结果表明:适合"赤霞珠"试管苗组织培养的最佳培养基为1/2B5+0.2mg·L~(-1) IBA+30g·L~(-1)蔗糖+7g·L~(-1)琼脂+1g·L~(-1)活性炭;在透气膜直径为3.0cm,透光率为90%的玻璃培养容器中,"赤霞珠"试管苗生长健壮,移栽成活率最高,达96.67%。  相似文献   

基于穿刺测试的萝卜耐裂根性研究     

崔磊  袁伟玲  甘彩霞  何云启  邓晓辉  於校青 《长江蔬菜》2016,(20):72-74

为了准确客观地评价萝卜的裂根性,为耐裂根萝卜品种的筛选提供理论依据,采用TA.XT Plus型物性测试仪进行穿刺试验,对耐裂根品种韩玉1号和易裂根品种雪单1号肉质根的上、中、下部位分别进行相关测定。试验结果显示,不同部位的屈服力、屈服能、脆性、根皮及根肉平均硬度的差异并不一致;而耐裂根品种的屈服力、屈服能、脆性与易裂根品种的差异显著,说明屈服力、屈服能、脆性指标可以作为萝卜耐裂根性的主要指标,且均应选取萝卜肉质根中部进行穿刺测试。  相似文献   

不同系统梨品种抗旱性初步评价     

赵德英  徐锴  袁继存  闫帅  张少瑜  侯桂学 《北方果树》2016,(5):7-11

以5大梨系统20个梨品种的2年生盆栽梨苗为试材,研究水分胁迫及复水条件下膜脂过氧化物质、渗透调节物质及抗氧化酶活性的变化特征。结果表明,秋子梨系统梨品种具有较高的净光合速率、气孔导度和水分利用效率,较低的蒸腾速率和叶面饱和蒸汽压亏缺,抗旱性强于其他品种;砂梨抗旱性最弱。随着水分胁迫时间的延长,抗旱性较弱的西洋梨和砂梨MDA和O_2~-含量迅速增加,膜系统受到严重伤害。西洋梨和白梨随着干旱胁迫的加重脯氨酸大量积累,启动渗透调节来缓解水分胁迫造成的伤害。水分胁迫前期不同系统梨品种SOD和POD活性呈持续上升趋势,胁迫过重则活性降低,且抗氧化酶增加的幅度与梨品种的抗旱性呈正相关关系。综合评价认为,秋子梨、新疆梨及白梨系统品种的抗旱性较强,适宜在干旱、半干旱地区发展,西洋梨和砂梨则抗旱性较弱,适宜在湿润、半湿润地区发展。  相似文献