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为分析细胞核转录因子κB(Nuclear factor kappa B,NF-κB)信号通路在丝状支原体山羊亚种(Mmc)感染山羊肺泡上皮细胞中的分子作用机制,将Mmc感染细胞,于4 h、8 h、12 h和24 h收集细胞,利用实时定量PCR检测NF-κBp65 mRNA的表达水平。采用不同浓度的NF-κB抑制剂BAY11-7082与细胞孵育1 h,然后用Mmc感染细胞,于24 h收集细胞,利用实时定量PCR检测白细胞介素-8(IL-8)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)mRNA的表达水平,用试剂盒检测Caspase-3活性、H2O2和NO浓度变化,利用平板计数检测Mmc对细胞的致病力变化。结果显示,Mmc于8 h、12 h和24 h等3个时间点显著提高细胞NF-κBp65 mRNA表达水平(P0.01);Mmc显著提高细胞IL-8 mRNA水平、TNF-αmRNA水平、Caspase-3的活性、H2O2和NO浓度(P0.01),而BAY11-7082(浓度为5μmol/L和10μmol/L)能够显著降低Mmc介导的细胞IL-8 mRNA水平、TNF-αmRNA水平、Caspase-3的活性、H2O2和NO浓度的升高(P0.05),且可显著降低细胞中Mmc存活量(P0.05)。综上可知,NF-κB信号通路在Mmc致病机制中发挥重要作用。 相似文献
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为了检测mTOR抑制剂雷帕霉素(rapamycin)对单核细胞增生李斯特菌(Lm)在小鼠脑微血管内皮细胞内存活的影响,将不同浓度抑制剂雷帕霉素与细胞共同孵育,然后将Lm分别感染细胞,细菌菌落计数法计算胞内细菌数量,MTT法检测抑制剂雷帕霉素对细胞活性的影响,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抑制剂雷帕霉素对Lm介导的IFN-γ和IL-6分泌的影响,利用试剂盒检测caspase-1活性。结果表明:抑制剂雷帕霉素在5、10、25 nmol/L浓度时不影响细胞活性,雷帕霉素显著抑制了Lm在细胞,且与雷帕霉素浓度和感染时间相关,雷帕霉素显著提高了Lm介导的IFN-γ、IL-6、caspase-1、IL-1β和NLRP3的mRNA水平。结论:本研究表明,mTOR抑制剂雷帕霉素可调控细胞内Lm的存活,雷帕霉素可增强Lm介导的细胞炎性体水平,为Lm引起脑膜炎的致病机制提供科学依据。 相似文献
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随着金枪鱼供需格局、贸易政策、资源禀赋等因素变化,其贸易关系呈多样化发展态势,掌握全球金枪鱼贸易网络特征及中国金枪鱼贸易格局变化对中国优化金枪鱼贸易政策具有重要意义。本文采用复杂网络分析法,分别构建冰鲜类和冷冻加工类金枪鱼贸易网络,同时借助枢纽测度指数（Hubness measures index,HMI）测算中国对金枪鱼目标出口贸易伙伴的依赖程度。结果显示：2002—2020年全球冰鲜金枪鱼贸易网络密度由0.027增至0.030,美国、日本和西班牙的中介中心度较高,中国的节点度、中介中心度和强度都较低;冷冻加工金枪鱼贸易的网络密度由0.049增至0.063,泰国的中介中心度稳居全球第一,中国的节点度、中介中心度和强度均显著增加,但中介中心度排名相对靠后;除部分国家（地区）外,中国金枪鱼主要出口市场的HMI都较低且总体呈下降趋势,其中泰国是中国金枪鱼最大的出口市场,但源自中国的金枪鱼占泰国金枪鱼总进口额的平均比例仅为6.9%。研究表明：（1）全球金枪鱼贸易网络密度小,但总体呈增大趋势;冰鲜金枪鱼贸易网络中,美国、日本和一些欧洲国家占据核心地位,对贸易的控制能力较强;冷冻加工金枪鱼贸易网... 相似文献
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将180尾、体质量为(32.81±1.28) g的杂交鲟幼鱼随机均分为4组，分别投喂藤茶粉添加水平为0.00%(A0)，0.50%(A1)、1.00%(A2)、2.00%(A3)的试验饲料，试验共进行60 d，每组3个重复，每个重复15尾鱼，试验结束后，检测杂交鲟的生长性能、血清生化指标和免疫指标、肠道形态指标、消化酶活性和微生物多样性、肌肉组分含量和氨基酸组成。结果表明：与A0相比，A1和A2杂交鲟的终质量、增重率、特定生长率和成活率均无显著变化，A3的终质量、增重率和特定生长率均显著降低；A1的总胆固醇、甘油三酯、白蛋白含量及谷草转氨酶活性均显著升高，A2和A3的谷草转氨酶活性均显著降低；各试验组的血清碱性磷酸酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶活性和总抗氧化能力及肠道蛋白酶、淀粉酶活性均显著升高，A2的脂肪酶活性显著升高，A1的脂肪酶活性显著降低；A1和A2的肠道皱襞高度显著升高；A2的肠道菌群的物种多样性增加；各试验组的肌肉常规成分均无显著变化；A2和A3肌肉的必需氨基酸占总氨基酸的比值显著升高。可见，本研究条件下，适量添加藤茶粉可提高杂交鲟的免疫水平而不影响其生长，添加量以1.00%为宜。 相似文献
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为探讨浙江南部近海常见海洋生物脂肪酸的特点, 采集 31 种海洋生物, 包括海鱼类 20 种, 甲壳类 9 种, 头足类 2 种, 每种 3 份样品, 共 93 个样本, 采用 Folch 法提取脂肪酸, 以气相色谱-质谱法测定其脂肪酸构成及含量。 分析不同海洋生物间总脂(TFA)、饱和脂肪酸(SFA)、单不饱和脂肪酸(MUFA)、多不饱和脂肪酸(PUFA)、n-6 系列多不饱和脂肪酸(n-6 PUFA)、n-3 系列多不饱和脂肪酸(n-3 PUFA)、二十二碳六烯酸(C22:6n3, DHA)和二十碳五烯酸(C20:5n3, EPA)含量的差异。结果显示, 海鱼类、甲壳类和头足类总脂含量范围分别为 18.74~153.90, 24.65~62.81, 37.23~92.18 mg/g; DHA+EPA 含量范围分别为 4.32~38.31, 7.22~22.86, 12.48~49.61 mg/g。浙江南部近海 31 种海洋生物的 n-3 PUFA、EPA 和 DHA 含量均与总脂含量呈正相关(P<0.01), 主要脂肪酸构成具有种属差异, PUFA 和 n-3 PUFA 百分含量与物种食性有关, 摄食浮游植物、底栖藻类的物种高于摄食鱼类等游泳动物的物种。 相似文献
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选取在云南省怒江傈僳族自治州与迪庆藏族自治州之间的德贡公路旁栎树倒木上采集的颜色鲜艳、生长健壮、肉质厚实的野生金耳（Naematelia aurantialba）子实体，经组织分离、初筛、复筛获得优良菌株JE-4。以市场销售金耳分离获得菌株J-5为对照，通过拮抗实验、测定菌丝培养特性和农艺性状以及SSR分子标记比较2个菌株间的差异；通过生产实验分析比较JE-4与J-5的生物学效率和增产率的差异。结果表明：与对照J-5相比，初筛和复筛获得优良菌株JE-4的菌丝生长较好；菌丝生长温度为20～30℃，出菇温度为10～35℃，最适出菇温度为18～20℃；栽培周期（从接种至采收时间）48d；子实体呈金黄色；第一潮生物学效率为（71.26±0.55）%。2021—2022年的多次栽培示范实验中，JE-4在各示范点的第一潮生物学效率显著高于J-5，周期缩短。JE-4整齐度高，朵形较大（直径9.7cm，肉质层厚度3.9cm），开瓣充分，转色均匀，干品正面和反面均呈金黄色（菇根部为白色），无白斑，对照朵形较小（直径7.7 cm，肉质层厚度3.5 cm），开瓣不充分，干品正面暗黄色，背面灰白色；利用6对S... 相似文献
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【目的】探讨泛素结合酶E2T（UBE2T）在布鲁氏菌感染过程中的功能。【方法】构建UBE2T基因过表达载体pLVX-puro-UBE2T，对其进行PCR和EcoR Ⅰ/BamH Ⅰ双酶切验证，并将其转染小鼠巨噬细胞RAW264.7，利用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测UBE2T基因过表达效果。设计并合成3条UBE2T基因沉默表达的siRNA（UBE2T-379-siRNA、UBE2T-599-siRNA和UBE2T-661-siRNA），将其转染小鼠巨噬细胞RAW264.7，利用qRT-PCR检测UBE2T基因沉默表达效果。采用四甲基偶氮唑盐（MTT）试验，检测UBE2T沉默或过表达对RAW264.7细胞活性的影响。利用qRT-PCR，检测M5-90感染对RAW264.7细胞UBE2T基因相对表达量的影响，以及对过表达或沉默表达UBE2T基因的RAW264.7细胞中含pyrin结构域NOD样受体家族3（NLRP3）和半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶1（Caspase-1）基因相对表达量的影响。用布鲁氏菌M5-90菌株感染过表达和沉默UBE2T基因的RAW264.7细胞，用活菌计数法检测UBE2T沉默或过表达对RAW264.7细胞内布鲁氏菌增殖的影响，利用相应的试剂盒检测细胞乳酸脱氢酶（LDH）水平、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶3（Caspase-3）活性及白细胞介素6（IL-6）、IL-18、IL-1β和γ-干扰素（IFN-γ）等细胞因子的水平。【结果】成功构建了UBE2T基因过表达载体pLVX-puro-UBE2T，过表达效果良好。3条siRNA中，UBE2T-661-siRNA的干扰效果最佳，其对UBE2T基因的沉默效率为84%。UBE2T沉默或过表达对RAW264.7细胞活性无影响。M5-90感染可提高RAW264.7细胞UBE2T的表达量；沉默UBE2T可提高M5-90介导的NLRP3和Caspase-1的表达，而过表达UBE2T会抑制M5-90介导的NLRP3表达，提高M5-90介导的Caspase-1表达。沉默表达UBE2T可抑制胞内M5-90的增殖，而过表达UBE2T可促进胞内M5-90的增殖。沉默表达UBE2T可抑制M5-90介导的LDH水平，提高Caspase-3活性及IFN-γ、IL-6和IL-1β水平；而过表达UBE2T可提高M5-90介导的LDH水平，抑制Caspase-3的活性及IFN-γ、IL-1β水平。【结论】泛素结合酶UBE2T对胞内布鲁氏菌增殖具有正调控作用。 相似文献
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为探究环境因子对海蜇耗氧率(oxygen consumption rate,OCR)和排氨率(ammonia excretion rate,AER)的影响，实验通过室内培养，测定了不同pH值、盐度和温度条件下，海蜇幼蜇和成蜇的OCR和AER的变化特征。结果显示，海蜇伞径与干重可用W=0.002 2e0.1248D表示，R2=0.972 4。海蜇幼蜇和成蜇的OCR和AER受pH值、盐度和温度影响显著。海蜇幼蜇和成蜇的AER和OCR随pH值的升高呈现先增大后减小的趋势，幼蜇和成蜇的2种代谢率分别在pH值为7.0和7.5时达到最大值，同时收缩次数最多。海蜇幼蜇和成蜇的AER和OCR随盐度的升高呈现先增后减的趋势，分别在盐度为25和20时达到峰值；盐度为20时收缩力最强。不同规格海蜇的OCR随温度升高而增加；AER则随温度升高呈先增大后减小的趋势，25°C达到峰值。海蜇在21°C时运动和进食最快，温度低于3°C或高于35°C海蜇则停止运动。幼蜇的AER Q10值为0.767～4.362,OCR Q10值为1... 相似文献