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【目的】对香蕉果实非特异性磷脂酶C基因(MaNPC1)开放阅读框(ORF)进行原核表达,并制备其多克隆抗体,为深入探究MaNPC1在香蕉果实抵御炭疽病中的作用机制提供理论依据。【方法】克隆MaNPC1基因ORF序列,对其进行生物信息学分析及抗原性预测,并通过双酶切法构建其原核表达载体,利用热激法转入大肠杆菌Rosetta 2(DE3)感受态细胞中进行诱导表达,重组蛋白经Ni-NTA树脂层析柱纯化后免疫新西兰兔,以制备多克隆抗体。同时,运用Western blotting和实时荧光定量PCR分别检测香蕉果实贮藏过程中在炭疽病侵染胁迫下MaNPC1蛋白表达水平及MaNPC1基因相对表达量。【结果】重组质粒pGEX-6p-3-MaNPC1经双酶切后得到1650 bp的特异性条带,说明原核表达载体构建成功,将其转入大肠杆菌Rosetta 2(DE3)感受态细胞后成功表达。MaNPC1蛋白分子式为C2747H4249N769O793S10,分子量为61.06 k D,理论等电点(pI)为8.96;丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸和丝氨酸含量较高,分别占氨基酸总数的8.7%、8.2%、7.8%和7.7%;不稳定指数为47.14,表明其为不稳定蛋白;蛋白抗原区段丰富且亲水性氨基酸数目明显高于疏水性氨基酸,有利于后续抗体的制备。制备的多克隆抗体效价较高,为1∶2048000。Western blotting检测发现,香蕉果实贮藏过程中MaNPC1蛋白表达水平呈上升—下降—上升的变化趋势;炭疽病侵染组MaNPC1蛋白除贮藏15 d时的表达水平比对照组低外,其他贮藏时间均略高于对照组。实时荧光定量PCR检测结果表明,MaNPC1基因相对表达量在香蕉果实贮藏过程中呈逐渐上升趋势;贮藏3~15 d,炭疽病侵染组MaNPC1基因相对表达量均显著高于对照组(P<0.05)。【结论】炭疽病侵染能提高MaNPC1蛋白表达水平,故推测MaNPC1蛋白参与香蕉果实抵抗炭疽病侵染。 相似文献
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为了研究一种快速且准确鉴别不同种类植物油的方法,采用低场核磁共振技术测定4种不同种类植物油样品的低场核磁弛豫特性,并结合主成分分析法分析低场核磁弛豫特性数据.结果表明:采用低场核磁共振技术的CPMG脉冲序列测定山茶油、花生油、大豆油和玉米油4种植物油横向弛豫时间T2;T2谱包含许多样品内部的信息试验结果,仅通过分析T2谱的方法不能快速直观地同时辨别4种植物油,而通过结合主成分分析法分析处理低场核磁共振T2谱数据能够快速而准确地对4种植物油进行识别.该方法可为4种植物油的鉴别及市场监督体系的完善提供技术支持. 相似文献
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生猪养殖业在广西畜牧业和农业生产中的地位举足轻重,而玉林市是全区养殖密度最高的地区之一。2018年玉林市生猪出栏615.81万头,超过全区生猪出栏量的1/4。我国自2018年8月3日在辽宁省沈阳市首次发生非洲猪瘟疫情以来,非洲猪瘟对我国养猪业造成灾难性的打击。玉林市于2019年5月27日首次在生猪养殖大县博白发生非洲猪瘟疫情,紧接着于2019年7月5日在陆川县也发生非洲猪瘟疫情。非洲猪瘟疫情发生以来,我市整个生猪养殖链都受到沉重的打击,生猪存栏量也急剧下降,全市各有关部门一直在努力推进非洲猪瘟防控的各项措施,取得阶段性成效。按照国务院和农业农村部等各级部门的要求,当务之急是恢复生猪生产、增加生猪产能,最大限度地降低疫病造成的损失。2020年以来,通过对玉林市现存规模化猪场的调查走访,了解到虽然各养殖场生物安全防控意识得到了很大提高,非洲猪瘟也得到了有效控制,但生猪生产仍恢复不到原先水平。为了查清困扰规模化猪场猪群的主要疫病存在情况,本研究对玉林市规模猪场的环境进行了猪群主要疫病病原的调查和分析,旨在为我市规模猪场疫病防控提供参考。 相似文献
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超高压技术,就是在密闭容器内,用水或其他液体作为介质对食品或其他物料施以200-1000兆帕的压力,达到灭菌、改性、加工和保藏的目的.超高压技术不仅能实现在常温或较低温度下杀灭微生物,而且能使淀粉成糊状,蛋白质成胶凝状,从而获得与加热处理不一样的食品质构. 相似文献
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红花檵木叶色变化过程中叶形态特征和色素含量变化 总被引:1,自引:1,他引:1
红花檵木是一种在园林绿化上广泛应用的彩叶植物,夏季叶片会出现"返青"现象,导致观赏价值降低。本文对红花檵木红叶和绿叶、红花檵木回复突变的绿叶以及檵木叶片的叶形态特征和色素含量进行了研究,结果表明:①檵木的叶鲜重、干重、含水量和叶面积都比不同类型的红花檵木叶片下降,但是单位面积的鲜重、干重和含水量增加,质体色素含量和花青苷含量及其各类色素间比值与红花檵木转绿和复绿的叶片相近;②回复突变的红花檵木叶鲜重、含水量、比叶重、叶面积和色素特征等特征均与转绿叶片相似;③红叶转绿后,叶鲜重和叶含水量显著下降,但是叶干重显著增加,各种质体色素含量上升,花青苷含量急剧下降,说明红花檵木转绿过程中逐渐失水,并伴随新物质的积累。 相似文献