猪伪狂犬病gE、gB抗体镧系荧光免疫层析快检试剂盒的研制及效果评估     

王泽洲  陈弟诗  张毅  吴俊清  章健  贺冬梅 《四川畜牧兽医》2020,47(1):33-37

本试验以镧系元素铕(Eu)为荧光标记,用纯化的PRV-gE和PRV-gB表达蛋白抗原建立了检测猪伪狂犬病gE、gB抗体的镧系荧光免疫层析快检试剂盒。经特异性、敏感性、重复性试验及与同类产品的对比试验,得出该试剂盒特异性强、敏感性高、重复性好、符合率高,且质量稳定,保质期长,是实现猪伪狂犬病即时现场快速检测的一种血清学检测方法。  相似文献   

PMA-PCR诊断技术研究进展     

石艳萍  陈弟诗  王印  陈斌  杨悦  张鹏飞  李春  邵靓 《中国动物检疫》2023,40(3):72-78

叠氮溴化丙锭（propidium monoazide,PMA）是一种光反应的DNA结合染料,具有极高的DNA亲和结合能力。PMA可进入死亡和外膜损伤严重的微生物内部,插入DNA结构中,经可见光刺激发生光裂解后,同DNA结合发生共价交联反应,共价交联产物可以抑制DNA的PCR扩增。基于PMA的这一特性,PMAPCR可用于鉴别活死细菌、真菌、病毒等微生物。在实际应用中,PMA-PCR检测结果受样本浊度、活死微生物比例、PMA浓度、暗处理条件（温度、暗处理时间）、曝光条件（光源、光处理时间）、样本处理方法以及目的基因扩增长度等多种因素影响。PMA-PCR已被应用于动植物疫病防控、食品安全、公共卫生等多个领域,具有广阔的应用前景。  相似文献   

基于网络药理学和分子对接探究白杨素和柚皮素抗PEDV的作用机制及试验验证     

植玉鹏  刘雨桐  陈弟诗  宫萌菲  夏学妹  任玉鹏 《中国畜牧兽医》2024,(4):1757-1772

【目的】探讨白杨素和柚皮素抗猪流行性腹泻病毒(Porcine epidemic diarrhea virus, PEDV)的作用靶点和机制,为进一步以白杨素和柚皮素开发新型抗PEDV的治疗药物提供理论依据。【方法】利用PharmMapper、TCMSP、SEA Search Server和STITCH在线数据库获得白杨素和柚皮素的潜在作用靶点,同时检索GeneCards数据库获得PEDV对宿主的作用靶点,利用在线程序Draw Venny Diagram获取白杨素、柚皮素与疾病的交集靶点。通过STRING数据库和Cytoscape 3.9.1软件构建靶蛋白互作(PPI)网络并筛选关键靶点,对靶点进行GO功能和KEGG通路富集分析。通过AutoDock Vina v 1.2.0软件对核心靶点及小分子进行分子对接,并分析白杨素和柚皮素与靶蛋白的结合能和结合模式,利用PyMOL v 2.5实现对接结果的可视化。采用实时荧光定量PCR和Western blotting检测白杨素和柚皮素对核心靶蛋白表达的影响。【结果】白杨素潜在抗PEDV的靶点有12个,其中白蛋白(ALB)、雌激素受体1(ESR1...  相似文献   

喜德县花椒间作马铃薯周年管理技术     

李洪浩  胡正发  陈弟诗  彭期华  叶美琼  刘波微 《四川农业科技》2018,(4)

本文参考喜德县花椒生育特点与马铃薯生产情况,介绍了喜德县花椒间作马铃薯周年管理技术,包括花椒间作马铃薯期间的栽植管理、施肥修剪、病虫害防治、果园清洁等内容,为喜德县花椒与马铃薯优质高产栽培提供技术参考。  相似文献   

几种果实总RNA提取方法的评价   总被引：1，自引：0，他引：1  

陈弟  符贤英  殷晓敏  张荣意 《广东农业科学》2007,(11):30-33

RNA的提取是分子生物学的基本内容之一,高质量的RNA是进行基因克隆、基因表达等研究的必要前提.针对果实中多酚、多糖和次生代谢产物等含量较高的特点,综述了试剂盒法、热硼酸法、异硫氰酸胍法、十二烷基硫磺酸钠法、十六烷基三甲基溴化铵法及其改进方法的原理、特点和在果实RNA提取上的应用,并对不同的提取方法进行了比较.  相似文献   

2020年四川省部分地区腹泻牛群牛冠状病毒感染情况调查     

邓飞  陈弟诗  陈斌  邵靓  陈冬  周莉媛  李丽  邱明双  丁梦蝶 《中国动物检疫》2021,38(9):13-16

为了解四川省主要养牛地区腹泻牛群中牛冠状病毒(bovine coronavirus,BCoV)感染情况,采集眉山、南充、达州、巴中、雅安、甘孜等6个市州53个场户的牛腹泻粪便样品共387份,采用荧光RT-PCR方法进行BCoV检测。结果显示:53个场点中,检出阳性场点11个,群体阳性检出率为20.8%;387份样品中,检出阳性样品65份,个体阳性检出率为16.8%。从群间分布看,规模场群体阳性检出率(72.7%)与个体阳性检出率(21.4%)均高于散养户(7.1%和3.1%),差异均极显著(P 0.01);牦牛个体阳性检出率为28.8%,高于黄牛(14.1%)和奶牛(11.1%),差异均有统计学意义,分别为P 0.01和P 0.05。结果表明,BCoV在四川省已形成一定的污染面,是造成牛腹泻的重要病原之一,需要加强对其流行的综合防控。  相似文献   

兔瘟2型诊断与防控     

邵靓  丁梦蝶  周莉媛  邓飞  裴超信  陈弟诗  陈亮  周明忠 《四川畜牧兽医》2020,47(9)

正兔病毒性出血症2型(RHD2)又称兔瘟2型,是由兔出血症病毒2型(RHDV2)引起的危害家兔和野兔的一种新型高度传染性、急性致死性疫病。该病是世界动物卫生组织(OIE)法定通报疫病,我国将其列为二类动物疫病。RHD2自2010年4月在法国首次报道后,主要在欧洲国家流行。  相似文献   

棉花"双重子房"棉铃形态学与形成因素的研究     

陈弟  张西岭  刘平  汪若海  李秀兰 《棉花学报》2011,23(2):113-120

以陆地棉中棉所16为研究材料,采用植物形态学、解剖学方法及栽培技术对海南冬季棉花多年出现的"双重子房"棉铃进行初步研究.结果表明:双重子房棉铃花蕾的形态由共同的苞叶、花萼、花冠、雄蕊、柱头、花柱及生长在大子房中的小子房所组成;小子房早在棉花开花前已经形成,并与大子房争夺营养物质,导致落铃、烂铃;"双重子房"棉铃的生长发...  相似文献   

猪细小病毒VP2蛋白病毒样颗粒在伪狂犬病病毒表达系统中的表达   总被引：2，自引：0，他引：2  

陈杨  郭万柱  陈弟诗  徐志文  朱玲  王印  王小玉 《中国兽医学报》2011,31(10)

利用PCR技术从猪细小病毒（PPV）SC1株基因组中扩增VP2全基因,并将其插入真核表达载体pPI-2.EG-FP中,构建转移载体pPI-2.EGFP.VP2。采用脂质体介导法将猪伪狂犬病病毒（PRV）SA215株DNA与pPI-2.EGFP.VP2DNA共转染Vero细胞,待出现细胞病变后收集病毒液。经空斑纯化,并同时采用检测PPV VP2基因的PCR方法筛选获得重组病毒PRV SA215/VP2株。以兔抗VP2的多克隆抗体建立的免疫荧光技术可检测到Vero细胞发出的特异性荧光,表明PPV VP2成功插入到PRV SA215基因组中,并获得表达。进一步电镜观察表明,感染PRV SA215/VP2的Vero细胞中可同时观察到PRV与PPV 2种类病毒样颗粒。结果表明,成功实现了利用PRV载体表达PPV VP2蛋白病毒样颗粒,为进一步研制PPV病毒样颗粒疫苗奠定了基础。  相似文献   

火龙果根际土壤微生物2种DNA提取方法的比较     

陈弟  李可增  吴琼  何应对  殷晓敏 《热带生物学报》2019,10(2)

为获得高质量的火龙果根际土壤微生物总DNA,比较了CTAB-SDS法和SDS法的提取效果,结果表明:2种提取方法均获得约23.1 kb的DNA片段。其中,CTAB-SDS法获得的DNA提取上清液颜色为淡黄色,提取总DNA的量为7.4～7.7 mg·kg~(-1),OD_(260/280)值在1.81～1.95之间,OD_(260/230)值在1.26～2.03之间, DNA平均质量浓度为0.51 g·L~(-1)。SDS法获得的DNA提取上清液颜色为深棕黄色,提取总DNA的量为3.5～4.15 mg·kg~(-1),OD_(260/280)值在1.52～1.68之间,OD_(260/230)值在1.35～1.53之间,DNA平均质量浓度为0.075 g·L~(-1)。可见,CTAB-SDS法提取DNA的片段较完整,纯度较高,可直接用于后续实验操作,更适用于火龙果根系土壤微生物总DNA的提取。  相似文献