TTV1与TTV2 SYBR-Green I实时荧光PCR检测方法的建立和应用     

陈欣  符芳  王伟  李雪松  李海忠  宋淑萍  李曦 《中国预防兽医学报》2010,32(12)

为建立输血性传播病毒(TTV)基因1型(TTV1)和TTV基因2型(TTV2)的检测方法,本研究根据TTV1与TTV2基因的非编码区域序列差异,设计了2对特异引物,建立了鉴别TTV1和TTV2的SYBR-GreenⅠ实时荧光PCR方法。分别进行了特异性、敏感性及重复性检验,结果表明:重组质粒建立的标准曲线相关系数为99%;可以同时鉴别检测TTV1和TTV2,检测PCV2和PRRSV阳性样品均呈阴性,表明该方法具有良好的特异性;最低检出量为10 copies/μL;重复试验结果显示,TTV1组内和组间变异系数分别为0.14%和0.74%;TTV2组内和组间变异系数均为0.13%;检测现地采集的189份样品,TTV1阳性率32.3%,TTV2阳性率6.3%,TTV1和TTV2混合感染的阳性率28.6%。TTV检测方法的建立为猪群TTV病的流行病学调查提供了有效的手段。  相似文献   

新城疫   总被引：1，自引：0，他引：1  

符芳  高锐  崔钰  李继昌  李曦 《畜牧兽医科技信息》2006,(3):7-8

1926年在印度尼西亚爪哇岛第一次暴发了鸡新城疫(N ewcastle Disease,ND)。同年,在英国新城地区首次分离到新城疫病毒(Newcastle D isease V irus,NDV)(Buxton et al,2000)。新城疫病毒被确认为新城疫的病原,该病的命名是为了区别于传统上的“鸡瘟”,即现在的高致病禽流感(H PAI)(A lexanderetal,1997)。1942年首次报道了由于实验室事故造成的人类感染新城疫。本文将就新城疫病原学、感染人的临床症状、新城疫病毒对人类癌症的治疗作用以及近年来新城疫病毒在中国鸡群中的暴发4个方面进行综述。1病原学新城疫病毒(Newcastle disease …  相似文献   

应用SYBR Green I实时荧光定量PCR检测Ⅱ型猪圆环病毒     

许洪喜  符芳  鲁晶红  李曦 《中国兽医杂志》2007,43(12):13-14

Ⅱ型猪圆环病毒（porcine circovirus type2，PCV-2）为近年来引起多种综合征的重要病原，且经常与猪呼吸与繁殖障碍综合症、猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪流感病毒发生混合感染。建立对于该病毒的快速检测及准确定量的方法，无疑对于病原诊断及病因学研究具有重要的意义。实时荧光定量PCR具有敏感性高、重复性好、速度快、操作简便和污染少等优点。  相似文献   

猪圆环病毒间接免疫荧光方法的建立   总被引：10，自引：0，他引：10  

崔尚金  全滟平  李曦  符芳  姜艳玲  张莉 《中国预防兽医学报》2007,29(1):63-66

将接种PCV2且经多次传代的PK-15带毒细胞分散到96孔细胞培养板上，制成抗原诊断板，应用间接免疫荧光技术检测血清中PCV2的抗体。通过对各种反应物的工作浓度与作用时间的优化，建立了PCV2抗体的间接免疫荧光检测技术，可用于PCV2抗体水平的监测，为今后的猪圆环病毒疫苗抗体检测的研究提供了检测方法。  相似文献   

猪IL-21的真核表达及其与CD40L共刺激抗体分泌的活性研究     

杨贝贝  符芳  薛美  冯力  刘平黄 《中国预防兽医学报》2019,(5):501-504,533

为研究猪白介素21(IL-21)的生物学功能,本研究在猪IL-21基因(456 bp)的3’端加上猪Ig G Fc标签序列后,将其克隆至真核表达载体pcDNA3.1(-)中,构建重组质粒pcDNA-IL-21-Fc。将该重组质粒转染293T细胞瞬时表达后,利用protein A亲和纯化介质纯化转染上清中的目的蛋白,并检测其纯度与生物学活性。结果显示,构建的重组质粒pcDNA-IL-21-Fc能够在293T细胞中表达相对分子量约为44 ku的猪IL-21融合蛋白;亲和纯化后的猪IL-21融合蛋白能够与CD40L协同呈剂量依懒性地刺激猪外周血淋巴细胞(PBMCs)分泌Ig G。本研究为进一步探究猪IL-21在适应性免疫应答中的作用提供依据。  相似文献   

中国禽流感病毒毒株信息管理系统设计及实现     

王靖飞  李雁冰  吴春艳  李静  李曦  符芳  崔尚金 《中国农学通报》2008,24(1):483-487

为满足国家禽流感参考实验室对中国禽流感毒株信息计算机化管理的需要,通过系统的需求分析,建立了毒株信息数据标准和数据结构模型,在此基础上设计出系统结构,开发出中国禽流感病毒毒株信息管理系统。系统的主要功能包括：信息录入、信息维护、信息查询及统计分析、报表系统以及系统安全等。该系统的开发和应用,实现了参考实验对信息计算机化管理的要求,为中国禽流感毒株信息的管理和利用提供了有效工具。  相似文献   

猪伪狂犬病高免血清的制作与初步应用     

孔令达  符芳  于辉  崔尚金  仇华吉  韩英 《中国预防兽医学报》2004,26(5):359-362

用伪狂犬病抗体阴性健康猪,以不同剂量、间隔一定时间、多次免疫接种伪狂犬病强毒S株,制备伪狂犬病病毒高免血清,试验表明,用本方法制备的伪狂犬病病毒高免血清特异性强、抗体效价高达256倍以上,完全符合诊断用血清标准要求.并将高免血清在中和试验、ELISA、免疫胶体金等进行了对比试验.  相似文献   

细菌性猪呼吸道病病原学及药物防治研究     

谢灯养  符芳  宋波  韩孝成 《中国预防兽医学报》2003,25(5):366-368

以细菌分离鉴定的方法，从病死猪肺脏和种猪的鼻腔分离到7种细菌，初步证明了所分离的猪场存在呼吸道病混合感染，并对7种分离培养物进行了有效敏感药物的筛选，用以指导临床防治与治疗。  相似文献   

鸡传染性支气管炎活疫苗效果好等     

荣骏弓  张金龙  孔令达  符芳  史同瑞 《畜牧兽医科技信息》2003,19(1)

  相似文献   

小檗碱对黄羽肉鸡器官指数、抗氧化能力和肠道免疫功能的影响     

朱翠  黄凯勇  李丽娜  吴爱基  吴鹏  符芳苗  罗苑华  张辉华 《中国畜牧兽医》2022,49(3):932-941

【目的】 本试验旨在研究小檗碱对黄羽肉鸡器官指数、抗氧化能力和肠道免疫功能的影响。【方法】 选用1日龄快大型岭南黄羽肉鸡360只,随机分为3组,每组6个重复,每重复20只。对照组（NC）饲喂基础饲粮;抗生素组（PC）饲喂基础饲粮+200 mg/kg土霉素钙+250 mg/kg那西肽;小檗碱组（BBR）饲喂基础饲粮+250 mg/kg小檗碱。在试验第21、42和63天,从每个重复中随机挑选1只接近平均体重的鸡,采集心脏、肝脏、脾脏和法氏囊分别称重,记录重量,计算其器官指数;刮取空肠黏膜,测定超氧化物歧化酶（T-SOD）、总抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）活性和丙二醛（MDA）含量;提取空肠黏膜总RNA,合成cDNA,测定紧密连接蛋白与炎症因子相关基因的mRNA表达量。【结果】 小檗碱对黄羽肉鸡器官指数无显著影响（P>0.05）。与对照组相比,在饲粮中添加小檗碱显著提高了63日龄黄羽肉鸡空肠黏膜的总抗氧化能力（T-AOC）,显著降低了63日龄黄羽肉鸡空肠黏膜的丙二醛（MDA）含量（P<0.05）。抗生素组21日龄黄羽肉鸡空肠黏膜的闭合蛋白（Occludin）和闭锁小带蛋白-1（ZO-1）的mRNA表达量均显著高于对照组和小檗碱组（P<0.05）。与对照组和抗生素组相比,小檗碱显著提高了63日龄黄羽肉鸡空肠黏膜的跨膜蛋白-1（Claudin-1）的mRNA表达量（P<0.05）,显著降低了21、42与63日龄黄羽肉鸡空肠黏膜的核苷酸结合寡聚化结构域蛋白1（NOD1）的mRNA表达量（P<0.05）;小檗碱组与抗生素组42日龄黄羽肉鸡空肠黏膜的白介素-1β（IL-1β）和白介素-8（IL-8）的mRNA表达量均显著低于对照组（P<0.05）;与对照组相比,小檗碱显著降低了63日龄黄羽肉鸡空肠黏膜的肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、IL-1β、IL-8的mRNA表达量（P<0.05）。【结论】 饲粮中添加250 mg/kg小檗碱可增强63日龄黄羽肉鸡肠道抗氧化能力,改善肠道屏障,降低肠道炎性因子的表达,从而改善肠道免疫功能。  相似文献