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IP-10作为牛结核病诊断标志物的初步探究 总被引:1,自引:0,他引:1
为评价细胞因子IL-12 p40、IP-10和TNF-α转录水平与牛分枝杆菌感染之间的关系,及其在牛结核病诊断中的应用潜力。采集田间筛选的结核病阳性牛、结核病阴性牛以及牛分枝杆菌68002人工感染牛的外周血淋巴细胞,经牛结核菌素(PPDB)、重组蛋白CFP-10-ESAT-6(CE)、MPT63、PET和PBS分别刺激6 h,提取细胞总RNA,用荧光定量PCR检测IL-12 p40、IP-10、IFN-γ和TNF-α的转录水平。结果显示结核病阳性牛的外周血淋巴细胞经PPDB和CE刺激后,其IP-10的m RNA转录水平显著高于结核病阴性牛,且与IFN-γ的m RNA转录水平具有良好的相关性;初步建立牛结核病IFN-γ和IP-10的Real-time PCR检测方法,其对临床阳性样本的检出率分别为71.45%和78.57%。因此,IP-10的m RNA转录水平与牛分枝杆菌的感染相关,有作为牛结核病诊断标志物的潜力。 相似文献
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随着我国畜牧业的发展 ,我国的肉牛养殖发展迅速 ,肉牛存栏量大幅度提高 ,怎样提高养肉牛的经济效益 ?本研究是在肉牛身上进行人工培植牛黄的实验 ,研究植黄对肉牛的繁殖 ,生长与育肥有没有影响 ?在肉牛身上牛黄的产量与质量如何 ?怎样给养殖户带来比较大的附加利润 ?通过研究总结出一套养牛植黄与繁殖为一体的提高养牛经济效益的模式 ,具有很好的推广前景。1 材料与方法1 .1 实验动物 西门塔尔改良肉牛 1 8头 ,均为母牛 ,体重 2 5 0~ 40 0 kg,植黄时年龄 1 .5~ 2岁。1 .2 实验材料 速眠新、3%盐酸普鲁卡因 ;0 .8%盐酸普鲁卡因 ;新洁… 相似文献
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某猎犬 (灵犭是公犬 )追击野兔 ,在短时间内 ,连续跑 3次 ,每次 2 5kg ,跑完后 1h后肢剧烈打颤 ,不能站立 ,倒卧在地 ,呕吐 ,腹泻 ,全身僵直 ,经及时抢救脱险。1 临床症状全身肌肉强直 ,肛门松弛 ,大便失禁 ,结膜潮红 ,舌暗紫色并伸出口外而不能缩回 ,眼睑对刺激反应微弱 ,心率不齐 ,呼吸迫促 ,肺部有湿性口罗音 ,结膜潮红 ,体温 39℃。诊断为充血性心力衰竭并发严重肺充血的过劳综合征2 发病原因病犬长期不打猎 ,缺乏运动锻炼 ,饮食营养很高 ,肥胖 ,突然打猎 ,剧烈活动 ,机体各组织器官需血量和静脉回流量急剧增多 ,迫使心脏加强收缩… 相似文献
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根据GenBank上发表的牛种布鲁氏菌SP41基因序列,设计合成了一对特异性引物。从牛A19疫苗中提取全基因组DNA作为模板,PCR扩增出SP41基因,连入pEASY-T3载体,测序结果表明,扩增的片段含有1 302个核苷酸,编码433个氨基酸的成熟蛋白,与已报道的布鲁氏菌2308、A-13334、S19、9-941序列的氨基酸同源性为100%;与布鲁氏菌ATCC、CCM4915、M28、M5-90、NI的氨基酸同源性为99.8%。布鲁氏菌SP41基因的克隆,为获得重组SP41蛋白及对其结构和功能的研究奠定了基础。 相似文献
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gD糖蛋白是IBRV感染细胞的主要分子,在病毒吸附和侵入宿主细胞中发挥着重要作用。利用IBRV基因组DNA为模板,经生物学软件DNAstar分析主要抗原区,PCR扩增gD基因786bp片段,定向连接到pET32a(+)表达载体中,筛选阳性克隆转化BL21(DE3)表达菌中,IPTG诱导表达部分可溶的重组蛋白。Ni-NTA非变性纯化系统纯化蛋白,纯化的蛋白免疫新西兰兔制备抗血清,利用间接ELISA法检测抗血清效价为1∶6400;同时以该血清进行血清中和病毒实验,中和指数为1∶640,显示该抗血清具有良好的抗病毒能力,为进一步开发牛传染性鼻气管炎(IBR)的诊断检测试剂和疫苗奠定了重要基础。 相似文献
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为了探究牛分枝杆菌Mb1230蛋白在牛结核病诊断中的应用价值,本试验利用PCR方法扩增出Mb1230基因,构建重组质粒pET-22b-Mb1230,经IPTG诱导表达后用亲和层析纯化重组蛋白,通过结核菌素皮内变态反应试验(TST试验)、IFN-γ释放试验(IGRA试验)和间接ELISA对重组蛋白的活性进行评价。SDS-PAGE和Western blotting结果显示,重组蛋白大小与理论值相符,且能与鼠抗His的抗体反应有特异性条带;在TST试验、IGRA试验和间接ELISA中也表现出抗原活性。结果表明,重组Mb1230蛋白具有良好的B细胞活性和T细胞活性,在牛结核病诊断中具有应用潜力。 相似文献