全文获取类型
收费全文 | 303篇 |
免费 | 2篇 |
国内免费 | 9篇 |
专业分类
林业 | 6篇 |
农学 | 7篇 |
基础科学 | 8篇 |
3篇 | |
综合类 | 49篇 |
农作物 | 4篇 |
水产渔业 | 1篇 |
畜牧兽医 | 232篇 |
园艺 | 3篇 |
植物保护 | 1篇 |
出版年
2023年 | 7篇 |
2022年 | 6篇 |
2021年 | 5篇 |
2020年 | 11篇 |
2019年 | 7篇 |
2018年 | 17篇 |
2017年 | 2篇 |
2016年 | 2篇 |
2015年 | 5篇 |
2014年 | 3篇 |
2013年 | 6篇 |
2012年 | 19篇 |
2011年 | 17篇 |
2010年 | 16篇 |
2009年 | 12篇 |
2008年 | 13篇 |
2007年 | 9篇 |
2006年 | 22篇 |
2005年 | 18篇 |
2004年 | 14篇 |
2003年 | 16篇 |
2002年 | 7篇 |
2001年 | 19篇 |
2000年 | 22篇 |
1999年 | 14篇 |
1998年 | 5篇 |
1997年 | 2篇 |
1996年 | 5篇 |
1995年 | 3篇 |
1994年 | 2篇 |
1992年 | 2篇 |
1991年 | 1篇 |
1987年 | 1篇 |
1985年 | 3篇 |
1983年 | 1篇 |
排序方式: 共有314条查询结果,搜索用时 15 毫秒
71.
O型口蹄疫病毒不同基因型联合RT-PCR检测方法的建立 总被引:7,自引:0,他引:7
在比较国内外口蹄疫病毒(FMDV)流行毒株序列的基础上,设计了检测FMDV的PCR引物及O型FMDV不同基因型即中国型(Cathay)与乏亚株(PanAsia)的二联PCR引物。在确定单项RT-PCR反应条件的基础上,建立、优化了二联RT-PCR反应体系和条件,并进行了相关病毒检测试验。结果表明,建立的检测O型FMDV不同基因型中国型与泛亚株的二联RT-PCR,有效、特异且敏感,为FMD的诊断、流行病学调查及疫苗应用奠定了基础。 相似文献
72.
鸡新城疫免疫防制的新认识 总被引:1,自引:0,他引:1
新城疫(ND)是极易传染的病毒性传染病,最常侵袭家鸡和珠鸡,也能感染许多其它家禽和野鸟。主要传播途径是呼吸道和消化道。目前大多数国家都采用预防接种作为控制新城疫的主要措施,但由于免疫程序的不同,使用疫苗的类型不同以及综合防制ND的观念上的差异,导致N... 相似文献
73.
中国流行株HIV—1gag—gp120与IL/IL—6共表达核酸疫苗质粒的构建和 总被引:4,自引:0,他引:4
以pcDNA3.1( )为载体,构建了中国流行株HIV-1gag-gp120嵌合基因的核酸疫苗质粒;并以pIRES1neo为载体,构建了gap-gp120与IL-2/IL-6共表达的2种核酸疫苗质粒。将核酸疫苗质粒在体外转染BHK-21细胞,ELISA方法检测到3种核酸疫苗质粒均表达了目的HIV-1结构蛋白。将核酸疫苗质粒免疫小鼠,免疫学指标检测结果表明,在本实验条件下,未能检测到含有gap-gp120的核酸疫苗质粒免疫鼠的细胞免疫和体液免疫功能的明显改变;而与IL-2/IL6共表达的2种核酸疫苗质粒使免疫鼠CD^ 4、CD^ 8T细胞数量明显升高,ConA和LPS诱导的细胞增殖能力显著增强,CTL活性明显提高,表明IL-2和IL-6有效地发挥了免疫佐剂作用。 相似文献
74.
新城疫病毒F基因在新型杆状病毒表达系统中的表达及重组病毒的免疫原性 总被引:5,自引:1,他引:4
将新城疫病毒(四平株)F基因插入到pFastBac Ⅰ质粒中,构建了重组质粒pFF。pFF转化大肠杆菌DH10Bac后,F基因在助手质粒(helper plasmid)提供转座酶的情况下,通过转座进入Bacmid,构建了重组Bacmid(re-Bacmid)。在含有X-gal/IPTG、庆大霉素、卡那霉素和四环素的琼脂平板上,筛选白色菌落后,提取re-Bacmid转染Sf-9昆虫细胞。在昆虫细胞内,re-Bacmid经复制、表达、装配、形成重组杆状病毒,并表达F蛋白。经SDS-PAGE和Western-blot分析,表达的F蛋白的分子大小为63000,并证明在昆虫细胞内表达的蛋白能部分糖基化。表达的F蛋白约占细胞总蛋白的10%。动物试验证明,约建的重组杆状病毒具有良好的免疫原性。 相似文献
75.
将共表达NDV F和IBDV VP0基因重组鸡痘病毒(重组鸡痘病毒vFV282)接种10日龄~11日龄SPF鸡胚,连续传10代,分别对第5、8、10代传代毒进行病毒毒价测定和PCR鉴定;重组鸡痘病毒vFV282接种鸡胚成纤维细胞,分别对第1、5、10、15、20、25、30代传代毒进行病毒毒价测定和PCR鉴定;重组鸡痘病毒vFV282翅翼刺种于鸡体上,连续传8代,对第3、5、8代传代毒进行病毒毒价测定和PCR鉴定。结果表明,重组鸡痘病毒vFV282在SPF鸡胚上传10代、在SPF鸡胚成纤维细胞传30代、在鸡体传8代后,其毒力未返强,F基因和VP0基因未发生缺失和变异。 相似文献
76.
口蹄疫病毒O/LZ株的分子特性分析 总被引:1,自引:1,他引:1
采用RT—PCR方法对口蹄疫病毒O/LZ株基因组序列进行了分子克隆和序列测定。结果表明:获得的0/LZ株除poly(C)和poly(A)外基因组序列长8104nt,其中包括1042nt的5’非编码区和6969nt的多聚蛋白编码区。将O/LZ株与其它参考毒株进行序列比较,结果显示O/LZ株与O/HNK/2002、O/ES/2001、O/CHP/TW/97等遗传关系最近,而与其它毒株遗传关系较远,属于O型口蹄疫Cathay拓扑型。与ME-SA拓扑型PanAsia株的毒株比较,两者在主要抗原位点1和位点3呈现出明显的以拓扑型为特征的氨基酸差别,提示两拓扑型毒株之间有较高的抗原差异。 相似文献
77.
利用杆状病毒表达系统进行了口蹄疫病毒VP1基因在Sf9细胞中的表达研究。首先克隆了VP1基因片段.将pMD18-VP1质粒及杆状病毒转座载体质粒pFastBacⅠ分别用BamHⅠ及Hind Ⅲ酶切后,用T4 DNA连接酶连接。构建了重组质粒pFastBac-VP1;再将该重组质粒转化DH10Bac感受态细菌。在菌体内进行重组,并经三重抗性与蓝白斑筛选。得到杆状病毒重组质粒Bacmid-VP1;将Bacmid-VP1转染Sf9细胞.获得重组杆状病毒.并进行表达水平的检测。经SDS-PAGE和Western-blotting检测。结果表明,VP1蛋白在重组杆状病毒中获得表达。 相似文献
78.
以鸡痘病毒(FPV)疫苗株为载体,将H5亚型AIV血凝素基因(HA)和鸡白细胞介素18(IL-18)基因分别插入到鸡痘病毒表达载体pUTA-16-LacZ复合启动子(ATI-P7.5×20)和单一启动子(P7.5)下游,构建了携带AIV HA基因和鸡IL-18基因的重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTAL-H5HA-IL18.将H5亚型AIV HA基因插入到鸡痘病毒表达载体pUTA2复合启动子(ATI-P7.5×20)下游构建了携带H5亚型AIV HA基因的重组鸡痘病毒转移载体质粒pUTA2-H5HA.应用脂质体转染法,将重组鸡痘病毒转移载体质粒与282E4株鸡痘病毒共转染鸡胚成纤维细胞(CEF),在BrdU药物加压下进行3次蚀斑筛选.以不同代次细胞的mRNA为模板,利用H5亚型AIV HA基因和鸡IL-18基因特异引物进行RT-PCR和蛋白印迹检测,筛选出能共表达H5亚型AIV HA基因与鸡IL-18基因和单独表达H5亚型AIV HA基因的重组鸡痘病毒rFPV-H5HA-IL18和rFPV-H5HA,这些重组鸡痘病毒的构建为AIV活载体疫苗的研制奠定了基础. 相似文献
79.
将马动脉炎病毒大囊膜糖蛋白基因GL插入真核表达载体pVAX1中构建真核表达载体pVAX1-GL,酶切和测序结果表明构建是正确的,用脂质体转染试剂将其转染BHK-21细胞并通过问接免疫荧光试验检测其在体外的表达情况,结果在转染的细胞表面观察到绿色荧光,证明基因得到了表达,而对照则无绿色荧光,本研究为马动脉炎基因疫苗的研究奠定了基础。 相似文献
80.
2000年动物克隆及相关领域研究进展 总被引:9,自引:0,他引:9
1 猪的克隆成功与异种器官移植 继 1 997年绵羊 Dolly克隆成功后[1 ] ,1 998年克隆了牛和小鼠 [2 ,3 ] ,1 999年克隆了山羊[4] 。我国科研人员在1 999年和 2 0 0 0年也成功克隆了山羊[5 ,6] 。在 2 0 0 0年 3月1 4日 ,PPL公司宣布通过体细胞核移植技术产生了 5头克隆猪 [7] 。 5头小猪与作细胞核供体的母猪一样全是雌性。之后 ,Polejaeva等 [8] 和 Onishi等[9] 2个研究组分别在《Science》和《Nature》上报道了通过体细胞核移植技术克隆猪的研究。克隆猪不像克隆绵羊和牛 ,其困难是植入母猪子宫中至少要有 4个以上胚胎才能保证成功… 相似文献