奶牛粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的原核表达及其活性检测     

傅军科  孙延鸣  张辉  盛金良  肖非 《中国预防兽医学报》2009,31(10)

为了表达奶牛粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)并对其活性进行检测.根据GenBank中登录的牛GM-CSF基因序列(U22385),设计一对特异性引物;采用RT-PCR方法,以LPS体外诱导的奶牛肺泡巨噬细胞为材料,从总RNA中扩增出奶牛GM-CSF cDNA基因,克隆到pGEM-T载体中,经酶切鉴定与序列测定,结果显示克隆的奶牛GM-CSF基因与GenBank中登录的牛GM-CSF基因序列的核苷酸和氨基酸的同源性分别为99.7%和99.3%.构建pET32a-GM-CSF原核表达重组质粒,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE结果显示重组蛋白大小约为35 ku.分别运用集落形成试验与MTT比色法测定重组蛋白活性,结果显示重组奶牛GM-CSF蛋白能够诱导粒细胞前体呈集落性生长并具有较强的体外增殖淋巴细胞的活性,为下一步临床试验奠定了基础.  相似文献   

新疆细毛羊pEGFP-C2-KAP6.1真核表达质粒的构建与鉴定     

沈文  孙延鸣  崔茹鹏  鲁海富  肖林晋  石国庆 《中国畜牧兽医》2012,39(12):17-20

试验采集新疆细毛羊皮肤组织,提取RNA,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术扩增出KAP6.1基因,并通过DNA重组技术将该基因片段重组于pEGFP-C2真核表达载体上,构建pEGFP-C2-KAP6.1重组质粒,并进行PCR、酶切鉴定。结果表明,本试验成功构建了新疆细毛羊的pEGFP-C2-KAP6.1真核表达重组质粒,为进一步研究该基因所编码的蛋白与毛品质的关系,以及培育超细羊毛等经济性生物学性状相互关系提供理论依据。  相似文献   

成年盘羊血液生理生化指标的测定   总被引：3，自引：0，他引：3  

朱晓光  张银国  马长宾  王颜颜  蒋松  孙延鸣 《动物医学进展》2010,31(9)

为了解和掌握盘羊的血液生理生化指标,利用动物全自动血细胞分析仪和半自动生化分析仪对6只盘羊的血液生理生化指标进行了测定,并与同等条件下饲养的家养绵羊的测定结果进行了比较。结果显示,盘羊的淋巴细胞比率、红细胞总数、血红蛋白、红细胞压积、红细胞平均体积、谷丙转氨酶、钙、钾、钠的含量显著高于家养绵羊,差异极显著(P0.01);淋巴细胞、红细胞分布宽度SD、血小板分布宽度、血糖高于家养绵羊,差异显著(P0.05);粒细胞、粒细胞比率、中间细胞、中间细胞比率、直接胆红素、氯的含量显著低于家养绵羊,差异极显著(P0.01);总胆红素的含量低于家养绵羊,差异显著(P0.05)。本试验的测定结果反映了盘羊的生理机能特性,初步建立了盘羊的血液生理生化指标的参考值,为今后加强盘羊的饲养管理、疾病诊断及杂交繁育研究提供了参考依据。  相似文献   

新型抗菌药物防治奶牛乳房炎的研究进展   总被引：15，自引：0，他引：15  

高玉龙  包红梅  孙延鸣  欧阳五庆 《中国奶牛》2000,(3):37-39

防治奶牛乳房炎的氟喹诺酮类药物的抗菌机理、抗菌活性、药代动力学及临床应用。,尤其在药代动力学上,这类药物能进入吞噬细胞内,杀死吞噬细胞内的金黄色葡萄球菌;还可能过血乳屏障,进主乳腺,这在乳房炎的治疗上明显优于其他抗生素类药物。经临床试验,这类药物能显著提高奶牛乳房火的治愈率。  相似文献   

碘缺乏区育肥羔羊饲喂碘化酪蛋白效果的研究     

张高轩  孙延鸣  王开胜 《黑龙江畜牧兽医》2003,(4):14-15

断奶羔羊10只随机分成两组，试验组每天每千克体质量饲喂10－15mg碘化酪蛋白，每月称体质量，采血测其T3和T4，试验3个月扑杀参试羊取甲状腺称体质量观病变。结果3个月试验组平均增体质量比对照组高2.7kg；T3低于、T4高于、T3／T4比值低于对照组，两组甲状腺均无病变。  相似文献   

冬季口服补液盐对蛋鸡产蛋性能及血液生化指标的影响     

孙延鸣  赵宗胜 《山东家禽》1995,(4):8-10

  相似文献   

进口白羽肉种鸡J亚群禽白血病病毒的全基因组序列分析     

马美哥  于蒙蒙  许传田  黄庆华  孟照洁  王素艳  邢立晓  常方方  刘长军  祁小乐  王永强  孙延鸣  王笑梅  高玉龙 《中国预防兽医学报》2019,(7):750-754

为研究引起我国部分地区进口白羽肉种鸡发生禽白血病疫情的病毒来源及其变异趋势,本研究对从进口白羽肉种鸡分离的8株J亚群禽白血病病毒(ALV-J)的全基因组序列进行测序分析。8株ALV-Jgp85氨基酸遗传演化分析显示,其与ALV-J肉鸡分离株(包括ALV-J原型病毒株HPRS-103、美国肉鸡ALV-J分离株、国内肉鸡分离株)及蛋鸡分离株氨基酸序列同源性均低于92.5%,而与国内2014年父母代白羽肉种鸡ALV-J分离株GD14J2同源性较高,为93.5%~95.1%,处于同一分支。8株ALV-J的3'非编码区(3'UTR)在rTM区缺失203bp,DR-1区缺失7bp,E元件位置缺失125bp,仅保留了22个碱基,这一缺失特征与GD14J2一致。8株ALV-J的3'LTRU3区序列与ALV-J肉鸡分离株及蛋鸡分离株的相应基因序列同源性均低于91.5%,而与GD14J2病毒株的同源性较高,为94.3%~96.3%。序列分析发现U3区存在连续11bp缺失和164位碱基突变(C/T),该突变形成2个新的转录调控元件AIBREP1、AIBREP2。综合gp85、3'UTR和U3区序列特征,推测引起本次进口白羽肉种鸡禽白血病的ALV-J与国内2014年父母代白羽肉种鸡ALV-J分离株GD14J2为同一来源。但本次分离到的ALV-J病毒株也有新的变异趋势,这些变异是否与ALV-J致病性相关,还需进一步研究。本研究为ALV-J有效防控和净化提供数据支持。  相似文献   

重组SPLUNC1蛋白对感染绵羊肺炎支原体的盘羊杂交羊的免疫调节作用研究     

刘海燕  王继雪  赵宁  杨义  袁婷  孙延鸣 《中国预防兽医学报》2018,(5)

为研究重组SPLUNC1蛋白对感染绵羊肺炎支原体(MO)后的盘羊杂交羊免疫调节作用,本研究将6只巴什拜羊分为A组,18只盘羊杂交羊随机分为B、C、D组,对实验羊人工感染MO后第5 d,C组气管注射巴什拜羊重组SPLUNC1蛋白、D组气管注射盘羊杂交羊重组SPLUNC1蛋白,每天150μg/只;A、B组每天气管注射等量的生理盐水作为对照组。采用ELISA方法检测各组羊血清中MO抗体水平以及IL-8、IL-12、IL-13表达水平。结果显示,感染前所有实验羊MO抗体均为阴性,感染后第14 d所有实验羊MO抗体均为阳性;IL-8水平在感染后第14 d~21 d,A、C、D组极显著和显著地低于B组(p0.01;p0.05;p0.01)。IL-12水平在感染后第14 d,A、C和D组极显著和显著地低于B组(p0.01;p0.05;p0.01),第21 d时,A、C和D组极显著低于B组(p0.01)。IL-13水平在感染后第5 d,A组显著低于B、C和D组(p0.05),在第7 d~21 d,A、C、D组显著和极显著低于B组(p0.05;p0.01;p0.01)。实验数据表明重组SPLUNC1蛋白对盘羊杂交羊具有明显的免疫调节作用。本研究为绵羊支原体肺炎的治疗提供了实验依据。  相似文献   

奶牛马铃薯中毒     

孙延鸣  高旭红 《中国兽医杂志》1999,25(7)

笔者于１９９７年春，遇见４例奶牛饲喂马铃薯中毒发病，后经综合诊断和马铃薯毒素定性检验，确诊为马铃薯中毒并全部治愈。现就典型病例报道如下。１发病经过１９９７年５月５日乌兰乌苏镇马某饲养的怀孕奶牛，上午喂了马铃薯的芽和薯皮１．０ｋｇ左右，４ｈ后发病。据报...  相似文献   

仔鹿白肌病的防制   总被引：1，自引：0，他引：1  

周自动  赛务加甫  孙延鸣 《中国兽医杂志》1998,24(5):25-25

仔鹿白肌病的防制周自动赛务加甫孙延鸣（石河子大学农学院动科系，新疆８３２００３）白云祥（新疆玛纳斯县兽医站，８３２２００）柯建军（新疆玛纳斯县兰州湾乡兽医站，８３２２００）新疆为贫硒地区，我们在羔羊、仔猪、犊牛、雏鸡中经常发现白肌病，近来又在石河子市...  相似文献