水稻转录因子OsWRKY68蛋白质的表达特征及其功能特性   总被引：1，自引：1，他引：0  

陈悦  王田幸子  杨烁  张彤  马金姣  燕高伟  刘玉晴  周艳  史佳楠  兰金苹  魏健  窦世娟  刘丽娟  杨明  李莉云  刘国振 《中国农业科学》2019,52(12):2021-2032

【目的】 水稻中有近百个WRKY转录因子家族成员,其中很多与生长发育、生物与非生物逆境胁迫应答有关。河北农业大学生命科学学院分子生物学与生物信息学实验室（molecular biology & bioinformatics lab,MBB）前期发现OsWRKY68在水稻接种白叶枯病菌后诱导表达,本研究试图进一步探究OsWRKY68的功能。【方法】 采集水稻TP309不同生长发育时期的组织样品,包括萌发期、幼苗期、分蘖期、孕穗期和开花期的根、茎、叶、叶鞘、叶枕、穗子、花药、颖壳和种子,以及非生物胁迫（4℃、44℃、48℃、淹、NaCl、PEG、恒光和恒暗）和激素处理（脱落酸、茉莉酸甲酯、水杨酸和乙烯利）的叶片,提取总蛋白质,用水稻OsWRKY68蛋白质特异抗体,通过免疫印迹（western blot,WB）技术系统调查OsWRKY68蛋白质在水稻正常发育过程中不同时期、不同组织、非生物胁迫及激素处理条件下的表达特征。构建RNAi载体,通过农杆菌介导的方法转化水稻TP309,对转基因植株进行PCR和WB鉴定,观察OsWRKY68 RNAi转基因植株的表型并测量其株高、分蘖数、穗长、小穗数和结实率等性状。【结果】 调查OsWRKY68蛋白质的表达丰度,发现OsWRKY68蛋白质在水稻正常生长发育过程中基本呈组成型表达,且在大部分组织中表达丰度差异倍数不大,但在开花期的花药中OsWRKY68表达量高于成熟穗、穗轴和颖壳;在分蘖期和孕穗期的叶鞘中不表达,仅在开花期的叶鞘中表达;在孕穗期的幼穗中,随着幼穗长度的增加其表达丰度逐渐降低。调查水稻非生物胁迫和激素处理后OsWRKY68蛋白质的表达特征,发现盐胁迫后OsWRKY68蛋白质的表达丰度随时间延长持续下降,恒光处理后OsWRKY68蛋白质表达量持续上升,3 d时明显出现一条分子质量较大的条带（记作OsWRKY68 ⁺）,且表达量逐渐增加,茉莉酸甲酯（methyl jasmonate,MeJA）和乙烯利（ethephon,ET）处理后同样也呈现OsWRKY68 ⁺蛋白质丰度的增加。对转基因植株进行鉴定和自交繁殖,对T₃代的4个OsWRKY68 RNAi转基因株系（Y316、Y317、Y326和Y337）进行PCR和WB鉴定,均表现阳性。在转基因植株中,OsWRKY68蛋白质的表达量均低于野生型TP309。对转基因植株进行表型观察和性状测量,发现与野生型相比转基因植株的株高降低、分蘖数和结实率下降等。 【结论】 OsWRKY68蛋白质在水稻正常生长发育中发挥作用,敲低OsWRKY68蛋白质的表达能影响水稻的正常生长。OsWRKY68蛋白质可能参与盐、光照、茉莉酸甲酯和乙烯介导的信号转导过程。  相似文献   

花生脂肪酸延长酶基因ＡｈＦＡＥ１及其启动子的克隆与功能分析     

石磊  黄冰艳  齐飞艳  苗利娟  刘华  张忠信  高伟  董文召  汤丰收  张新友 《中国油料作物学报》2019,41(2):176

为探讨花生脂肪酸中低芥酸含量的原因,从花生中克隆了脂肪酸延长酶FAE1及其启动子序列,并进行了功能分析。结果表明,AhFAE1全长cDNA为2 202bp,含有441bp的5?非翻译区及201bp的3?非翻译区,编码蛋白含519aa,分子量58.17Da,理论等电点9.15,AhFAE1与麻疯树（Jatropha curcas ALB76796.1）、黄麻（Corchorus capsularis OMO87584.1）、拟南芥AtKCS4亲缘关系较近。亚细胞定位结果显示AhFAE1定位于内质网。qRT-PCR结果显示,AhFAE1在各个组织中均有表达,在种子中随着种子的发育成“钟”型变化,花后60d表达量最高。构建了植物表达载体,通过农杆菌介导法转化拟南芥研究启动子功能,利用GUS组织化学染色研究其表达特征,在任何组织中未发现GUS活性。推测AhFAE1可能参与了花生长链脂肪酸的合成,但是该基因启动子转录活性弱可能是造成花生中低芥酸含量的主要原因。   相似文献   

绿豆WRKY基因家族的全基因组鉴定及生物信息学分析     

郝青婷  高伟  闫虎斌 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》2023,51(5):59-71

【目的】对绿豆WRKY转录因子在全基因组上进行鉴定及生物信息学分析,为绿豆WRKY基因功能的研究以及高抗绿豆品种培育奠定理论基础。【方法】利用Hmmer软件同源搜索,并通过在线工具SMART、NCBI-CDD和Pfam数据库进行结构域再确认获得79个绿豆WRKY基因,然后通过在线软件ProtParam、ProtScale、SWISS-MODEL分析绿豆WRKY家族蛋白的理化性质、亲疏水性并构建3D立体模型,使用MEGA X、McScanX软件构建进化树和绘制共线性图,利用MEME、PlantCARE在线工具分析WRKY转录因子的保守基序并预测基因上游的顺式作用元件。【结果】鉴定得到的79个VrWRKY蛋白的氨基酸数量为64~746,分子量为7.42~80.93 ku,等电点为4.49~10.41,大多数成员为亲水性不稳定蛋白。系统进化树分析表明,绿豆WRKY基因家族的79个成员可分为Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ 3组,其成员数量分别为16,51和12,Ⅱ组进一步划分为Ⅱ-a、Ⅱ-b、Ⅱ-c、Ⅱ-d和Ⅱ-e 5个亚组,其成员数量依次为2,17,17,7和8,其中Ⅱ-a、Ⅱ-b、Ⅱ-d和Ⅱ-e亲缘关系更近,而Ⅱ-c在进化树上的分布整体更靠近Ⅲ组。基因结构及保守基序分析显示,该家族基因均为间隔基因,且都含有保守基序WRKYGQK。基因染色体定位分析表明,所有成员在11条染色体上均有分布。顺式作用元件分析表明,绿豆WRKY基因启动子区存在丰富的激素及胁迫响应相关的元件。基因组间共线性分析结果表明,绿豆WRKY基因与拟南芥WRKY基因之间存在同源关系。基因复制结果表明,绿豆基因组有1对串联重复基因,15对大片段复制基因,片段复制在绿豆WRKY基因家族扩张中起主要作用。绿豆WRKY蛋白3D结构模拟表明,所有成员具有相似的两种蛋白结构,其中一种立体结构中心含有1个Zn²⁺。【结论】鉴定得到79个含典型WRKY保守结构域的绿豆WRKY蛋白,其生物信息学分析丰富了绿豆WRKY转录因子的分子生物学理论。  相似文献   

明清苏作家具木雕饰面比例与视觉感受相关性分析     

余继宏  高伟霞  吴智慧 《林产工业》2019,56(12)

对明清苏作家具木雕装饰面积比例与木雕饰面繁简程度视觉心理感受的关联性进行研究。将明清苏作木雕家具按照明式和清式分组,基于AutoCAD展开木雕装饰面积测量,并计算饰面比例,通过SPSS软件将样本随机分成7组,结合语意差别量表法分析主观评价与木雕饰面比例之间的对应关系。结果表明:明清苏作家具木雕装饰繁简程度的主观感知受木雕饰面比例显著性正影响;不同职业分组群体中,学生组、导购组、消费者组、设计师组、专家组测试者,对明清苏作木雕家具装饰繁简程度的感知受木雕饰面比显著性正影响,技师组呈正相关不显著。  相似文献   

并绿9号绿豆新品种选育及全程机械化栽培技术研究     

高伟  朱慧珺  张泽燕  赵雪英  闫虎斌  郝青婷  张耀文 《吉林农业科学》2020,45(5):18-20,49

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花生壳研究现状与应用前景分析   总被引：2，自引：1，他引：1  

董文召  韩锁义  徐静  张忠信  高伟  薛璐璐  刘兵 《中国农学通报》2019,35(32):14-19

花生是我国的主要油料作物和经济作物,花生壳作为其副产物占花生产量的30%左右,花生壳含有多种矿物质及功能成分,在农业生产、食品加工、功能性产品开发等方面有重要的应用价值。但是,目前由于研究技术受限及研究工艺落后,花生壳大部分仍用作饲料和肥料,附加值与利用率低。文章对花生壳的组成成分及其在农业、食品、医药、环保、化工及建筑方面的重要应用及关键技术进行综述及分析。认为深入开发花生壳是未来花生壳利用的重要方向,今后应以工艺优化及技术提升为主,将目前实验室阶段的研究成果形成大规模生产,真正实现循环农业和低碳经济。  相似文献   

猪伪狂犬病活疫苗Bartha-K61株对流行毒株的免疫效力研究     

吴文福  黄秋雪  侯高伟  林益坤  赖月辉  牛贝贝  吉艺宽  李宁 《广东畜牧兽医科技》2019,44(3)

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鸡群投药注意要点     

高伟 《农村养殖技术》2008,(1):24-24

鸡痘分为皮肤型(病变在皮肤)、白喉型(病变在口腔、咽喉和气管等黏膜表面)和混合型3种,一年四季都可发生,以雏鸡和中雏发病最多,雏鸡死亡率较高.  相似文献   

基层兽医站与猪场防疫管理     

康伦元  高伟 《畜牧兽医科技信息》2018,(3)

正近几年我国生猪疫情的发生在比较普遍,原因是我国许多地区生猪养殖场规模并不大,分布比较分散,缺乏科学的防疫管理,养殖人员缺乏相应的疫情防治专业知识,从而导致疫病发生并快速传播。因此,基层兽医站对生猪养殖场的防疫管理肩负着重要的任务,这就要求基层兽医站必须做好对生猪养殖场防疫管理,做好养殖场内外的环境卫生消毒,以降低疫情的发生,帮助生猪养殖场避免猪疫病造成的经济损失,提高生猪养殖经济效益。  相似文献   

基于特定赛道的FSAE赛车操纵稳定性仿真分析     

邓召文高伟臧照阳 《拖拉机与农用运输车》2016,(2):7-11

卓越的操纵稳定性是赛车设计的终极目标。利用动力学仿真软件ADAMS/Car模块,建立FSAE赛车整车动力学虚拟模型及8字绕环及耐久赛的赛道模型,并利用试验数据进行模型验证,在验证模型准确性的基础上,基于特定赛道进行赛车的操纵稳定性分析,仿真分析赛车在8字绕环及耐久赛赛道上的稳态定转弯半径特性,并研究分析不同胎压对8字绕环比赛、不同下压力系数对耐久比赛的操纵稳定性影响。  相似文献