金黄色葡萄球菌攻击下小鼠泌乳期乳腺炎症病理机制分析   总被引：1，自引：1，他引：0  

李丽  魏春梅  刘代成  杨宏军  何洪彬  王长法  高运东  仲跻峰  彭广能 《山东农业科学》2011,(2):99-102,114

通过观察不同剂量(E1:10 CFU/μl;E2:20 CFU/μl;E3:100 CFU/μl;E4:200 CFU/μl;E5:2000CFU/μl)金黄色葡萄球菌攻击下的小鼠泌乳期乳腺炎症病理变化,选择最佳剂量建立小鼠乳腺内感染模型.结果表明:试验组乳腺组织中分离的细菌数呈先升高后下降的趋势,E3达到最高.组织形...  相似文献   

牛乳中金黄色葡萄球菌山东分离株(zfb)β-溶血素(h/b)的克隆、表达及溶血活性分析   总被引：1，自引：1，他引：0  

杨钦  王长法  杨宏军  杨少华  高运东  仲跻峰  彭广能 《中国农业科学》2009,42(1)

[目的]实现牛乳中金黄色葡萄球菌β-溶血素在大肠杆菌中的高效表达,并分析重组β-溶血素的溶血活性.[方法]PCR扩增牛乳中金黄色葡萄球菌山东分离株β-溶血素基因,构建原核表达载体pET32a+/hlb,并在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,用96孔血凝板测定重组蛋白的溶血效价,以血琼脂平板法检测重组蛋白的CAMP反应.[结果]测序结果表明,扩增片段含有993 bp的ORF,可编码含330个氨基酸的成熟蛋白;SDS-PAGE分析重组蛋白表达水平,IPTG诱导后表达的融合蛋白分子量为57 kD,表达量占菌体总蛋白的23.9%;溶血效价分析,金葡菌β-溶血素对绵羊红细胞的溶血效价为278 HU·mg-1,对奶牛红细胞的溶血效价为9×103Hu·mg-1;重组蛋白在血琼脂平板上和无乳链球菌能发生明显的CAMP反应.[结论]成功表达了牛乳中金黄色葡萄球菌β-溶血素,该毒素对奶牛红细胞的溶血活性明显大于绵羊红细胞,显示出牛源金黄色葡萄球菌β-溶血素的特性明显不同于人源金黄色葡萄球菌β-溶血素,为进一步研究其致病与免疫机理、疫苗设计提供了理论基础.此外,重组蛋白还可用来特异性诊断、鉴别无乳链球菌,为兽医临床诊断提供新的方法.  相似文献   

不同β-胡萝卜素添加水平对荷斯坦种公牛血清指标的影响     

刘汝祥  李文立  李彦芹  王玲玲  宋杰  信富钰  仲跻峰  侯明海 《西北农业学报》2009,18(1):30-32,44

选取20头荷斯坦种公牛,单因子试验设计,随机分为4组,分别饲喂β-胡萝卜素添加水平0、25、50、100 mg/kg的日粮(按日粮风干物质计),试验期为6个月.结果表明:不同β-胡萝卜素添加水平对荷斯坦种公牛血清中β-胡萝卜素、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)和总抗氧化能力(T-AOC)影响极显著(P<0.01),对血清过氧化氢酶(CAT)无显著影响(P>0.05).综合分析表明,种公牛日粮精料中β-胡萝卜素的适宜添加量为50 mg/kg.  相似文献   

不同铜、锰水平对荷斯坦种公牛血清抗氧化指标的影响     

庄怀飞  侯明海  李彦芹  王玲玲  宋杰  仲跻峰  李文立 《勤云标准版测试》2009,29(4)

旨在研究不同铜、锰水平对荷斯坦种公牛血清抗氧化指标的影响.试验选取40头荷斯坦种公牛,随机分为10组,对照组饲喂基础日粮,试验组采用3x3试验设计,分别饲喂不同铜、锰水平的日粮,铜的添加水平分别为4、8、12 mg/kg(按日粮干物质计),锰的添加水平分别为50、125、200 mg/kg,试验期8个月.结果表明:不同铜、锰水平对荷斯坦种公牛血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、超氧化物歧化酶(SOD)、锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)活性及血清一氧化氮(NO)含量差异极显著(P<0.01),对总抗氧化能力(T-AOC)、铜锌超氧化物歧化酶(cuzn.SOD)差异显著(P<0.05),对血清过氧化氢酶(CAT),铜兰蛋白(CP)活性及丙二醛(MDA)含量无显著差异(P>0.05).综合分析不同铜、锰水平下试验牛抗氧化指标的变化.铜的适宜添加水平为4～8 mg/kg日粮千物质,锰的适宜添加水平为50 mg/kg日粮干物质.  相似文献   

金黄色葡萄球菌荚膜多糖的提取及其多糖含量的测定     

孙焕  胡桂学  杨宏军  何洪彬  杨少华  王长法  王洪梅  高运东  仲跻峰 《勤云标准版测试》2009,29(6)

为提取纯化金黄色葡萄球菌荚膜多糖并测定多糖含量.采用超声波破碎菌液,用CTAB结合其中的多糖、CaCl2解离、乙醇沉淀等化学方法提取纯化金黄色葡萄球菌荚膜多糖,利用苯酚-硫酸法测定其含量.结果显示,得到荚膜多糖0.31 g,含量为65.06%.结果表明,成功提取金黄色葡萄球菌荚膜多糖,并对其含量进行了测定,初步确定了粗提金黄色葡萄球茵荚膜多糖的方法.  相似文献   

单味中药多糖对奶牛子宫内膜炎病原菌体外抑菌作用   总被引：5，自引：0，他引：5  

张洪波  葛利江  杨宏军  杨少华  王长法  高运东  仲跻峰 《西南农业学报》2009,22(3)

本实验对山东省3个大型奶牛场的40头患有子宫内膜炎的奶牛进行调查、采样、用常规方法对所采样品进行细菌的分离培养、纯化、鉴定等.利用水煎法提取黄连、大黄、五味子等8味中药的活性成分.通过琼脂平板扩散法对分离率大于5 %的病原菌进行中药体外抑菌试验.结果共分离细菌44株,其中大肠杆菌15株(34 %)、葡萄球菌(金黄色葡萄球菌5株)9株(20 %)、链球菌5株(11.4 %)、粪肠球菌5株(11.4 %)、不动杆菌属3株(6.8 %)、芽孢杆菌2株(4.5 %)、绿脓杆菌2株(4.5 %)、克雷伯氏菌1株(2.2 %)及梭状芽孢杆菌属的厌氧菌2株(4.5 %).中药体外抑菌结果表明,8味中药中,黄连、大黄和五味子等对子宫内膜炎病原菌都表现为高度或中度敏感,其它的中药抑菌效果表现不敏感.分离引起奶牛子宫内膜炎的病原菌并通过体外中药药敏实验的结果为临床治疗提供可靠的依据.  相似文献   

影响荷斯坦种公牛精液生产性状的环境因素分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

李建斌  韩波  张元沛  王玲玲  侯明海  仲跻峰  张沅 《中国畜牧杂志》2012,48(7):9-12

本实验旨在研究环境因素对荷斯坦种公牛精液生产性状的影响,为提高种公牛精液产量提供理论基础。利用山东奥克斯生物技术有限公司123头荷斯坦种公牛21 639条采精日记录,配合一般线性模型,分析采精员、采精季节、公牛月龄、采精间隔对采精量(VE)、鲜精密度(SCPE)、鲜精活力(MSPE)、解冻后活力(SMST)、畸形率(RAS)、单次采精总精子数(NSPE)和单次采精总活精子数(NMSPE)等7个精液生产性状的影响。结果表明:采精员对除SMST(P<0.05)以外的6个性状影响极显著(P<0.01);采精季节对所研究的7个性状影响极显著(P<0.01),冬季(济南)采精可获得最高的VE、NSPE和NMSPE及最低的RAS;公牛月龄对除畸形率(P>0.05)以外6个性状影响极显著(P<0.01),37～60月龄时可获得最高的SCPE、NMSPE;采精间隔对7个性状影响极显著(P<0.01),4 d的采精间隔可获得较高的VE、SCPE、NMSPE和最低的RAS。  相似文献   

荷斯坦牛HSP70-1基因遗传多态性与乳腺炎抗性关系分析   总被引：1，自引：0，他引：1  

程维杰  李秋玲  王洪梅  孙延鸣  王长法  李建斌  仲跻峰 《新疆农业科学》2008,45(6):1187

利用PCR-SSCP和PCR-RFLP相结合的方法检测HSP70-1基因在253头中国荷斯坦牛中的多态性,并分析其多态性与体细胞评分(SCS)的相关性.结果表明,HSP70-1基因扩增片断的1 623 bp处产生G-A的突变,1 623bp处产生G-A-C的突变.两位点都是沉默突变,未引起氨基酸序列的改变.HSP70-1基因分别经EcoRⅡ、BglⅠ、FokⅠ消化后表现多态性.经χ2 适合性检验,中国荷斯坦牛在该位点未达到Hardy-Weinberg平衡状态.同时,群体基因座不同基因型与SCS相关分析的结果表明,2 409位点基因型与SCS相关性不显著,1623位点与SCS相关性显著,CC型SCS指标显著低于AG、GG型(P＜0.05),CC基因型可作为乳腺炎抗性的有利基因型,可将HSP70-1基因作为奶牛乳腺炎候选基因,将应用于分子标记辅助选择育种,为乳腺炎抗性牛群的选育奠定一定的理论基础.  相似文献   

基因多态性与牛疾病相关性的研究进展     

刘利  黄金明  张嘉保  仲跻峰 《中国农学通报》2008,24(10):26-30

基因多态性是指基因组序列上的变异,它是决定家畜对疾病易感性与抵抗力、疾病临床表现多样性以及不同个体对药物反应性的重要因素。研究基因多态性有利于鉴定和定位致病基因和疾病易感基因,使得从遗传学的角度控制疾病成为可能,从而达到减少家畜疾病防治的成本,改良家畜品种,为人类提供健康的动物产品的目的。本文主要从抗病育种的角度综述了近年来基因多态性与牛疾病易感性和抗性的相关研究,并结合遗传信息学和表观遗传学,阐述家畜疾病控制的新进展。  相似文献   

荷斯坦牛TLR2基因遗传多态性与乳腺炎抗性关系分析   总被引：3，自引：0，他引：3  

张翠霞  王洪梅  李建斌  王长法  赖松家  李秋玲  仲跻峰 《华北农学报》2008,23(6)

利用PCR—RFLP方法检测TLR2基因在297头中国荷斯坦牛中的多态性,并分析其多态性与体细胞评分（SCS）的相关性。结果表明,TLR2基因exon2扩增片断的109bp处产生C→A的突变,并导致天冬氨酸突变为谷氨酸。TLR2基因exon2被EcoR V消化后表现多态性,表现AA,AB,BB 3种基因型,其中B等位基因为优势等位基因,等位基因频率为0．7845,而A等位基因频率则为0．2155。经χ^2适合性检验,中国荷斯坦牛在该位点达到Hardy-Weinberg平衡状态。同时,群体EcoR V基因座不同基因型与SCS相关分析的结果表明,BB,AB型个体的SCS指标显著高于AA型（P〈0．05）,AA基因型可作为乳腺炎抗性的有利基因型,可将TLR2作为奶牛乳腺炎候选基因,将应用于分子标记辅助选择育种,为乳腺炎抗性牛群的选育奠定一定的理论基础。  相似文献