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HAO Feng BAI Xue-song JU Xiao-hong FANG Fang ZANG Yu-xuan ZHU Hang-fei XIANG Guo-yan ZHANG Yun-qiao YUAN Zhong-hai 《园艺学报》2014,30(9):1633-1639
AIM:To investigate the expression of transmembrane protein 16A(TMEM16A) in Fischer rat thyroid follicular epithelial (FRT) cells and its electrophysiologic properties. METHODS:The eukaryotic expression vector of pUB6/V5-TMEM16A was constructed and transfected into FRT cells by liposome-mediated transfection. In order to obtain the high efficiency of gene transfection and expression, the quantity and ratio of lipid/DNA complexes were optimized. The FRT cells stably expressing TMEM16A were gained by the selection with blasticidin and confirmed by the techniques of RT-PCR and immunofluorescence. The expression and location of TMEM16A in the FRT cells were observed under an inverted fluorescence microscope. TMEM16A protein was associated with calcium-dependent chloride current, as measured with halide-sensitive fluorescent protein and patch-clamp technique. RESULTS:The results of double digestion and sequencing indicated that TMEM16A was cloned into pUB6/V5. The results of RT-PCR and immunofluorescence confirmed that TMEM16A was expressed in the FRT cells after transfection with TMEM16A. The classical calcium-activated chloride channel currents were recorded in the FRT cells stably expressing TMEM16A by the technique of patch-clamp and halide-sensitive fluorescent protein YFP-H148Q/I152L. CONCLUSION:The protein expression of TMEM16A in the FRT cells was observed. TMEM16A is the molecular identity of calcium-activated chloride channels. 相似文献
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芽孢杆菌属细菌在芽孢状态下,对外界环境及理化因素具有高度抵抗力。适宜的温度、湿度及营养条件能促进芽孢萌发,影响其对常规灭菌方法的抵抗力。本试验选取蜡样芽孢杆菌作为研究对象,在适宜培养条件下使其形成芽孢,通过研究萌发后芽孢对温度、H2O2及含氯消毒剂等条件的抵抗力,证实了适当的条件(温度37 ℃、湿度40%、pH 7.4、30 min)能有效促进蜡样芽孢杆菌芽孢萌发,致使芽孢对高温(80 ℃、2 h)、H2O2(1.5 mol/L、2 h)及含氯消毒剂(有效氯含量约800 mg/L、2 h)等常规灭菌方法抵抗力明显降低,并能被有效杀灭和灭活,相对有效杀灭率分别达98.4%、98.9%及99.1%,有效杀灭率分别为88.3%、88.7%及88.9%,这对进一步研究芽孢杆菌属细菌的杀菌消毒条件具有重要参考意义。 相似文献
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本文通报了2012年全国家畜血吸虫病疫情状况。在2012年,湖南省、湖北省、江西省、四川省、安徽省、云南省、江苏省等7省共有存栏牛1 033 056头,存栏羊2 024 512只,其他家畜存栏数891 301头(匹、只)。2012年共检查了684 899头牛,其中牛血吸虫病阳性3961头,阳性率0.58%,比2011年的阳性数下降了42.57%;检查了71 473只羊,其中羊血吸虫病阳性406只,阳性率0.57%,比2011年的阳性数下降了4.19%,并对142 976头其他家畜进行了检查,其中血吸虫病阳性为21头,阳性率0.01%。湖南省和江西省的病牛数占到了全国病牛数的80.06%。2012年,全国家畜血吸虫病疫情较之2011年继续下降,但是洞庭湖和鄱阳湖地区依然是今后家畜血吸虫病疫情控制的难点和重点。 相似文献
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研究了钙离子浓度对日本沼虾(Macrobrachium nipponense)感光细胞中可溶性Gq蛋白α亚基含量的影响.以暗适应状态日本沼虾的复眼视网膜为材料,分别用高钙溶液、生理溶液、低钙溶液进行孵育,应用SDS-PAGE及免疫印迹技术对其可溶性蛋白粗提取液进行分离和鉴定,并利用Tanon GIS凝胶图像处理系统对蛋白条带的含量进行分析,结果显示:不同钙离子浓度中孵育的日本沼虾感光细胞蛋白的条带数量和分子量大小基本相同.兔抗Gqα多克隆抗体在高钙溶液、生理溶液及低钙溶液处理的日本沼虾感光细胞中均识别了可溶性Gq蛋白α亚基,分子量为42 ku,可溶性Gq蛋白α亚基的含量分别是8.6%、8.4%和7.2%.在暗适应条件下,细胞中可溶性Gq蛋白α亚基的含量与钙离子浓度成正比,这表明钙离子浓度的升高可促进膜结合的Gq蛋白α亚基转化为可溶性的Gq蛋白α亚基. 相似文献
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