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以猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)WH株基因组DNA为模板,扩增ORF2截短基因,经BamH I/NotI双酶切处理后与经相同酶切处理的pET32a(+)原核表达载体连接,获得重组质粒pET32a-Cap2。将重组质粒转化至BL21(DE3),经IPTG诱导,对表达产物进行SDS-PAGE和Western blot分析。纯化的重组蛋白免疫小鼠,并对获得的血清进行间接ELISA检测和中和活性测定。SDS-PAGE分析表明,ORF2截短基因在大肠杆菌中得到表达,蛋白分子质量大小为40 kDa,重组PCV2 Cap蛋白主要以上清的形式存在。Western blot证实重组蛋白能够识别抗PCV2阳性血清。经间接ELISA检测,鼠抗PCV2 Cap血清抗体效价能达到1:25 600,间接免疫荧光检测分析表明,鼠抗PCV2 Cap血清能特异性识别PCV2感染细胞中的Cap蛋白。病毒血清中和实验证实,抗PCV2 Cap血清抗体具有中和病毒的活性,中和效价为1:36。猪圆环病毒2型Cap蛋白的表达,为进一步研究该蛋白的功能及Cap蛋白亚单位疫苗和检测试剂盒的制备奠定了基础。 相似文献
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在Office办公软件的应用中,word既是不可缺少的,也是学习其它应用软件的基础。我在10多年的实践中,就Word表格应用技巧,总结了如下几点,供大家参考。 相似文献
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在Office办公软件的应用中,word既是不可缺少的,也是学习其它应用软件的基础。我在10多年的实践中,就Word表格应用技巧,总结了如下几点,供大家参考。 相似文献
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为探讨水牛OCT4基因的表达调控模式,本研究扩增克隆了水牛OCT4基因5'调控序列片段,并设计了-2 571 bp、-2 389 bp、-2 338 bp和-2 191 bp 4个不同长度的调控序列片段,分别构建了EGFP表达报告载体.通过生产转基因猪早期胚胎和转染水牛胎儿成纤维细胞分析了不同长度调控序列片段的转录活性.结果发现,在猪4.5d胚胎中各调控序列均能成功启动下游EGFP表达,但转染水牛胎儿成纤维细胞48 h后均表观察到荧光.QRT-PCR分析显示,-2 571 bp片段在4.5d猪胚胎细胞中的转录活性极显著高于其他调控序列(P<0.01),-2 389 hp与-2 338 bp之间差异不显著(P>0.05),二者均极显著高于-2 191 bp(P<0.01).上述结果表明水牛源OCT4基因5 '调控序列在猪早期胚胎中具有转录活性,且翻译起始位点上游2 191 bp片段足以介导OCT4在多能性细胞中的特异性表达;-2 389~-2 338 bp片段上游的CR4亦参与了猪4.5d胚胎中OCT4基因的转录调控. 相似文献
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新年伊始,笔者走进坐落于古九州之一兖州境内的山东大华机械有限公司,从生产车间到研发中心,都是一片火热忙碌的景象,处处绽放出蓬勃向上的活力。为了更好地满足今年市场需求,春节前公司开足马力准备了更为充足的货源。 相似文献
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具体介绍了灯饰照明在园林中的应用形式,结合灯塔小区、北苑新村和丽水学院的现状进行分析,提出了丽水灯饰照明的应用存在的一些问题,并对今后的发展提出展望。 相似文献
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本刊讯山东大华机械有限公司近期在研制开发新型免耕施肥播种机方面取得了新突破。7月16日,中国保护性耕作首席专家、中国农业大学教授高焕文亲临大华公司考察,对公司取得的创新成果给予高度评价,并将公司开发生产的新型免耕施肥播种机认定为"免耕施肥播种二代机"。山东大华是生产保护性耕作系列机械的专业性公司,所生产的免耕施肥播种机在青岛市 相似文献