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鹅源副粘病毒NA-1株F蛋白基因的克隆及其载体的构建 总被引:13,自引:6,他引:7
鹅源副粘病毒分离株 NA- 1经 1 1日龄鸡胚增殖后收集尿囊液 ,浓缩 ,提取病毒基因组总 RNA,采用 RT- PCR方法 ,一次性扩增出与预期大小相符的特异性条带。将扩增产物提纯回收后克隆入 p MD1 8- T载体 ,经转化、筛选及酶切鉴定后 ,对阳性克隆进行了序列测定和序列分析。测序后拼接的 F基因长 1 6 72 bp,包含完整的开放阅读框 ( 1 6 6 2bp) ,编码 5 5 3个氨基酸 ,F蛋白裂解位点的氨基酸顺序为 1 1 2 R- R- Q- K- R- F1 1 7,与 NDV的强毒株特征相符 ,同时也与鹅副粘病毒分离株致病性试验结果相符。根据 NDV基因分型标准 ,鹅源副粘病毒 NA- 1株归属基因 型 NDV。将 F基因克隆入转座载体 p Fast Bac ,得到重组转座载体 PFF,将 PFF转化大肠杆菌 DH1 0 Bac,提取质粒 ,得到阳性重组穿梭载体 re- Bacm id,为下一步的转染表达奠定了基础 相似文献
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将V13KL编码基因片段克隆到原核表达载体pET30b(+),并在目的蛋白N端设计肠激酶酶切位点,构建出pET30b(+)-VK13L重组质粒,转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3),优化诱导条件,使得抗菌肽得到了高效表达。经Tricine-SDS-PAGE和Westernblotting鉴定,目的蛋白的相对分子质量与预期一致。结果表明,V13KL基因成功克隆并且获得表达,在诱导体系中加入1mmol/LIPTG诱导6h便可检测到蛋白表达。 相似文献
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[目的]综述microRNA(miRNA)表达检测技术的研究进展,为miRNA表达研究及阐明其调控功能奠定基础。[方法]通过概述miRNA表达水平检测技术的原理、特点及进展,说明如何简便有效地检测其表达。[结果]miRNA是一类重要的非编码小RNA分子,调控一系列重要生命过程,其表达研究是研究其调控功能的重要途径,用于检测miRNA表达的方法主要有Northern blot、原位杂交(In Situ Hybridization,ISH)、表达谱芯片、RT-PCR以及克隆测序。[结论]该研究为简便有效地检测miRNA表达提供了方法,为阐明其对动植物重要生命过程的调控机理奠定了基础。 相似文献
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文中对新疆伊犁河流域温性荒漠草地蒿类半灌木生物量随水分条件的变化规律进行了研究。结果显示:随着灌溉水量的增加,单位面积蒿类生物量明显表现出先增加然后下降的变化规律。据灵敏度(Sk)计算,灌溉水量在433kg/(m2.a)时,Sk存在最大值,表明此时地表生物量对灌溉水量变化的响应最为灵敏。根据灵敏度变化曲线将不同灌溉水量下地表生物量变化分为3个区间。灌溉水量在(226kg/(m2.a)—778kg/(m2.a))区间,蒿类生物量增加的幅度超过灌溉水量变化的幅度,实施此灌溉水量可得到最优恢复效果。因此恢复当地草地的合理水量范围确定在(226kg/(m2.a)—778kg/(m2.a))。从水资源利用的效率看,选择228kg/(m2.a)作为蒿类荒漠草地恢复的最小需水量更为合理。 相似文献
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核桃青皮提取物对四种植物枯萎病菌的抑菌作用 总被引:1,自引:1,他引:0
为了研究核桃青皮提取物对4种植物枯萎病菌的抑菌作用,笔者采用甲醇、氯仿、石油醚对核桃青皮进行提取,并对抑菌活性最高的提取物(甲醇提取物)进行初步萃取分离,测定了不同溶剂粗提物和甲醇提取物不同溶剂萃取液对茄子枯萎病菌、黄瓜枯萎病菌、辣椒枯萎病菌和西瓜枯萎病菌的抑菌活性。结果表明,核桃青皮甲醇粗提液对4种供试枯萎病菌的抑制效果最好,浓度为4.0 mg/mL时,对黄瓜、茄子、辣椒枯萎病菌的抑制率均在60%以上,对西瓜枯萎病菌也为37.9%;核桃青皮甲醇提取物石油醚萃取物对西瓜枯萎病菌的抑制效果最好,抑制率为65%,对菌丝生长的EC50为4.45 mg/mL;氯仿萃取物对黄瓜、茄子枯萎病菌的抑制率最高,分别为65%、62.3%,对菌丝生长的EC50分别为4.46、3.51 mg/mL;甲醇萃取物对辣椒枯萎病菌的抑制效果较好,抑制率为63.94%,对菌丝生长的EC50为4.23 mg/mL。 相似文献
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利用CBERS数据测算净耕地系数的可行性分析 总被引:1,自引:1,他引:0
利用CBERS遥感影像数据进行目视解译,扣除各种细小地物,获得基于遥感影像的净耕地系数.通过与实地调查数据验证和比较得出:两种方法获取的净耕地系数非常接近,其相似程度全部在90%以上,且两组数据的成对检验没有显著差异,由此可以认为利用遥感数据测算净耕地系数的方法是可行的;同时,两组净耕地系数回归分析及假设检验的结果表明,两组数据之间存在显著的直线回归关系.表明利用实地抽样调查获取的净耕地系数校正遥感影像抽样调查获取数据的方法是可行的. 相似文献