鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白的原核表达及纯化     

肖星星  柳纪省  殷相平 《中国畜牧兽医》2015,42(4):871-876

本试验旨在表达并纯化鞭毛蛋白,为研究并获得高效蛋白佐剂奠定基础。用PCR扩增鼠伤寒沙门氏菌鞭毛蛋白基因fljB、fljB’和fliC,将扩增产物克隆至pMD19-T Simple Vector上,构建了克隆质粒pMD19-fljB、pMD19-fljB’和pMD19-fliC。克隆质粒经双酶切后将片段克隆至pET-30a中,构建原核表达质粒pET30a-fljB、pET30a-fljB’fliC和pET30a-fliC。经PCR、酶切及测序鉴定后将阳性表达质粒转化至大肠杆菌BL21(DE3)中,诱导表达后的菌体经超声处理取上清,用Ni柱进行纯化。Western blotting证实了表达的蛋白能与豚鼠抗鞭毛蛋白血清发生特异性反应。通过优化表达条件,鞭毛蛋白fljB、fliC和fljB’fliC均以可溶性表达,纯化得到的鞭毛蛋白为后续评价其佐剂效应奠定基础。  相似文献   

栽培条件对红松幼树生长的影响     

殷永志  王丽伟  张晏恺  郝元钦  张鹏 《东北林业大学学报》2022,(5):1-7

选用东北林业大学帽儿山实验林场老山人工林实验站苗圃地培育的同种源同批次红松(Pinus koraiensis)裸根苗木,于2013年春季,将苗木分别定植于全光下的皆伐造林地(王家沟)、老山实验站的苗圃地(老山站)、容器中(容器基质使用苗圃地原土);3种栽培条件的红松苗木均按株行距1 m×1 m进行配置,培育过程中均不施肥;2021年,测定相应指标,以土壤养分、树高、地径、胸径、针叶形态、根系形态、幼树生物量、幼树养分为评价指标,分析不同土壤养分条件对红松幼树生长发育的影响。结果表明：3种栽培条件,土壤养分状况明显存在差异,苗圃地土壤养分相对充足;造林地土壤养分相对不足,土壤全氮、全磷质量分数只有苗圃地的75.0%、82.8%;容器中土壤养分极度缺乏,土壤全氮、全磷质量分数只有苗圃地的40.9%、17.1%。苗圃地红松幼树表现出明显的生长优势;苗圃地红松幼树胸径生长量比造林地、容器中的,分别高出64.3%、207.1%;苗圃地红松幼树根系表面积比造林地、容器中的,分别高出20.8%、53.9%;苗圃地红松幼树生物量比造林地、容器中的,分别高出115.7%、279.3%。苗圃地土壤氮、磷养...  相似文献   

棉花苗期病害的防治措施     

殷德伦  常永霞  丁庆永  李海  孙士启 《中国棉花》2004,31(4):25

鹿邑县既是全国产棉大县 ,又是全国优质棉基地县 ,常年棉花种植面积 2 0 0 0多公顷。自 1 999年起 ,该县杂交棉种植面积每年以 6667公顷的速度递增。 2 0 0 2年种植面积达 2 .8万公顷 ,其中标杂棉2 .7万公顷 ,占当年全县植棉总面积的 98%以上 ,在全国率先实现了棉花种植“一县一种”化。2 0 0 3年种植面积 3.5万公顷 ,其中标杂棉 3.4万公顷 ,再次实现棉花种植全县一种。但随着植棉面积的逐年增大及多年连续种植 ,部分棉田棉花苗期病害发生较重 ,常常造成育苗床大片死苗 ,直播棉田缺苗断垄。鹿邑县农业局、鹿邑县棉花办公室技术人员 ,经过多…  相似文献   

淡水鲨鱼的生态特性及其常见病害与防治     

殷守仁  姜志强  徐立蒲  谭淑荣  秦克静  张黎 《水产科学》2003,22(4):24-26

对淡水鲨鱼的内、外部形态结构进行了描述,并绘制了外观、内部构造、上下颌、鳔、尿殖系统、消化道、肛门与尿殖孔的图谱;介绍了淡水鲨鱼的生态习性与病害防治技术。  相似文献   

小鼠生殖细胞特异基因Oct4启动子片段克隆及报告载体构建     

刘文强  曹晖  殷吉庆  云彦  华进联  雷安民 《农业生物技术学报》2010,18(1):61-65

本研究通过PCR方法从小鼠(Mus musculus)基因组中扩增出Oct4启动子的CR4区和CR1区,将其克隆到真核报告载体pEGFP-1,构建了携带Dct4启动子片段的小鼠生殖细胞特异性报告载体CR1,4-pEGFP-1.用该载体转染多种细胞,在荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白(EGFP)在细胞中的表达情况,同时以半定量RT-PCR检测转染细胞中Oct4及其它生殖细胞特异性基因的转录情况.结果显示,GFP在小鼠胚胎干细胞、小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)和C2C12细胞中均不表达,而在P19细胞和睾丸细胞中表达.RT-PCR结果显示,Oct4在P19、睾丸细胞和生殖干细胞中特异性转录.这表明所构建的绿色荧光蛋白报告载体只在生殖细胞和多能生殖干细胞中内表达,该质粒可作为示踪生殖细胞的工具,同时也可以作为生殖干细胞多能性状态的一个监测标记.  相似文献   

牛生发泡期裸卵体外成熟培养体系的建立     

隋进强  云彦  刘文强  殷吉庆  胡勇策  雷安民 《农业生物技术学报》2010,18(1):198-204

本研究通过牛(Bos taurus)卵母细胞体外成熟培养不同时间(0和10 h),剥除卵母细胞外周的颗粒细胞后继续培养,观察其与不脱颗粒细胞正常体外成熟培养卵母细胞之间的差异.研究结果显示:成熟培养0脱颗粒细胞的卵母细胞,与正常成熟培养的卵母细胞在成熟率(19.51%vs.80.14%,P<0.05)、卵裂率(27.08%vs.82.61%,P<0.05)和孤雌激活胚胎囊胚率(7.69%vs.21.71%,P<0.05)差异显著;成熟培养10 h后脱颗粒细胞的牛卵母细胞,与正常体外成熟培养的卵母细胞相比,在成熟率(82.71%vs.80.14%,P>0.05)、卵裂率(83.01%vs.82.61%,P>0.05)和孤雌激活胚胎囊胚率(19.30%vs.21.71%,P>0.05)无显著差异.向成熟培养10h脱颗粒细胞的卵母细胞内注射pVenus-Hlfoo mRNA,pVenus,pDsRed1-N1和重组质粒pDsRedl-Hle都能够得到表达.非功能标记基因显微注射组与对照组在卵母细胞成熟率(81.42%vs.82.03%,P>0.05)、卵裂率(75.24%vs.78.15%,P>0.05)和孤雌激活胚胎囊胚率(17.42%vs.18.82%,P>0.05)上差异不显著.研究结果提示:在成熟培养10 h,剥离颗粒细胞不会影响牛卵母细胞的发育潜能,这一技术平台可以用于牛卵母细胞体外成熟分子机制的研究.  相似文献   

蟹爪兰搭架一法     

殷兴富 《中国花卉盆景》1999,(4)

一、材料根据植株大小,选择直径0.3～0.5厘米的铝芯塑包电线一段(2米左右)。颜色以绿色最佳,黑、灰、蓝色也可,尽量避用红、黄、白等与花争艳的颜色。二、做法 1.根据盆栽植株高矮,确定立柱的(长)度。其高度应从盆底算起。  相似文献   

南京局在旅检中多次截获桔小实蝇     

顾忠盈  殷连平 《植物检疫》1998,(4)

南京局在旅检中多次截获桔小实蝇１９９７年，南京动植物检疫局的检疫人员在对香港至南京的旅游包机实施旅客捡疫中，先后１１次截获二类危险性有害生物桔小实蝇。其中６月份截获５次，２月和１１月截获２次。截获寄主分别为芒果、荔枝、青枣、龙眼、莲雾等。南京动植物检...  相似文献   

浅谈规模化鸡场种鸡饲养管理     

殷国胜 《中国畜禽种业》2011,7(3):135-136

我国是世界排名第一位的蛋鸡生产大国,但是近年来,整个蛋鸡养殖业持续低迷,从祖代、父母代种鸡到商品苗鸡都出现供过于求的现象,2010年上半年更是出现种鸡苗和商品  相似文献   

控制储油温度延长成品油的储存期     

张运华  殷孟连  王帅 《油气储运》2010,29(9)

降低成品油的储存温度,可延长其有效储油期.山洞油库和覆土油库的储油温度基本为当地年平均气温,研究表明:成品油最优储油温度为16～20℃,基于该储油温度范围,对我国6座城市的地上钢油罐进行了储存温度的研究.在不同的气候条件下,可以采用制冷方式、空调方式、蓄冷方式或复合方式达到成品油长期储存对储油温度的控制要求.当来油温度较高时,应优先选择蓄冷方式在地上钢油罐中储存成品油.  相似文献