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为获得高纯度布鲁氏菌VirB12蛋白,对VirB12分泌表达蛋白先后进行亲和纯化和离子交换纯化。将其作为抗原包被ELISA板,优化反应条件后初步建立了布鲁氏菌抗体的ELISA检测方法。结果表明:蛋白纯化效果良好,重组蛋白纯度可达到98%以上。在建立的ELISA中,纯化重组蛋白的最佳包被浓度为1μg·mL-1,最适封闭剂为5%脱脂奶粉,血清最佳稀释浓度为1∶25,酶标二抗最佳工作浓度为1∶1500。对20份阳性血清及12份阴性血清的检测结果表明,其与SUANOVIR Brucella-Ab C-ELISA试剂盒的总体符合率达到90.6%,表明本试验建立的以VirB12重组蛋白为抗原的ELISA方法可以检测布氏杆菌感染抗体,有望研制成试剂盒用于养殖场布病的检测和净化。 相似文献
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牛结核体外免疫诊断技术 总被引：4，自引：0，他引：4
牛分支杆菌感染的主要特征是引起细胞内免疫反应。现在针对牛结核的诊断试验是以T细胞反应机制为基础的。低敏感性的结核血清学试验是不值得提倡的，血清学试验最好作为细胞学试验的补充而不是替代。最近，发现了牛结核r干扰素试验是一种快速的(24小时)惟一使用全血的体外试验，该方法在澳大利亚地区应用发现，该方法要比传统的结核菌素法诊断牛结核更敏感。假阳性反应的难题归因于所使用的抗原制品间的交叉反应特性，设动物对牛PPD和禽PPD的r干扰素反应作对照可解决假阳性的问题。虽然牛结核特异性蛋白已确认并被分类，这些特异性蛋白可能在血清学或细胞学诊断试验中使用，但是它们可能因牛对结核分支杆菌感染的免疫反应的遗传多样性而受到限制。 相似文献
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猪胸膜肺炎放线杆菌ApxⅣA基因特异片段的克隆和表达 总被引：3，自引：1，他引：3
以猪胸膜肺炎放线杆菌的血清7型国内分离株25-4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增apxIVA特异片段,PCR产物经纯化后与载体PMD18-T进行连接、转化,经酶切及序列分析鉴定后,亚克隆到原核表达载体pGEX-6P-1中,构建成重组表达质粒pGEX-apxIVA,转入到大肠杆菌BL21中,以IPTG进行诱导,进行SDS-PAGE电泳.结果表明,25-4株apxIVA gene与基因库中标准7型apxIVA gene同源性达97%,所表达的融合蛋白相对分子量为44kD,与实际预测相符.apxIVA毒素特异片段的成功表达为猪胸膜肺炎放线杆菌病的诊断打下基础. 相似文献
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猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）是严重威胁养猪业发展的一种重要的病原。近几年来，国内外学者对其进行了深入的研究，尤其在病原的分子生的学方面取得了许多新的进展。病毒的基因组结构及其所编码的蛋白质的功能已基本搞清，这些研究为进一步研究有效的基因工程疫苗、有效控制该病的发生提供理论依据。 相似文献
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2005年4月份,沈阳东陵某养鸽户饲养的鸽群发病。临床表现为张口伸颈,呼吸困难,有摇头和吞咽动作,下痢,有歪头、扭颈和站立不稳等神经症状。根据流行病学调查和实验室检查诊断为鸽新城疫(ND)与巴氏杆菌混合感染。采用相应的综合防治措施后病情得到了迅速控制。现将诊疗结果报道如下。1临床症状与发病情况发病鸽群精神不振,体温升高,采食下降,排黄绿色至墨绿色稀粪,垂头缩颈,翅膀下垂,不愿意飞,口腔和鼻腔分泌物增多,乳鸽死亡严重,多发生于1～10日龄乳鸽,死亡率达到80%左右。2剖检变化剖检死亡乳鸽20只,其中咽部黏膜充血8只;嗉囊充满食糜、肝… 相似文献
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